袁世山
- 作品数：116 被引量：365H指数：11
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪源乙型脑炎病毒HEN0701株全基因组分子特征分析
- 乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是一种重要的人畜共患病病原,它可感染人和马、野生水禽及猪等多种动物。人感染发病后,致死率和致残率均高,对人类健康危害巨大。猪感染后,不仅可引致...
- 郑浩邓宇袁世山
- 文献传递
- PRRSV-PCV2重组病毒的构建及PRRSV转录调控机制研究被引量：4
- 2008年
- 目的本研究旨在探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染性cDNA克隆作为猪圆环病毒(PCV2)的主要免疫原开放阅读框架2(ORF2)表达载体的可行性,以及利用重组病毒对PRRSV复制转录过程进行解剖。方法以北美株PRRSV感染性克隆pAPRRS为平台进行反向遗传操作,分别在pAPRRS的ORF1和ORF2间,ORF5和ORF6间,ORF6和ORF7间插入PCV2ORF2,且对拯救病毒vPCV进行了病毒学及分子生物学鉴定。结果vPCV的sg mRNA2.1利用了PRRSV mRNA2的转录调控序列(TRS),形成由PRRSVGP2和PCV2衣壳蛋白组成的sgm RNA2.1。外源基因的插入同时也导致重组病毒启用新的TRS而产生3条新亚基因组,其中sgm RNA2.2和sgm RNA2.3采用PCV2上的序列来取代PRRSVRNA2本身的TRS;另一条sgm RNA2.4则为非经典型亚基因组,其TRS在PRRSV相应的AUG下游。结论2株PRRSV-PCV2重组病毒可以稳定传代,为进一步研发PRRSV遗传标疫苗奠定了基础;插入片段上一些类似TRS序列的引入及插入片段(718bp)过长导致PRRSV ORF2TRS本身和其两翼序列的RNA结构变化是引起重组病毒遗传不稳定性的最主要原因;PRRSV可以利用TRS样外源序列作为转录启动子,这为进一步解剖PRRSV复制转录过程奠定了基础。
- 郑海红孙志朱兴全袁世山
- 关键词：猪繁殖与呼吸道综合征病毒
- 高致病性猪蓝耳病病毒重组质粒和遗传工程疫苗
- 本发明提供了一种高致病性猪蓝耳病病毒重组质粒的构建方法，以及根据该重组质粒构建的遗传工程疫苗及构建方法。根据蓝耳病病毒基因相对保守区的序列设计多对引物，分段扩增蓝耳病病毒基因序列，并依次连接到合适的载体中，获得猪蓝耳病病...
- 袁世山吕健李祥健张建武余丹丹孙志高飞韦祖樟庄金山谭涛郑海红谭菲菲刘长龙陆嘉琦丛雁芳王小敏郑浩
- 文献传递
- 套式病毒转录调控机制的研究进展被引量：1
- 2009年
- 郑海红朱兴全袁世山
- 关键词：转录启动子
- 猪蓝耳病病毒反向遗传操作及应用
- 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)是套式(或巢状)病毒目(Nidovirales)动脉炎病毒科(Arteriviridae)的成员，目前对该类病毒复制的调控机制知之甚少。我国06年以来所暴发的所谓“猪高热综合症”对...
- 袁世山余丹丹谭菲菲刘长龙袁海峰丛雁芳韦祖樟孙志高飞吕键王小敏庄金山李祥健张建武郑海红
- 关键词：猪蓝耳病猪蓝耳病病毒反向遗传操作分子生物学
- 文献传递
- 中国部分地区猪细环病毒1型和2型的分子检测被引量：12
- 2010年
- 细环病毒(TTV)是近年来发现的一种新型人畜共患DNA病毒,广泛存在于包括人类和家畜在内的多种哺乳动物中。目前我国猪群中TTV的流行病学报道较少。为研究猪细环病毒(PTTV)在我国的流行情况,采用聚合酶链反应(PCR)对2009年我国9个省市部分发病猪场中的PTTV1和PTTV2进行检测。结果显示,191份病料中PTTV的总阳性率为77.0%(147/191),其中PTTV1的单一阳性率为68.6%(131/191),PTTV2的单一阳性率为53.9%(103/191),两基因型的共感染率为45.5%(87/191)。进一步分析发现,在不同猪场、不同年龄猪群、不同病料组织中,PTTV的感染情况均不相同。此外,对41份健康猪的血清进行检测,结果显示,PTTV总阳性率、PTTV1单一阳性率、PTTV2单一阳性率及两基因型的共感染率分别为43.9%(18/41)、36.6%(15/41)、24.4%(10/41)和12.2%(5/41)。结果提示,发病猪体内PTTV总阳性率、PTTV1单一阳性率、PTTV2单一阳性率及两基因型的共感染率均显著高于健康猪(P<0.01)。PTTV在临床上是否对猪致病或与其他病原有协同作用,需进一步研究。
- 翟少伦龙进学岳城袁世山
- 关键词：聚合酶链反应
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆的构建被引量：11
- 2007年
- 目的确定"猪高热综合征"的主要病原是否为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),为探寻高致病性病毒基因组结构和功能、高致病性蓝耳病发病机制,以及进一步研制针对后者的基因工程疫苗奠定基础。方法根据PRRSV基因组序列设计特异性引物,分5段扩增了高致病性PRRSV JX143株的全长cDNA,将各cDNA片段克隆到pBlueScriptⅡSK(+)载体中,进而利用重叠区中的单酶切位点将其连接成JX143株的全长cDNA克隆pJX143和含有遗传标记MluⅠ限制性内切酶的基因组全长cDNA克隆pJX143-M。结果全长cDNA克隆经体外合成RNA后转染MA-104细胞,均获得稳定的拯救病毒。通过比较亲本病毒与拯救病毒的病毒滴度、多步生长曲线和利用拯救病毒vJX143进行动物回归试验,结果发现病毒学及生物学特性没有显著差异。结论PRRSV的JX143株病毒确实是引起"猪高热综合征"的主要病原;建立了首个高致病性PRRSV的感染性cDNA克隆,证明拯救病毒与亲本病毒生物学特性相同。
- 吕健孙志张建武刘维全袁世山
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆高致病性动物回归试验
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒5′非翻译区一茎环结构的功能解析被引量：1
- 2010年
- 以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)北美株感染性克隆为平台进行反向遗传操作,利用突变PCR将5′非翻译区(5′UTR)中部分一级序列进行系列突变,以改变5′UTR二级结构中的一保守茎部结构,从而解析PRRSV5′UTR中结构与功能的关系。通过DNA转染MARC-145细胞观察突变体克隆的感染性,并通过免疫荧光及Northern blot来研究拯救后突变病毒的复制、转录特性,以及通过空斑形态学分析突变病毒的生长特性。结果表明,PRRSV5′UTR中保守茎部结构的二级结构与病毒的拯救无直接关系,但其一级核苷酸序列却是PRRSV病毒复制所必需的,作者还找到直接调控病毒复制的核心位点。由此证实了5′UTR中调控PRRSV复制过程的必需序列,为进一步解析PRRSV复制过程的调控元件奠定了基础。
- 陆嘉琦高飞刘萍袁世山
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒病毒复制基因表达调控
- 兔出血症病毒分离培养和鉴定研究
- 杜念兴徐为燕龚晓明吉传义袁世山
- 该研究主要是鉴定1984年在中国发现的一种兔烈性传染病的病原。主要成果如下：(1)1984年首次报道该病为一种新的病毒病，定名为兔病毒性出血症，其病原为兔出血症病毒(RHDV)。(2)完成RHDV分类鉴定的各类指标，病毒...
- 关键词：
- 关键词：兔病毒性出血症兔出血症病毒灭活疫苗
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白末端序列在病毒复制过程中的作用分析
- 核衣壳蛋白(Nucleocapsid protein)是猪繁殖与呼吸综合征病毒((Porcine Reproductive andRespiratory Syndrome.PRRS))的最主要的结构蛋白,在病毒粒子的包装...
- 谭菲菲韦祖樟孙志庄金山袁世山
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白病毒复制MARC-145细胞
- 文献传递
