厚凌宇
- 作品数：8 被引量：26H指数：4
- 供职机构：北京市农林科学院植物保护环境保护研究所更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 紫茎泽兰多糖诱导烟草对烟草花叶病毒的抗性被引量：4
- 2015年
- 在紫茎泽兰(Eupatorium adenophrum)中提取紫茎泽兰多糖(EAP),用EAP、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)对幼苗长至8叶期时(第七叶完全展开)的三生烟(Nicotiana tabacum cv.Samsun NN)进行抗性试验处理,分析EAP对TMV侵染烟草叶片的预防作用、EAP对系统宿主防御性酶活影响、EAP诱导病程相关基因在烟草叶中的表达,探讨EAP对烟草植株抗TMV的诱导作用。结果表明:EAP对TMV侵染有良好的预防作用,当EPA质量分数为10%时,预防效果最佳(为82.79%);EAP可以通过调节植物防御系统,减弱TMV对烟草的损害。EAP处理过的烟草植株多酚氧化酶(PPO)酶活在第4天达到最高,是水处理组的3.54倍;过氧化物酶(POD)酶活在第3天达到最高,是水处理组的1.59倍;超氧化物歧化酶(SOD)酶活第2天达到最高,是水处理组的2.69倍;说明EAP可以有效的诱导寄主产生防御性酶,以抵抗植物病毒侵染。EAP能够诱导酸性PR蛋白PR-1α、PR-3、PR-5在烟草叶中表达,PR-1α、PR-3、PR-5都在EAP处理后5 d达到最高峰,PR-1α是水处理组及阴性对照组的5.27、12.06倍;PR-3是水处理组及阴性对照组的7.93、26.31倍;PR-5是水处理组及阴性对照组的5.60、8.09倍;提高了病程相关基因PR-1α、PR-3、PR-5的表达。
- 厚凌宇田兆丰谢响明
- 关键词：烟草烟草花叶病毒诱导抗性
- 不同番茄品种对番茄黄化曲叶病毒的抗病性分析被引量：8
- 2016年
- 【目的】番茄黄化曲叶病毒病(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)是一种影响全世界番茄生产的病害,培育抗病品种是最有效、经济和持久的防控手段。目前生产上应用的抗病品种繁多,但存在对TYLVC不同抗性基因的抗性水平研究甚少、了解不够全面的问题。为了解带有不同抗性基因的番茄品种对番茄黄化曲叶病毒病的抗性,对北京市农林科学院蔬菜中心培育的番茄品种抗病性进行检测,并利用半定量RT-PCR方法分析抗病基因和抗病蛋白的表达水平。【方法】选取携带有Ty3a/Ty3a的番茄材料秋光285(Ty3a纯合)、棚137×246(Ty3a杂合),携带Ty1+Ty3a纯合的秋光120、携带Ty1+Ty3a杂合的秋光81和感病对照M82为试验材料,观察番茄植株自然条件下发病情况。通过调查发病率和病情指数,考查这些番茄品种的抗病性,并利用RT-PCR方法分析抗病基因Ty1和Ty3a以及病程相关蛋白葡聚糖酶和几丁质酶基因的表达水平。【结果】携带抗性基因的杂合体、纯合体抗病性差异不明显,含有两个抗性基因和含有单一抗病基因品种的抗病性稍有差异,但差异不显著。半定量RT-PCR结果显示不同番茄品种在感染TYLCV后,体内抗性基因表达量随着发病时间的增加,Ty-3a和Ty-1的表达量逐渐增强。Ty-3a在4个番茄品种中表达水平由弱到强依次为秋光285(Ty-3a纯合)、棚137×246(Ty-3a杂合)、秋光120(Ty-1+Ty-3a纯合)和秋光81(Ty-1+Ty-3a杂合),Ty-1在秋光81中的表达显著高于在秋光120中的表达。同时,植株体内葡聚糖酶和几丁质酶基因表达量均比对照显著增加,并随着发病时间的增加逐渐增强。在发病20 d和30 d后,携带Ty-1+Ty-3a杂合的秋光81的葡聚糖酶基因表达显著强于其他几个品种。【结论】几个番茄材料对TYLCV的抗性由弱到强依次为秋光285(Ty3a纯合)、棚137×246(Ty3a杂合)、秋光120(Ty1+Ty3a纯合)和秋光81(Ty1+Ty3a杂合)。不同番茄抗病品种感染T
- 田兆丰刘伟成厚凌宇谢华罗晨柴敏
- 关键词：番茄黄化曲叶病毒抗病基因病程相关蛋白半定量RT-PCR
- 番茄黄化曲叶病毒病抗性材料的筛选鉴定被引量：8
- 2014年
- 为评估新培育番茄栽培品种对番茄黄化曲叶病毒（tomato yellow leaf curl virus，TYLCV）的抗性水平，更全面地了解这些品种的抗病性差异，以金棚1号和金曼为感病对照，采用带毒烟粉虱自然传毒方式，对各品种的发病时间、发病率及病情指数等参数进行比较。结合PCR及ELISA对TYLCV的检测结果，综合分析了18个番茄品种对番茄黄化曲叶病毒的抗病性。结果表明，不同品种对TYLCV的抗性差异较大。金棚1号和金曼两份材料发病率都达到100％，病情指数在65．2以上，属于典型的感病品种：秋光15—6、PC-88和秋光69号3份材料发病率和病情指数均为0，属于抗性较高的品种；其他13份材料的发病率和病情指数分别在5．6％～45．2％和2．6—18．0之间，分别表现了不同程度的抗、耐病水平。
- 田兆丰卢向阳厚凌宇罗晨柴敏
- 关键词：番茄品种番茄黄化曲叶病毒抗性鉴定
- 小链霉菌Yn168抗病毒活性组分的分离及其稳定性研究被引量：4
- 2015年
- 为进一步了解小链霉菌Yn168代谢产物中抗病毒活性物质的化学本质,为其作用机理的研究和产品开发提供依据,对该小链霉菌产生的抗病毒物质的活性组分进行了分离纯化及稳定性研究。经过乙酸乙酯萃取、三氯乙酸沉淀、Sephadex G-75柱层析、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),证明小链霉菌Yn168发酵液中的活性成分为2个组分的蛋白质Ⅰ168和Ⅱ168,分子量分别为34,22 k Da。稳定性研究表明,抗病毒蛋白在温度超过60℃、p H值小于6或大于8以及紫外线照射时间超过8 h的条件下,抗病毒活性均明显下降。所以,该小链霉菌的抗病毒活性成分为2个组分的小分子蛋白质,适于在较低温度、酸碱度接近中性及避光条件下保存和使用。
- 田兆丰刘霆吴慧玲厚凌宇刘伟成
- 关键词：分离纯化稳定性
- 嗜热绿色糖单孢菌木聚糖酶XyN10A基因在毕赤酵母中的分泌表达及其酶学性质研究被引量：1
- 2014年
- 木聚糖酶(Xylanase)可降解自然界中大量存在的木聚糖类半纤维素,由于其在饲料、食品、造纸等领域的广泛应用,越来越受到人们的关注。利用分子生物学技术首次成功构建了一株高效表达嗜热绿色糖单孢菌(Saccharomonospora viridis)木聚糖酶SviXyN10A的重组工程菌,建立了SviXyN10A的毕赤酵母表达体系,实现了SviXyN10A在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的分泌表达,并对表达产物进行了诱导表达及纯化,以及酶学性质的研究。结果表明,重组木聚糖酶SviXyn10A用甲醇诱导2 d后酶活即达到7.53IU/mL,最适反应温度为70℃,pH7.0。pH作用范围较广(pH5.0-9.0),具有较强的热稳定性和耐碱性,几乎没有纤维素酶活性,故可以应用在很多工业领域,尤其是在纸浆造纸行业具有很大的潜在应用价值。
- 玉王宁刘伟娜郑菲厚凌宇王晓宇梁迪王伟轩张朔柳静言金一谢响明
- 关键词：木聚糖酶分泌表达毕赤酵母
- 灰色链霉菌中乙酰木聚糖酯酶基因的克隆、表达及酶学性质研究被引量：1
- 2015年
- 根据Gen Bank数据库中已报道的灰色链霉菌(Streptomyces griseus)全基因组序列,分析得到假定的乙酰木聚糖酯酶基因序列并设计引物;利用分子克隆的方法得到该菌株基因组中乙酰木聚糖酯酶基因,并构建原核表达载体p ET28a-Sgraxe,经IPTG诱导表达重组Sgr Axe,Ni-NTA亲和层析法纯化该蛋白。结果显示,克隆得到乙酰木聚糖酯酶基因axe,其序列全长1 008 bp,编码336个氨基酸。SDS-PAGE检测带有p ET28a-Sgraxe转化菌株诱导表达产物相对分子量约为37 k D,与理论值相符。纯化的重组Sgr Axe酶学性质表明,该酶最适反应温度为50℃,最适p H8.0,热稳定性较强,p H作用范围广;金属离子对酶均表现为抑制作用,尤其是Zn2+严重抑制酶活力;重组酶特征的分析揭示了其在工业中潜在的应用价值。
- 刘伟娜梁迪王晓宇玉王宁厚凌宇金一谢响明
- 关键词：灰色链霉菌原核表达纯化酶学性质
- 白色链霉菌乙酰木聚糖酯酶基因的克隆及生物信息学分析被引量：1
- 2012年
- 乙酰木聚糖酯酶可以水解乙酰化木聚糖中的O-乙酰取代基团,消除该基团对木聚糖酶水解的空间阻碍作用,增强木聚糖酶对木聚糖的亲和力和降解能力。以白色链霉菌基因组为模板,利用简并PCR和TAIL-PCR扩增获得长约741 bp阅读框片段,编码247个氨基酸。生物信息学分析表明,该多肽片段具有AXE1家族蛋白保守区域;与已知的乙酰木聚糖酯酶蛋白C端区相比,相似性较高,二级和三级结构空间排布特点极为相似;初步判定该多肽片段为白色链霉菌乙酰木聚糖酯酶的C端区域。
- 汪文静吴慧君王晓宇杨颖厚凌宇郑瑞珠谢响明
- 关键词：白色链霉菌基因克隆生物信息学
- 微流控芯片在植物细胞研究中的应用进展
- 2016年
- 植物细胞的传统分析方法是将植物细胞在土壤或者琼脂平板上生长,然后在温室或植物生长室内观察植物的表型。这种方法耗时耗力,且结果分辨率比较低。微流控芯片具有微型化、体积小和高通量等特点,且可在微米水平精确控制植物细胞生长的微环境。因此,能够降低实验成本,缩短实验时间,并且可以达到单细胞水平的分析和鉴定。首先介绍了微流控芯片的加工材料和制备方法,总结了用于植物细胞研究的微流控芯片,重点阐述了近年来微流控芯片在植物根、花粉管、原生质体和细胞壁动力学等植物细胞研究中的应用进展,并展望了微流控芯片在植物细胞研究的应用前景。
- 王伟轩孙静弈刘伟娜厚凌宇玉王宁何湘伟谢响明
- 关键词：微流控芯片聚二甲基硅氧烷植物细胞
