高跞
- 作品数：50 被引量：69H指数：5
- 供职机构：上海市血液中心更多>>
- 发文基金：上海市卫生局青年科研基金上海市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 以总RNA转染的方式将Bcr-Abl抗原基因导入树突状细胞并表达特异性蛋白P210的实验研究
- 目的树突状细胞是目前已知唯一能激活未致敏T 细胞(na?ve T cells),诱导初始免疫反应的抗原提呈细胞 (antigen presenting cells,APC)。本课题利用K562细胞株,来探讨RNA抗原负载...
- 高跞范华骅聂晓绚龚裕春刘嬿杨懿铭高峰
- 文献传递
- CⅡTA反义RNA抑制皮肤成纤维细胞表面MHCⅡ类抗原表达
- 2003年
- 目的探讨用纳米载体介导主要组织相容性复合物(majorhistocompatibilitycomplex,MHC)Ⅱ类抗原转录激活因子(MHCⅡtransactivator,CⅡTA)的反义RNA,抑制皮肤成纤维细胞表面MHCⅡ类抗原表达的可行性。方法将CⅡTA反义RNA(pDarⅡ质粒)稳定转染人类原代皮肤成纤维细胞(pDarⅡ-D),流式细胞仪检测pDarⅡ-D表面经典的MHCⅡ(HLA-DR、-DP、-DQ)类抗原表达,RT-PCR检测CⅡTA及经典的MHCⅡ类分子的mRNA水平。体外混合淋巴细胞反应检测pDarⅡ-D组刺激外周血T细胞反应的能力。结果与正义链组比较,在重组人干扰素(IFN)-γ诱导下,pDarⅡ-D组HLA-DR及-DP抗原诱导性表达分别降低了95.63%、87.89%;同时CⅡTA及经典的MHCⅡ类分子的mRNA含量明显减少(P<0.01);pDarⅡ-D组刺激T细胞分泌IL-2mRNA水平降低(P<0.05)。结论CⅡTA反义片段抑制了自身mRNA含量,从而阻止了其调控的MHCⅡ类分子的相应表达。
- 郭荣邹萍陆华中范华骅曹谊林崔磊刘伟商庆新郑滨高跞高峰
- 关键词：主要组织相容性复合物皮肤成纤维细胞反义RNA抗原表达
- 抗慢性粒细胞性白血病bcr/abl mRNA真核表达载体的构建被引量：3
- 2003年
- 目的 构建一个含M1RNA、具有特异性抗慢性粒细胞性白血病 (CML)细胞融合基因bcr/ablmRNA的真核表达载体 ,以用于CML的分子靶向治疗。方法 以pTK117为模板 ,通过PCR方法合成一个带有导引序列 (GS)的M1RNA ,再将PCR产物克隆到真核表达载体pNAV 1上 ,得到重组质粒pAVGS4,转化大肠埃希菌JM 10 9,以碱裂解法小量抽提 ,酶切电泳鉴定 ,并测序鉴定。结果 以EcoRⅠ和SalⅠ酶切、1%的琼脂糖凝胶电泳显示在 5 0 0和 65 0 0bp附近各有一条明亮的条带。应用PCR方法测序的结果与模板序列一致。 结论 构建的 pNAV 1经酶切和测序鉴定 ,与目标序列一致 ,含有核酶、具有抗bcr/ablmRNA的真核表达载体构建成功 。
- 陈波斌林果为郭荣陆华中范华骅肖娟高跞高峰
- 关键词：BCR/ABLMRNA慢性粒细胞性白血病核酶真核表达载体
- CD8+FOXP3+Treg细胞来源外泌体输注胶原诱导关节炎小鼠模型中的治疗作用及其机制
- 目的初步探讨CD8+FOXP3+Treg细胞来源外泌体在自身免疫动物模型中的作用及其机制。方法采用超速离心的方法对CD8+Treg细胞培养上清进行分离获得外泌体成分。分别采用NTA、Western Blotting和透射...
- 杨懿铭杨洁谢如锋高跞孙娟蒋雪玉
- 黄芩苷通过调节Treg/Th17比例抑制红细胞输注小鼠模型中的IgG的生成
- 目的自1970年代起,我国便广泛应用茵陈汤于预防母胎Rh和ABO血型不合引起的新生儿溶血病。开展这项研究是为了评估茵陈汤中的1种主要成分黄芩苷能否抑制红细胞免疫并阐明其潜在的机制。方法我们将人类红细胞与佐剂脂多糖(LPS...
- 蒋雪玉刘李栋孙娟杨洁向东杨懿铭高跞谢如锋
- 低氧诱导因子-1α基因体外转染内皮祖细胞的可行性及对其成内皮细胞活性的影响
- 2006年
- 目的探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因体外转染入内皮祖细胞(EPCs)的可行性及对其表现型的影响。方法构建真核表达载体pEGFP-HIF-1α。分离外周血单个核细胞(PBMC)及脐血CD34+单个核细胞(MNCCD34+)。采用电穿孔基因转染,荧光显微镜检测转染效率,逆转录聚合酶链反应检测HIF-1α的表达。培养1周后,分为4组:A组:只加入血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导培养;B组:转染入空质粒pEGFP-C1,并加入VEGF、bFGF;C组:转染入pEGFP-HIF-1α质粒;D组:未加VEGF、bFGF诱导。采用流式细胞仪检测CD31阳性细胞百分率。结果构建的pEGFP-HIF质粒基因序列与基因库(U22431, gi:881345)HIF-1α的CDS编码区完全一致。PBMC转染效率达38％,MNC CD34+转染效率达到42％。PBMC培养1周时,A、B、C组间CD31阳性率的差异无显著性(P值均>0．05),但均显著高于D组(P值均<0．05)。MNCC CD34+培养1周后,A、B、C组间CD31阳性率的差异无显著性(P值均>0．05)。结论真核表达载体pEGFP-HIF体外电穿孔转染入PBMC,提示转染HIF-1α能促祖细胞向内皮细胞分化,效果与加入细胞因子诱导相似,其能增加祖细胞增殖活性。
- 邵琴王长谦范华骅何奔姜萌高跞聂晓绚刘嬿
- 关键词：低氧诱导因子单个核细胞内皮祖细胞内皮细胞
- 脐血、外周血内皮祖细胞分化成内皮细胞的实验研究被引量：3
- 2006年
- 目的探讨人的脐血、外周血内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells,EPCs)体外分离、纯化、诱导扩增和分化为内皮细胞的可行性,并检测其表型和功能。方法新鲜脐血和健康成年人的外周血,使用Ficoll密度梯度离心法得单个核细胞,在M199培养基中体外培养,3d后去除悬浮细胞,继续培养,诱导EPCs增殖和分化。流式细胞仪检测EPCs标志CD34和内皮细胞特异性标志CD31表型,RTPCR检测ecNOS,flk1/KDR基因水平表达,免疫组化验证蛋白水平表达,并进一步通过NO活性的变化检测内皮细胞的功能。结果流式细胞仪检测,外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcells,PBMC)刚分离时,CD34阳性表达率为(1.1±0.8)%,培养3d后为(16.9±6.2)%。细胞形态观察发现,刚分离的单个核细胞呈圆形,形态小,3d后有明显集落形成,7d后梭形细胞线样排列,随培养时间增加,细胞形态逐渐变大,呈现出典型铺路石样改变。脐血单个核细胞(umbilicalcordbloodmononuclearcells,CBMC)和PBMC培养10d后,CD31阳性表达率分别为(76±17)%和(82±9)%。RTPCR检测有内皮细胞特异性成分ecNOS,flk1/KDR的表达。免疫组化染色,细胞膜和细胞浆中有弥漫性棕色出现,呈阳性反应,证实了蛋白水平的表达。培养10d的贴壁细胞随着VEGF浓度增加,NO生成增加,具有内皮细胞的功能。结论脐血,外周血EPCs体外分离,纯化,诱导培养后的贴壁细胞表型检测,大部分细胞具有内皮系标志物,并具有产生NO功能。
- 邵琴王长谦范华骅姜萌刘嬿聂晓绚高跞
- 关键词：内皮祖细胞内皮细胞
- 利用白细胞层制备树突细胞被引量：2
- 2002年
- 郑滨陆华中范华骅王黎高跞顾莉华周文清沈志祥李军民王振义高峰
- 关键词：树突细胞肿瘤治疗学体外制备
- 纳米载体介导的基因治疗研究
- 范华骅陆华中高峰郑滨高跞刘燕聂晓绚
- 该项目进行了将纳米技术、基因工程技术与干细胞工程技术结合起来，促进基因治疗的研究。该项目：以丙烯酸甲酯和乙二胺为起始单体合成聚酰胺－胺树枝状聚合物（PAMAM Dendrimer），该聚合物纳米载体可有效地将目的基因（绿...
- 关键词：
- 关键词：纳米载体介导基因治疗肿瘤
- CⅡTA反义cDNA抑制Hela细胞表面MHCⅡ类抗原的表达被引量：3
- 2003年
- 目的 探讨Ⅱ类主要组织相容性复合物 (MHCⅡ )激活因子 (CⅡTA)的反义cDNA对细胞表面MHCⅡ类分子表达的抑制。方法 克隆 3条CⅡTA反义片段 (arⅡ 1、arⅡ 2、arⅡ 3) ,并稳定转染Hela细胞。免疫组化、流式细胞术检测细胞核内CⅡTA蛋白及其调控的经典MHCⅡ (HLA DR、 DP、 DQ)类抗原表达 ,RT PCR法检测CⅡTA、经典MHCⅡ及恒定链的mRNA水平。结果 三种反义片段中arⅡ 2效果最佳。在重组人IFN γ诱导下 ,arⅡ 2阳性Hela细胞与正义链组比较 ,CⅡTA蛋白抑制率达87.2 3% ,HLA DR、 DP及 DQ抗原诱导型表达分别降低了 79.2 1%、90 .31%及 4 8.30 % ;同时CⅡTA、经典的MHCⅡ及恒定链的mRNA含量明显减少 (P <0 .0 5 )。结论 CⅡTA反义片段抑制了自身mRNA含量 ,从而阻止其调控的MHCⅡ分子的表达 ,为预防移植物抗宿主病提供了一种新思路。
- 郭荣邹萍范华骅崔磊曹谊林郑滨高跞高峰陆华中
