公共文化服务平台

张强: 作品数：33 被引量：87H指数：6; 供职机构：上海出入境检验检疫局更多>>; 发文基金：国家质检总局科技计划项目上海出入境检验检疫局科研基金上海市科学技术委员会科研基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生政治法律更多>>

合作作者

TaqMan实时荧光RT-PCR检测猪脑心肌炎病毒方法的建立与应用被引量：1: 2014年; 针对猪脑心肌炎病毒(EMCV)基因组保守区域,设计并合成了特异性引物和TaqMan探针,建立了EMCV的TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法。通过常规RT-PCR方法扩增EMCV保守序列并将其连入pMD19-T载体,制备阳性标准质粒,优化反应条件,以10倍梯度稀释的标准品绘制标准曲线,EMCV标准曲线的相关系数为0.999。结果显示,该方法检测灵敏度达到10拷贝/μL,对猪捷申病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、乙型脑炎病毒、猪传染性胃肠炎病毒检测结果均为阴性。方法重复性好,批内和批间变异系数均小于2%。检测采集自上海供港猪场、进境美国种猪、加拿大、法国种猪的血清样本145份,EMCV核酸的检出率国内猪场53.6%,美国猪检出率为27.6%,加拿大猪检出率为20%,法国猪检出率为26.7%。EMCV实时荧光RT-PCR方法的建立为该病的快速诊断和流行病学调查提供了有效手段。; 张强王巧全熊炜李树清李健林颖峥黄忠荣; 关键词：猪脑心肌炎病毒实时荧光PCR TAQMAN探针

可视化2型猪链球菌LAMP检测方法的建立: 2016年; 由2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2)引起的猪链球菌病(Swine streptococosis)是一种重要的人兽共患疾病,具有高感染率、高死亡率的特点。为加强口岸动物源性产品中2型猪链球菌的现场查验力度,建立了2型猪链球菌LAMP检测方法,并对方法的特异性、敏感性和稳定性进行了测试。通过在LAMP反应产物中加入显色液,提高了对检测结果肉眼判定的准确性,实现了结果判定可视化的目标,有助于在出入境口岸货物查验现场及猪场等一线实验室使用。; 熊炜魏晓锋王艳林颖峥张强李春阳黄忠荣胡建华李健; 关键词：2型猪链球菌可视化

检测胸膜肺炎放线杆菌7型抗体的竞争ELISA方法的建立与应用: 2015年; 针对猪传染性胸膜肺炎(App)最主要的流行血清型7型,建立该型特异的抗体检测方法,并应用于出入境检疫。使用App 7型参考菌株制备单克隆抗体,基于辣根过氧化物酶标记的单抗,建立检测App 7型抗体的竞争ELISA方法,用于检测出入境临床采集及免疫接种的猪血清样品,并与商品化进口试剂盒进行比较。结果显示制备的单抗为IgM,与App 7型参考菌株之外的其他14个血清型以及27株其他相关菌株均无交叉反应。建立的竞争ELISA方法只能检测App 7型抗体,特异性好。用该方法检测App 7型参考菌株免疫猪的血清,免疫后14d可检出抗体,35d抗体滴度达峰值,并维持此滴度至143d。使用建立的竞争ELISA检测免疫猪及临床血清样品260份,结果与法国IDvet试剂盒检测符合率为97.2%,与加拿大Biovet试剂盒检测符合率为97.9%~98.2%。建立的竞争ELISA方法可以应用于App 7型抗体的检测。; 李树清陈志飞张强吴建祥刘雨潇王巧全林颖峥宋青唐智芳陆承平; 关键词：抗体检测竞争ELISA

仙台病毒核酸快速检测方法的建立和应用被引量：3: 2014年; 仙台病毒(Sendai virus,SeV)是一种常见的可引起啮齿类动物呼吸道疾病的病原,感染迅速,并且隐性感染率高,一旦感染较难从鼠群中清除,从而影响动物健康。为满足对入境噬齿类实验动物和野生动物仙台病毒快速检测的需要,本研究针对SeV编码基质蛋白和融合糖蛋白基因的保守序列设计引物和荧光探针,建立了仙台病毒RT-PCR和Real-time RT-PCR检测方法。将建立的方法应用于仙台病毒感染鼠不同临床样品和组织培养物的检测,证实两种核酸检测方法具有良好的特异性、灵敏性和稳定性,适合应用于出入境口岸实验和野生噬齿类动物仙台病毒疫情的快速检测。; 熊炜林颖峥魏晓锋郭雨燕张强刘俊平李健胡建华黄忠荣; 关键词：仙台病毒 REAL-TIME RT-PCR TAQMAN探针

上海口岸1只进境犬携带蜱的种类鉴定与溯源分析被引量：3: 2018年; 目的对上海口岸截获的德国成犬体表蜱进行种类鉴定及溯源分析。方法 2016年11月28日在上海口岸进口的69只德国警犬中的第33号警犬右前肢内侧检获蜱1只,对其进行形态学鉴定,并提取其DNA,扩增线粒体16S r RNA基因进行测序、比对,并对感染途径进行溯源分析。结果形态学鉴定该蜱符合血蜱属的形态特征,分子鉴定表明该蜱的线粒体基因序列与广泛分布于古北区和东洋区的褐黄血蜱(Haemaphysalis flava Neumann,1897)线粒体基因匹配度达98%。结论截获蜱为褐黄血蜱,为犬入境后感染。; 王强何宇平吴成云王巧全王艳林颖峥陈志飞张强邓耀华张冠楠曹宇凡唐智芳李树清; 关键词：分子鉴定

扇棘单睾吸虫Real-time PCR与常规PCR检测方法的建立: 2015年; 根据扇棘单睾吸虫核糖体DNA第一内转录间隔区(ITS1)序列,应用Primer premier 5.0软件自行设计一对可同时应用于real-time PCR和常规PCR的特异引物,建立real-time PCR与常规PCR鉴定扇棘单睾吸虫的方法,评估其特异性及灵敏性。应用建立的方法鉴定犬猫内脏中收集的吸虫,并用测序进行验证,检验方法的准确性和实用性。结果表明,建立的两种方法均只能特异性扩增扇棘单睾吸虫目的片段,不与横川后殖吸虫、钩棘单睾吸虫、华支睾吸虫、瓦氏瓦特松吸虫、棘口属吸虫、背孔属吸虫、心形咽口吸虫、野牛平腹盘吸虫、东方次睾吸虫、卫氏并殖吸虫、异尖属线虫、宫脂属线虫发生交叉扩增;敏感性试验表明,real-time PCR和常规PCR检测扇棘单睾吸虫质粒的最低检测限分别为43拷贝和86拷贝。建立的realtime PCR标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(R2=0.998)。鉴定来自犬猫的吸虫17条,结果显示两种方法均能准确鉴定出扇棘单睾吸虫。; 李树清梅雪芳林颖峥石云良黄腾飞王巧全张强陈志飞宋青唐智芳黄维义; 关键词：实时荧光定量PCR 常规PCR

液相芯片分型检测猪传染性胸膜肺炎的研究: 李树清王艳王巧全张强杜军陈志飞刘俊平李健; 主要技术指标：1.可同步检测App血清1至血清7型抗体的方法，整个反应可在3小时内完成。2.检测猪蓝耳病、猪圆环病毒、猪副猪嗜血杆菌、猪支原体肺炎、猪口蹄疫、猪传染性胃肠炎、猪布氏杆菌病、猪弓形体、猪链球菌阳性血清，均为...; 关键词：; 关键词：胸膜肺炎

畜禽4种重要传染病快速诊断新技术和标准的研究与应用: 李树清赵俊龙孙建和王巧全王艳张强周锐陈志飞严亚贤李健何国声王贵强杜凯杜军汪振兴; 猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌( APP)引起的一种高度传染性、致死性呼吸道疾病，曾给世界各国养猪业带来了巨大的经济损失，是中国进口种猪必检的疫病。附红细胞体病是一种人畜共患传染病，其危害越来越受到重视。牛无浆体病...; 关键词：; 关键词：畜禽传染病猪传染性胸膜肺炎附红细胞体病鸡传染性法氏囊病

小鼠肝炎病毒核酸快速检测方法的建立和应用被引量：11: 2013年; 为满足口岸对入境噬齿类动物快速检疫的需要,建立小鼠肝炎病毒(Mouse hepatitis virus,MHV)快速核酸检测方法。方法使用引物和TaqMan荧光探针设计软件,针对MHV保守基因设计引物和探针,建立了RT-PCR和Real-time RT-PCR方法检测噬齿类动物临床样本中MHV的方法。结果本研究建立的RT-PCR和Real-time RTPCR检测MHV方法具有良好的特异性和敏感性,通过将建立的方法应用于MHV阳性鼠临床样品的检测,证实两种MHV核酸检测方法具有良好的稳定性。结论本研究建立的RT-PCR和Real-time RT-PCR检测MHV的方法,适用于动物粪便、尿液等易于获得样本的检测。; 熊炜蒋静张强刘俊平魏晓锋黄忠荣李健胡建华; 关键词：小鼠肝炎病毒 RT-PCR REAL-TIME RT-PCR

猴逆转录病毒RT-PCR和Real-time RT-PCR检测方法的建立被引量：2: 2013年; 猴逆转录病毒(Simian type D retrovirus,SRV)是引起猴获得性免疫缺陷综合征(Simian acquired immunodeficiency syndrome,SAIDS)的病原之一,其严重危害猴的健康,并威胁与猴接触人员的健康,是无特定病原体(SPF)猴必须排除的病毒之一。为了应对口岸对进出境野生及实验用灵长类动物SRV感染情况的监测和流行病学调查的需要,建立了RT-PCR和real-time RT-PCR检测SRV的方法,并对方法的特异性、敏感性和稳定性进行了验证。; 熊炜蒋静张强盘宝进李健魏晓锋黄忠荣胡建华; 关键词：RT-PCR REAL-TIME RT-PCR TAQ

张强

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

张强

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈