高飞 作品数:175 被引量:222 H指数:8 供职机构: 中国农业科学院上海兽医研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 经济管理 生物学 更多>>
猪繁殖与呼吸综合征防控专利技术现状与发展趋势 被引量:1 2014年 以中国专利文献检索系统(CPRS)和德温特世界专利索引数据库(WPI)为文献来源,对国内外猪繁殖与呼吸综合征防控领域的专利申请状况进行了检索和分析,主要分析了专利申请的整体趋势、国家和地区分布、申请人、技术主题等方面,并提出如何提高我国猪繁殖与呼吸综合征领域专利申请质量和科研转化的建议。我国申请人可以通过分析结果调整技术研发方向,着重应用性研究成果转化。同时,应放眼全球,在世界范围进行合理的专利布局、合理利用优先权制度、形成自主知识产权。 吕健 高飞 袁世山 童光志关键词:猪繁殖与呼吸综合征 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)5'末端病毒RNA合成相关茎环结构的界定 <正>1介绍像其他动脉炎病毒一样,猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)的5非翻译区(5''''Untranslate... 高飞 陆嘉琦 韦祖樟 袁世山 李丽薇 周艳君 姜一峰 童光志文献传递 介导PRRSV ORF1a/1b间程序性-1核糖体移码的刺激元件为假节结构 <正>1目的PRRSV复制酶翻译过程涉及程序性-1核糖体移码,但PRRSV程序性-1核糖体移码信号的结构和作用机制尚不清楚。为研究PRRSV程序性-1核糖体移码信号的结构和移码机制以及移码在病毒生命周期中的作用。本研究采... 韦祖樟 高飞 姜一峰 周艳君 袁世山 童光志文献传递 猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白磷酸化位点鉴定及其作用研究 被引量:1 2017年 为了探索猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白磷酸化对于病毒复制和转录的影响,本研究利用Phos-tag和点突变技术实现了N蛋白磷酸化形式的分离并鉴定出磷酸化位点为第120位丝氨酸(Ser120)。通过反向遗传操作系统将N蛋白的磷酸化位点突变并拯救出病毒。空斑实验、IFA检测、病毒生长曲线结果显示,磷酸化位点突变对于病毒的感染性和N蛋白的核定位没有影响,但是病毒的复制能力减弱。进一步利用荧光定量RT-PCR方法检测突变病毒与亲本病毒在不同感染时间的基因组RNA和亚基因组RNA的转录水平,结果表明突变病毒的g RNA和长链sg RNAs转录水平明显低于亲本病毒,表明N蛋白Ser120磷酸化可能参与了病毒的转录调控过程。 刘欢 姜一峰 黄勤锋 杨莘 张文超 虞凌雪 高飞 周艳君 童光志关键词:PRRSV N蛋白 磷酸化 转录调控 猪源MHC Ⅱ类分子反式激活因子CIITA SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:1 2022年 Class Ⅱ Transactivator(CIITA)作为重要的MHCⅡ类分子反式激活因子在抗原递呈细胞的成熟和功能实现过程中发挥关键作用,为建立一种快速检测猪源CIITA基因的方法,本研究根据GenBank中猪源CIITA基因序列设计引物,从猪肺泡巨噬细胞的总cDNA中扩增CIITA基因,并克隆到pCold-TF载体中获得重组质粒pCold-TF-CIITA。利用重组质粒pCold-TF-CIITA作为标准品建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法。试验结果显示:该方法在1.68×10^(1)~1.68×10^(7) copies/μL范围内呈现出良好的线性关系,检测灵敏度可达16.8 copies/μL,组内和组间变异系数均小于1%。利用该方法对不同细胞中的CIITA基因进行检测,结果显示该方法仅能够检测到猪源细胞中的CIITA基因。本试验结果表明,利用pCold-TF-CIITA作为标准品建立的CIITA基因SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于CIITA基因的定量检测。 朱豪杰 高飞 李丽薇 虞凌雪 张玉娇 张宽 童光志 姜一峰 李国新一种检测表达非洲猪瘟抗原蛋白的嵌合PRRSV的抗体及其应用 本发明提供一种有效区分嵌合非洲猪瘟病毒p1217蛋白的猪繁殖与呼吸综合征病毒的疫苗株和野生毒株的抗体及其应用,可以区分嵌合疫苗rPRRSV‑p1217、野生型的非洲猪瘟和PRRSV,所述纳米抗体具有较强的抗原特异性,仅与... 高飞 童光志 李国新 童武 李丽薇 周艳君 姜一峰 郑浩 虞凌雪 刘长龙1株重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因组特征 被引量:6 2020年 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)不断发生变异,其防控难度也逐渐增加。为了及时监测PRRSV在自然感染背景下的遗传进化特点,本研究从上海某发病猪场的临床样品中分离获得1株PRRSV毒株,命名为SHpd1/2018株,并对其生物学特性和基因组序列进行分析。结果表明,该毒株基因组全长为15018 bp(不含poly A),不能被针对HP-PRRSV强毒HuN4株的Nsp2的单抗所识别,但其增殖特性与强毒HuN4株相似。序列分析表明,SHpd1/2018株与HP-PRRSV强毒株的相似性最高(与HuN4相似性为94.3%)。重组分析结果显示,SHpd1/2018株是以HP-PRRSV-like为主要亲本毒株,NADC30-like为次要亲本毒株的重组病毒,两个重组断点nt 2002和nt 3205均位于Nsp 2基因的高变区。研究证实SHpd1/2018株是1株发生变异重组的PRRSV分离株,该毒株是上海某猪场保育猪发病的主要原因。 谭祥梅 吴瑕 陈鹏飞 赵雄伟 周书亭 虞凌雪 童武 高飞 姜一峰 于海 童光志 周艳君关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 生物学特性 一种猪瘟病毒E2蛋白的抗原表位、抗体的制备及应用 本发明公开了一种猪瘟病毒E2蛋白的抗原表位、抗体的制备及其应用,所述抗原表位序列如SEQ ID NO.1所示,定位在105‑109AA。所述抗原表位可以与CSFV反应,而不与PK‑15细胞发生反应。所述抗原表位在猪瘟病毒... 童光志 李国新 武吉强 徐晶晶 姜一峰 高飞 童武 郑浩文献传递 猪Delta冠状病毒N蛋白单克隆抗体及其抗原表位和应用 本发明公开了一种由保藏号为CCTCC NO:C2017257的杂交瘤细胞株分泌的猪Delta冠状病毒N蛋白单克隆抗体。本发明还公开了包含该单克隆抗体的检测猪Delta冠状病毒的试剂盒。本发明还公开了猪Delta冠状病毒N... 童光志 周艳君 李慧春 张文超 陈鹏飞 李先斌 虞凌雪 姜一峰 高飞 李丽薇文献传递 猪繁殖与呼吸综合征病毒基因表达调控序列的初步解析 2011年 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是世界养猪业的一个巨大的威胁。近年来,此病给各国养猪业造成了巨大的经济损失。本文立足于反向遗传操作技术,介绍了调控PRRS病毒粒子的感染性、基因组RNA复制、亚基因组mRNA转录以及翻译等重要过程的顺式调控元件的一级序列和高级结构的最新研究进展。 高飞 孙志 郑海红 袁海峰 刘长龙 陆嘉琦 刘萍 尹扬 袁世山 童光志关键词:非翻译区 茎环结构