江西农业大学食品科学与工程学院南昌市农产品加工与质量控制重点实验室
- 作品数:22 被引量:122H指数:6
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- 荧光法测定金银花叶中总黄酮含量
- 传统的总黄酮测定方法多为亚硝酸钠-硝酸铝比色法,该方法易受溶液中其它物质尤其是多酚类物质的影响,造成结果偏高。本文基于黄酮类化合物能与铝离子络合形成具有荧光的络合物的特性,以芦丁为标准物,建立起利用荧光法测定金银花叶中总...
- 杜娟邝丙娣熊建华;
- 关键词:荧光法总黄酮
- 文献传递
- 实时荧光环介导等温扩增快速检测鸡肉中沙门氏菌被引量:19
- 2016年
- 根据沙门氏菌inv A基因序列设计特异性引物,利用Midori Green新型核酸荧光染料,建立了沙门氏菌实时荧光定量环介导等温扩增检测方法。结果表明,检测过程仅需45 min,灵敏度达6 CFU/管,而且细菌数量对数值(lg(CFU/管))与扩增荧光指数增加时间(Tp值)具有良好正相关线性关系,R2为0.985 1。通过模拟沙门氏菌人工污染25 g鸡肉样品,经37℃保温4 h,提取样品制备DNA模板用于实时荧光定量环介导等温扩增检测,结果表明灵敏度达450 CFU/g,共需时约7 h。随机从市场购买冷冻鸡肉样品21份,采用国标沙门氏菌检测方法和鸡肉样品实时荧光定量环介导等温扩增检测进行对比检测,结果两种方法均检测出同一份样品为沙门氏菌阳性,其余20份样品均为沙门氏菌阴性,表明本研究建立的鸡肉沙门氏菌实时荧光定量环介导等温扩增检测,其灵敏性和准确性与国标检测方法相当,但检测时间可缩短至7 h。
- 王瑾林丽萍郜彦彦吴国平
- 关键词:沙门氏菌鸡肉
- 肉桂醛水乳剂制备及其柑橘青霉抑菌效果测定被引量:3
- 2019年
- 为开展稳定有效、环境友好的柑橘植物源保鲜剂配方研究,该文对肉桂醛水乳剂的制备及其对柑橘青霉抑菌效果进行了研究。固定体系总量及油相(质量分数为10%的肉桂醛)用量,改变复合乳化剂的用量(质量分数分别为4%、6%和8%),采用低能量输入,乳化剂在水中法制备水乳剂。综合分析水乳剂稳定性、分散性及贮藏性能指标,用量为6%得到的水乳剂的性能最好。优选出8个不同的肉桂醛水乳剂抑制柑橘青霉的效果无显著差异,最小抑菌浓度均为250μg/g,均显著优于同浓度的肉桂醛抑菌效果。以低能量输入法,可以获得稳定有效肉桂醛水乳剂的初级配方。
- 林丽萍陈妍妍田博文廖安平陈金印
- 关键词:抑菌效果
- 硫化氢提高低温贮藏下猕猴桃的抗氧化能力及果实品质(英文)
- 以金魁猕猴桃为试材,研究了45μmol/L硫化氢溶液浸果处理对温度(2±0.5)℃,RH 85%-90%贮藏条件下果实品质和抗氧化酶的影响。结果表明,45μmol/L硫化氢处理猕猴桃果实在贮藏后期保持较高的Vit C含量...
- 沈勇根汪伟张伟朱丽琴李帮明
- 关键词:硫化氢贮藏猕猴桃采后抗氧化酶
- 文献传递
- 基于实时荧光环介导等温扩增快速检测鸡肉中的大肠杆菌O157:H被引量:15
- 2019年
- 以大肠杆菌O157:H7的VT2基因序列设计特异性引物,利用Midori Green新型核酸荧光染料,建立鸡肉中大肠杆菌O157:H7实时荧光定量环介导等温扩增(Rti-LAMP)检测方法。纯培养大肠杆菌O157:H7检测灵敏度达3.5 CFU/反应,需时45 min。模拟大肠杆菌O157:H7污染鸡肉样品,经37℃增菌4 h,用Whirl-pak无菌袋过滤离心得沉淀,提取样品DNA模板用于Rti-LAMP反应,检测大肠杆菌O157:H7灵敏度达140 CFU/g,整个检测流程约7 h。采用蒙脱石封闭的活性炭前处理污染鸡肉样品,不经增菌过程,结果表明:该Rti-LAMP检测方法灵敏度达12 CFU/g,整个检测耗时约4.5 h。市购鸡肉样品51份,以大肠杆菌国标检测法为对照,研究基于Rti-LAMP联合增菌或封闭活性炭预处理而不经增菌的两种方法,对比检测临床鸡肉样品大肠杆菌O157:H7污染率。结果:国标法和增菌的Rti-LAMP两种方法均检测到同一鸡肉样品为大肠杆菌O157:H7阳性,经封闭活性炭预处理而未经增菌的Rti-LAMP则检测到8份鸡肉样品大肠杆菌O157:H7阳性。研究表明,封闭活性炭预处理的Rti-LAMP检测方法较国标法更灵敏、快速、简便、特异地检测鸡肉中大肠杆菌O157:H7污染。
- 赵远洋王瑾林丽萍郜彦彦吴国平
- 关键词:大肠杆菌O157:H7鸡肉增菌
- 抗呋喃它酮代谢物单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白表达条件优化及直接竞争酶联免疫分析方法的建立
- 优化抗呋喃它酮代谢物(AMOZ)单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白(AMOZscFv-AP)的可溶性表达条件,提高融合蛋白的表达量,建立基于此融合蛋白的AMOZ残留直接竞争酶联免疫分析方法(dcELISA)。
- 陈薪竹柯法钧王丹洪艳平王玉波舒梅杨武英
- 关键词:单链抗体融合蛋白
- 黄金茶多糖超声提取工艺及体外抗氧化研究被引量:16
- 2017年
- 研究超声波提取黄金茶多糖工艺及体外抗氧化活性。采用L9(34)正交试验、方差分析和多重比较法对超声波提取黄金茶多糖进行试验和结果分析;对黄金茶多糖提取的单因素(超声功率、超声时间、料液比、超声温度)进行优化,通过测定黄金茶多糖清除自由基能力和还原能力来评价其抗氧化活性。黄金茶多糖优化提取工艺为超声功率165 W,超声时间40 min,料液比1∶40,超声温度65℃;黄金茶多糖最高得率可达11.23%。黄金茶多糖对DPPH、·OH、超氧阴离子自由基清除能力和还原能力低于Vc,差异极显著(P<0.01);0.2 mg/m L多糖和VC对ABTS+自由基清除能力,二者差异极显著(P<0.01);黄金茶多糖对·OH、ABTS+自由基的半抑制浓度(IC50)分别为1.713 mg/m L、0.553 mg/m L。黄金茶中多糖的含量较高,在一定浓度范围内,多糖浓度越高,其抗氧化活性越强。
- 熊磊陈慧胡文兵杨占威王文君
- 关键词:多糖正交设计抗氧化性
- BCAC-EMA-Rti-LAMP非预增菌快速检测鱼肉污染活的副溶血弧菌研究
- 2020年
- 【目的】随着人民物质生活水平的不断提高,对食品质量要求也愈来愈高,食品安全现如今已经成为影响人类生命健康财产安全的重大公共卫生问题。食源性致病菌是引起食品安全中毒事件的主要原因,而副溶血弧菌主要污染海产品从而引起急性肠胃炎。因此,快速有效地检测筛查污染的海产品,是有效防控副溶血弧菌食源性疾病暴发的必要条件。【方法】研究以副溶血弧菌特异性tlh基因设计合成引物,以Midori Green为核酸荧光染料,构建了一种副溶血弧菌实时荧光环介导等温扩增(Rti-LAMP)检测技术,并联合蒙脱石封闭的活性炭(BCAC)、叠氮溴化乙锭(EMA)对样品前处理,建立了一种非预增菌快速检测鱼肉污染活的副溶血弧菌方法。【结果】Rti-LAMP检测纯培养副溶血弧菌灵敏度达1 CFU/反应,1 h以内完成。模拟污染1 g鱼肉样品,经4 g BCAC吸附和6μg/mL EMA终浓度处理细菌样品,提取细菌DNA用于Rti-LAMP扩增反应,最低检出限为6 CFU/g活的副溶血弧菌,整个检测过程需约5 h。对市售33份新鲜海鱼样品检测,BCAC-EMARti-LAMP检测出3份阳性样品,BCAC-Rti-LAMP为6份阳性样品,而相应国标检测法为2份阳性样品。【结论】研究表明,BCAC-EMA-Rti-LAMP可以有效检测区分样品中活的副溶血弧菌污染,较国标检测法更快速、灵敏,有望作为鱼肉副溶血弧菌污染的一种快速筛查检测方法。
- 杨珺陈鹄吴国平舒梅李盛艳钟婵
- 关键词:副溶血弧菌鱼肉
- 抗呋喃它酮代谢物衍生物单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白表达条件的优化被引量:1
- 2021年
- 【目的】优化基因工程菌的诱导表达条件,以提高抗呋喃它酮代谢物衍生物单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达量。【方法】采用液体发酵法培养抗AMOZ衍生物单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白的基因工程菌,分别研究不同宿主菌、培养基、初始pH、诱导时期、诱导时间和蛋白诱导表达剂异丙基硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactopyranoside,IPTG)对融合蛋白表达量的影响,并通过蛋白质印迹法和直接竞争酶联免疫分析法对其活性进行鉴定。【结果】以E.coli BL21(DE3)作为宿主菌,在以初始pH为7.0的SB液体培养基作为发酵培养基,将含有目的蛋白的基因工程菌培养至OD600为0.6时,用浓度为0.6 mmol/L的诱导表达剂IPTG诱导表达9 h的条件下,抗AMOZ衍生物单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白的表达量由最初的7.94%增加到了11.45%,总体增加了约3.51%,且融合蛋白具有良好的生物活性。【结论】成功提高了抗AMOZ衍生物单链抗体在大肠杆菌中的可溶性表达量,为后期大规模生产抗AMOZ衍生物单链抗体奠定了一定的基础。
- 陈薪竹杜华英洪艳平王丹王玉波杨武英熊建华
- 关键词:单链抗体碱性磷酸酶融合蛋白
- 抗呋喃唑酮代谢物单链抗体基因构建及蛋白结构分析和活性鉴定被引量:2
- 2021年
- 从单克隆杂交瘤细胞出发,构建抗3-氨基-2-噁唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)衍生物单链抗体基因,并对其蛋白质进行理化性质分析及结构预测和活性鉴定。首先以呋喃唑酮代谢物AOZ衍生物单克隆抗体杂交瘤细胞1D2为原料,提取总RNA后克隆重链(V_(H))、轻链(V_(L))可变区基因,然后使用重叠延伸聚合酶链式反应技术用连接肽(G_(4)S)_(3)将V_(H)、V_(L)基因连接构建抗AOZ衍生物单链抗体基因,经测序后采用生物信息软件对抗体编码的氨基酸序列进行推导并展开生物信息学分析,再将此基因与Plip6/GN表达载体连接后进行表达并采用直接竞争酶联免疫分析法(direct competitive enzyme-linked immunosorbent assay,dcELISA)鉴定其活性。结果表明:抗AOZ衍生物单链抗体基因全长750 bp,编码250个氨基酸,相对分子质量为27012.20,理论等电点为9.13,属于碱性氨基酸;其二级结构预测结果显示抗体蛋白含20处α-螺旋、25处β-转角、114处无规卷曲、91处延伸带结构;三级结构预测的正面俯视图显示重、轻链由连接肽相连形成一个“环桶状”结构,侧面显示为“口袋状”,这与常规单链抗体的结构特征一致,dcELISA结果也显示该抗体具有良好的抗原结合活性。本研究为后续AOZ残留检测免疫分析方法的建立及抗AOZ衍生物单链抗体的改造奠定一定基础。
- 陈薪竹王玉波王丹洪艳平杜华英戴棚邓炜杰熊建华杨武英
- 关键词:呋喃唑酮单链抗体