刘季芳
- 作品数:4 被引量:7H指数:2
- 供职机构:广州医学院肿瘤研究所更多>>
- 发文基金:广东省卫生厅资助课题国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- miR一216b通过靶向调控蛋白激酶Cα基因的表达抑制鼻咽癌细胞的增殖和侵袭被引量:3
- 2013年
- 目的明确miR-216b是否通过靶向调控蛋白激酶Cα(PKCα)基因的表达来抑制鼻咽癌细胞的增殖和侵袭。方法构建PKCα3’非编码区(UTR)-荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告系统检测miR-216b对PKCα3’UTR-荧光素酶活性的影响。将miR-216b模拟物转染鼻咽癌细胞CNE2,采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测PKCα mRNA和蛋白的表达水平。将PKCα siRNA转染CNE2细胞,通过MTS细胞增殖实验和Transwell侵袭实验观察PKCα基因表达下调对CNE2细胞增殖和侵袭的影响。将PKCα重组质粒与miR-216b模拟物共转染CNE2细胞,通过MTS细胞增殖实验检测CNE2细胞的增殖能力。结果双荧光素酶报告检测结果显示,miR-216b能特异性地与PKCα mRNA的3’UTR结合,下调荧光素酶活性,其活性约为转染对照模拟物细胞的62.4%。过表达miR-216b的CNE2细胞中PKCα mRNA和蛋白的表达水平均降低,与对照细胞比较,分别降低49.1%和55.7%。siRNA干扰PKCα表达能抑制CNE2细胞的增殖和侵袭能力,能部分模拟miR-216b的抑瘤功能。过表达PKCα能部分逆转miR-216b对CNE2细胞的增殖抑制作用。结论miR-216b通过靶向调控PKCα基因的表达来抑制鼻咽癌细胞的增殖和侵袭。
- 邓敏刘季芳谷依学郑国沛贺智敏
- 关键词:鼻咽肿瘤蛋白激酶CΑ细胞侵袭
- 2种方法检测非小细胞肺癌EGFR基因突变的比较被引量:3
- 2013年
- 目的比较测序法和Taqman实时荧光PCR法检测表皮生长因子受体(EGFR)基因19、21外显子基因突变的一致性,为寻找适宜临床应用的EGFR基因突变检测方法提供实验依据。方法收集60例非小细胞肺癌患者肿瘤组织,应用测序法和Taqman实时荧光PCR法分别检测EGFR基因19、21外显子基因突变,比较两种方法的有效性。结果两法检测EGFR基因19、21外显子突变结果符合率分别为96.7%(58/60)和98.3%(59/60),差异无统计学意义(P>0.05)。结论 2种方法均可用于EGFR基因19、21外显子突变检测,测序法更适合指导临床分子靶向治疗。
- 罗凯王倩刘季芳潘东晓薛兴阳傅文凡贺智敏
- 关键词:受体表皮生长因子基因测序聚合酶链反应
- PIK3CA在不同鼻咽癌细胞株中的表达及其与放射敏感性的关系被引量:1
- 2012年
- 放射治疗是鼻咽癌的主要治疗手段,而相对放射抵抗的亚细胞系残存并增殖,成为复发的根源。临床实践表明,即使是同一病理类型的鼻咽癌患者对放射线的敏感性也不同,对于不同的鼻咽癌患者的治疗需要放疗的个体化。因此,发现预测鼻咽癌放射敏感性相关分子标志物,对指导鼻咽癌个体化治疗和改善其预后具有重要的意义。
- 刘季芳袁太泽尹江郑国沛贺智敏
- 关键词:鼻咽癌细胞株相关分子标志物鼻咽癌患者个体化治疗病理类型
- 靶向PIK3CA候选miRNAs在胃癌细胞与血清中表达的分析
- 2012年
- 目的:预测和筛选靶向PIK3CA的候选miRNAs并检测其在胃癌细胞和血清中的表达。方法:采用生物信息学并结合既往文献和前期研究,预测和筛选出靶向PIK3CA的候选miRNAs(miR-203和miR-506)。常规提取胃癌细胞和血清总RNA,并用DNaseⅠ进行消化。以miRNAs特异性茎-环引物引导反转录,通过实时荧光定量PCR对miR-203、miR-506和内参U6进行检测,并采用琼脂糖凝胶电泳检测定量PCR产物。结果:电泳检测细胞和血清中RNA纯度较好;胃癌细胞和血清中miR-203、miR-506和内参U6均能实现特异性扩增。miR-203在胃癌细胞SGC-7901及MGC-803中表达分别为1.360±0.102和1.241±0.110,差异无统计学意义,t=3.125,P=0.09;miR-203在胃癌患者血清中表达为1.420±0.122,明显低于健康人的3.450±0.206,t=2.521,P=0.02。miR-506在胃癌细胞SGC-7901和MGC-803及胃癌患者和健康人血清中表达水平分别为1.256±0.113、1.158±0.109、1.735±0.220和1.592±0.134,差异无统计学意义,P>0.05。结论:miR-203可能是调控PIK3CA基因的miRNAs之一。PIK3CA在胃癌中的高表达可能与miR-203的异常低表达有关,而与miR-506无关。胃癌患者血清中miR-203的表达有望成为预测胃癌发生或发展的一个重要的分子标志。
- 易高罗凯李志阳贺智敏刘季芳
- 关键词:计算生物学PIK3CA基因微RNA显微镜检查