童光志
- 作品数：879 被引量：3,793H指数：30
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 马传染性贫血病毒(EIAV)嵌合感染性分子克隆的体外构建
- 马传染性贫血病毒(equine infectious anemia virus EIAV)导致马持续性感染和反复病毒血症,与人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)同属反转录病毒科慢病毒属,二者有很多相似的特性.EIAV是遗传结...
- 涂亚斌王柳刘红全仇华吉童光志
- 文献传递
- 一种制备口蹄疫抗原和高免血清的新方法被引量：1
- 2006年
- 口蹄疫是一种一类传染病,其病原为口蹄疫病毒(FMDV)。FMDV衣壳蛋白VP1含有中和性抗原表位。本研究合成了编码O型FMDVVP1蛋白中和性抗原表位的双拷贝DNA片段,将其克隆于原核表达载体pGEX-6p-1中,以获得的重组质粒转化大肠杆菌,然后用IPTG进行诱导,表达出了大小约为33kDa的GST融合重组蛋白,Westernblotting分析证实,重组蛋白可以被O型FMDV抗血清所识别。用纯化的重组蛋白免疫豚鼠制备高免血清,ELISA检测表明,免疫后的豚鼠血清抗体滴度可达1∶20560以上。本研究提供了一种制备口蹄疫抗原和高免血清的新方法。
- 李艳仇华吉曲晶升张守发童光志
- 关键词：口蹄疫病毒抗原表位重组抗原高免血清
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株感染性分子克隆的建立及拯救病毒的鉴定被引量：5
- 2011年
- 为构建高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染性克隆,本实验根据 PRRSV HuN4 株基因组序列设计并合成 PRRSV 特异性引物,应用 RT-PCR 技术分6段扩增了 PRRS VHuN4 株全基因组 cDNA。将扩增的各个cDNA部分重叠片段分别克隆于 pBlueScriptⅡSK(+)载体中构建了感染性重组质粒 pHuN4。并在病毒 cDNA5'末端引入 sp6 启动子序列便于后期的体外转录获得病毒的转录本,在3'末段 Poly(A)尾引入 NotⅠ酶切位点用于线性化 pHuN4;此外,将 HuN4 基因组第14680位的A沉默突变为G产生一个 MluⅠ酶切位点作为鉴定拯救病毒的分子标记。pHuN4 通过酶切线性化后经体外转录及转染BHK细胞,并在 Marc-145 细胞中救获病毒。结果显示:救获的病毒能够在 Marc145 细胞引起明显的细胞病变;间接免疫荧光检测以及分子标记验证结果表明病毒拯救成功,而且拯救的病毒与亲本强毒生长曲线没有显著差异。利用拯救的第5代克隆病毒株对本动物进行致病性试验,结果显示实验猪在感染后第3d开始出现体温升高、厌食、消瘦等临床表现,发病率达100%,在感染后20d内陆续死亡,表明拯救的病毒保持了与亲本病毒株相一致的致病特征,以上研究证实我们成功的构建并获得 PRRSV 强毒 HuN4 株感染性克隆,为从基因水平上研究 PRRSV 的致病机制提供了技术平台。
- 张善瑞周艳君朱建平童武姜一峰童光志
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性分子克隆
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白羧基端抗原表位的鉴定
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)是一个球形、有囊膜的单股正链RNA病毒,是猪繁殖与呼吸综合征的病原体(Wens...
- 周艳君安同庆刘金霞贺云霞仇华吉王云峰田志军彭金美童光志
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白单克隆抗体抗原表位
- 马传染性贫血强/弱毒嵌合病毒的体外构建
- 马传染性贫血病毒(equine infectious anemia virus,EIAV)引起马传染性贫血(简称马传贫),导致马持续性感染和反复病毒血症.为了探讨LTR在EIAV病毒复制和转录过程中的作用,并进一步研究E...
- 涂亚斌王柳仇华吉温建新谷守林童光志
- 关键词：嵌合病毒体外构建马传染性贫血病毒分子克隆
- 文献传递
- 抗乙型脑炎病毒非结构蛋白NS1单克隆抗体的制备与鉴定被引量：6
- 2009年
- 本研究利用原核表达的乙型脑炎病毒(JEV)SA14-14-2株非结构蛋白NS1作为免疫原,免疫8周龄BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术进行融合,共获得4株特异性针对JEV NS1的杂交瘤细胞,分别命名为1H6、2C3、3A7、4C8,经测定1H6单抗亚类属于IgG2b,其他3株为IgG1,轻链均为κ链。4株杂交瘤细胞诱生小鼠腹水效价分别达1∶20480、1∶2560、1∶20480、1∶10240,western blot证实所得杂交瘤细胞分泌的抗体均可与JEV NS1蛋白发生特异性反应,间接免疫荧光试验表明1H6、3A7、4C83株单抗能够识别天然的JEV NS1蛋白。本研究为进一步探究JEV NS1蛋白结构及其功能奠定了基础。
- 王斌华荣虹赵付荣刘天强于海杜鹃童光志
- 关键词：乙型脑炎病毒非结构蛋白单克隆抗体
- 乙型脑炎病毒基因组cDNA克隆在宿主菌中不稳定因子的研究
- 黄病毒基因组cDNA克隆在大肠杆菌中易于出现碱基替换、核苷酸缺失和外源序列插入等不能稳定遗传现象.为探求病毒基因组中原核启动子和相关序列对该现象的影响，以猪源乙型脑炎病毒HEN0701株基因组nt l.2913克隆pTH...
- 郑旭晨郑浩郭亦非刘飞梁超童武童光志
- 关键词：乙型脑炎病毒
- 表达传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因和新城疫病毒F基因重组禽痘病毒构建及其免疫效力初步研究
- 随着集约化养殖发展,呼吸系统疾病的预防越来越重要,其中传染性喉气管炎（ILT）和新城疫危害严重,而且现有的疫苗有一定的不足,导致疾病防制非常困难。因此,对于疫病的防制寄希望于新型疫苗。禽痘病毒表达系统是表达禽类病原基因的...
- 智海东王云峰王玫孙永科王利丽张绍杰童光志
- 关键词：鸡传染性喉气管炎病毒新城疫病毒重组鸡痘病毒
- 文献传递
- 鸡γ-干扰素基因的分子克隆与序列测定被引量：29
- 2000年
- 应用逆转录 -聚合酶链式反应 ( RT-PCR)技术 ,从 Con A诱导培养 2 4 h的鸡脾淋巴细胞中扩增得到了大小约 50 0 bp的基因 ,将其平端连接到 p UC1 9质粒上 ,进行质粒 PCR和 Eco RI、Hind 双酶切鉴定后 ,筛选阳性重组克隆。序列分析表明 ,该基因阅读开放框架由 4 92个核苷酸组成 ,与马和人γ-干扰素基因序列的同源性分别为 3 5%和 3 2 %,与鸡 型干扰素基因的同源性仅为 1 5%,与国外报道的鸡 γ-干扰素基因序列完全一致。表明鸡脾淋巴细胞受到有丝分裂原刺激后 ,其 γ-干扰素基因 m RNA发生了表达 ,试验成功地克隆得到了鸡
- 刘胜旺陈洪岩孔宪刚张宝山马云燕童光志卢景良
- 关键词：Γ-干扰素淋巴细胞基因克隆
- 表达传染性喉气管炎病毒gB基因重组鸡痘病毒疫苗免疫持续期试验
- 将200003批疫苗免疫4周龄SPF鸡,免疫后的7、14、21、30、60、90、120、150、180和225天分别采血,分离血清,采用ELISA方法检测血清抗FPV抗体,结果表明重组疫苗免疫后14天,免疫鸡血清抗体已...
- 王云峰智海东王玫彭金美仇华吉周艳君田志军张绍杰童光志
- 关键词：传染性喉气管炎鸡痘重组鸡痘病毒免疫持续期免疫效应
- 文献传递
