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李敏: 作品数：59 被引量：131H指数：7; 供职机构：郑州大学基础医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金河南省医学科技攻关计划项目常州四药临床药学科研基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>

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人肠道病毒71型VP1和VP4的抗原融合表达及鉴定: 2012年; 目的:构建人肠道病毒71型(human enterovirus 71,EV71)VP1-VP4重组融合蛋白表达体系.方法:构建EV71 VP1-VP4重组融合蛋白原核表达载体转化大肠杆菌DH5α,诱导表达融合蛋白VP1-VP4,SDS-PAGE和Western blot法进行鉴定.用融和蛋白包被ELISA板检测41例已知血清.结果:重组片段VP1-VP4测序结果与设计目的片段序列相符,重组载体构建成功;SDS-PAGE显示融合蛋白约42.8kDa,与预期值一致;Westernblot提示该融合蛋白可以和EV71 VP1、VP4抗体特异性结合.融合蛋白包被ELISA板能准确检测出41例血清中16例EV71阳性血清,与CA16无交叉反应.结论:表达的EV71 VP1-VP4融合蛋白具有良好的抗原性,可作为EV71感染检测抗原,为EV71诊断试剂和疫苗的研究奠定实验基础.; 冷弘王娜王媛媛臧文巧李敏赵国强; 关键词：EV71 融合抗原融合PCR

人食管癌顺铂耐药细胞系Ec9706/cDDP的建立及其生物学特征被引量：9: 2006年; 目的:建立人食管癌顺铂耐药细胞系Ec9706/cDDP,探讨其生物学特征.方法:采用顺铂(cDDP)中等浓度、间歇作用方法历时9mo建立耐药细胞系Ec9706/cDDP,采用MTT法测定其对cDDP的耐药指数,观察冻存、撤药对耐药性的影响,比较耐药与亲本细胞生长曲线、群体倍增时间及贴壁率的不同,流式细胞仪测细胞周期,软琼脂实验测细胞的恶性增殖能力,罗丹明实验测其对药物的摄入、排出能力.结果:人食管癌顺铂耐药细胞系Ec9706/cDDP的耐药指数为15.7,冻存对耐药性影响不大,撤药培养可使耐药性降低,耐药细胞群体倍增时间延长(29.79±0.48hvs25.79±0.45h,P<0.05),生长缓慢,G0/G1、S期细胞比例增加(63.18%±5.21%vs52.81%±4.36%,P<0.05;36.49%±3.93%vs26.70%±2.62%,P<0.05),G2期细胞减少(0.33%±0.02%vs20.49%±3.71%,P<0.05),克隆形成率明显高于亲本细胞(69%vs24%,P<0.05),对罗丹明的摄入减少,排出增多.结论:成功建立了人食管癌顺铂耐药细胞系Ec9706/cDDP,且耐药性较稳定.; 李敏王志举李文涛董子明; 关键词：食管癌耐药细胞系顺铂四甲基偶氮唑蓝

蒺藜防白缓释滴丸质量标准的研究被引量：5: 2016年; 目的建立蒺藜防白缓释滴丸（蒺藜、防风、白芷等）的质量标准。方法 TLC法对蒺藜、当归和赤芍进行定性鉴别,HPLC法定量测定升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷和欧前胡素的含有量,转篮法测定释放度。结果 TLC斑点清晰,专属性强,分离度好。升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷和欧前胡素分别在1.602 0～112.14μg/m L（r=0.999 8）、1.396～139.60μg/m L（r=0.999 9）、0.707 2～70.72μg/m L（r=0.999 99）范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为100.2%（RSD=0.99%）、99.85%（RSD=0.80%）、99.37%（RSD=1.04%）。在2、6、10 h,升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的累积释放度分别达到20%～40%、50%～70%、80%以上,有缓释效果。结论该方法快速简便,准确可靠,适用于蒺藜防白缓释滴丸的质量控制。; 周丽娟梁亚奇何勐丁孝良张维亚李敏; 关键词：升麻素苷 5-O-甲基维斯阿米醇苷欧前胡素转篮法

肠道病毒71型河南分离株2株全基因组序列分析被引量：1: 2012年; 目的:了解2011年河南洛阳和南阳地区流行的肠道病毒71型(EV71)基因特征。方法:分离洛阳和南阳地区EV71病毒各一株,分别进行全基因测序和基因进化分析。结果:EV71/Luoyang2011和EV71/Nanyang2011的VP1区序列在进化树上均属于C4亚型,与国内流行株都具有较高同源性,与2008年广东流行株亲缘关系最近。这2株全基因核苷酸序列同源性为99.3%,氨基酸序列同源性为97.6%,并且氨基酸均没有发生明显改变。结论:EV71/Luoyang2011和EV71/Nanyang2011属于C4亚型,与我省及我国既往流行株相比,未发生大的变异。; 冷弘卢欣刘慧涛马云云王媛媛马晶郭茂峰李敏赵国强; 关键词：肠道病毒71型手足口病同源性分析

穿心莲对人外周血CD4^+T淋巴细胞表面CXCR4和CCR5的影响以及对CXCR4/CCR5启动子作用机制的研究被引量：4: 2011年; 目的:探讨穿心莲对人外周血CD4+T淋巴细胞表面趋化因子受体CXCR4和CCR5的影响以及对CXCR4,CCR5启动子的作用机制。方法:健康志愿者口服含穿心莲内酯的穿心莲胶囊后,采集人外周静脉血并分离CD4+T淋巴细胞,RT-PCR、流式细胞术、Western-bloting检测服药前后人外周血CD4+T淋巴细胞表面CXCR4,CCR5的表达;采用报告基因技术,中药穿心莲提取物给大鼠灌胃后采集含药血清,将含药血清作用于转染有CXCR4,CCR5启动子载体的H9细胞株,检测穿心莲对CXCR4,CCR5启动子的影响。结果:健康志愿者口服穿心莲后,外周血CD4+T淋巴细胞表面CXCR4,CCR5 mRNA和蛋白表达水平较服药前显著降低;并且穿心莲能够显著降低体外培养细胞CXCR4,CCR5启动子活性。结论:穿心莲能够降低人外周血CD4+T淋巴细胞表面CXCR4和CCR5的表达,具有潜在的抗HIV-1作用。; 冯龙赵国强马云云李敏马晶靳静崔英; 关键词：穿心莲抗艾滋病药物

豫医无毛小鼠无毛基因部分内含子突变研究被引量：3: 2006年; 目的研究豫医无毛小鼠突变的分子机制。方法对豫医无毛小鼠和昆明小鼠的基因组DNA进行PCR扩增,对二者扩增片段克隆后测序,对结果进行比较,以确定豫医无毛小鼠无毛基因的特异性程度。结果本实验共测出豫医无毛小鼠DNA序列1 746 bp和昆明小鼠DNA序列1 733 bp,两者不同之处有32处,均位于内含子,突变形式包括插入、缺失和点突变。结论无毛性状的产生可能与内含子中的插入、缺失和点突变有关。; 臧文巧马一君杨璇周晓丽李敏李倩如; 关键词：豫医无毛小鼠基因突变内含子

eNOS基因27 bp VNTR多态性与深静脉血栓形成的相关研究: 2007年; 目的探讨内皮细胞型一氧化氮合酶(eNOS)基因第4内含子数目可变性串联重复序列(VNTR)多态性与深静脉血栓形成(DVT)的相关关系。方法PCR扩增DVT组与正常对照组eNOS基因27 bp VNTR特异片段,对两组VNTR的基因型频率与等位基因频率进行统计分析。结果DVT组与正常对照组eNOS基因VNTR均存在重复4次、5次两种等位基因,以及4/4纯合(aa),4/5杂合(ab),5/5纯合(bb)3种基因型,在对照组发现一例罕见4/6杂合(ac)基因型。DVT组4a/4a基因型频率为3.88%,4a等位基因频率为12.11%均明显高于正常对照组(P<0.05)。结论eNOS基因27bp VNTR多态性与深静脉血栓形成具有相关性,携带重复4次等位基因的人具有易患静脉血栓的危险性。; 贺颖李敏于辉连建华郑红董子明; 关键词：一氧化氮合酶血栓形成

促甲状腺受体抗体检测在Graves病治疗和预后中的应用: 2022年; 讨论促甲状腺受体抗体检测在Graves病治疗和预后中的应用。方法:选入本院2020年1月—2021年1月,72例本院诊断治疗的Graves患者作为本文的研究对象,按照患者的治疗情况分为:未治疗组28例、治疗后无效组10例、治疗后有效组26例、正常对照组8例,四个组都使用促甲状腺受体抗体检测方法进行检测。结果:促甲状腺受体抗体检测阳性率未治疗组92.86%(26/28)、治疗无效组70.00%(7/10)、治疗有效组26.92%(7/26)均比正常对照组0.00%(0/8)高;未治疗组(18.31±12.29)、治疗无效组(15.69±12.71)的血清促甲状腺受体抗体检测水平比治疗有效组(1.41±1.55)高;治疗有效组(1.41±1.55)的血清促甲状腺受体抗体检测水平比正常对照组(0.56±0.48)高。结论:促甲状腺受体抗体检测可以作为Graves病的诊断标准,还可以作为Graves病治疗后的疗效评估手段以及停止治疗和预后效果好、坏的判断标准。对临床治疗Graves病有重要的作用,可以在临床上大力推广。; 聂静李敏; 关键词：GRAVES病预后

GST-π表达水平与人食管鳞癌耐顺铂的关系研究被引量：5: 2014年; 目的拟通过调控GST-π的表达水平,观察其对食管癌细胞耐药性的影响。方法构建GST-π基因的真核表达载体,转染入亲本细胞EC9706细胞后观察GST-π的过表达是否会促使食管癌细胞耐药性的产生。结果 GST-π的表达载体pIRES2-AcGFP1-GST-π转染入EC9706细胞后,RT-PCR检测GST-πmRNA表达增强,Western blotting见其蛋白表达增强,MTT实验显示该细胞针对顺铂的耐药性增强,耐药指数达2.36。结论该实验说明增加食管癌细胞内GST-π的表达会促使食管癌细胞的耐药性产生。; 唐悦龚光明柳璐璐李敏; 关键词：食管鳞癌顺铂耐药 GST-Π

polβ高表达与食管癌细胞耐药的相关性被引量：8: 2007年; 目的:建立人食管癌顺铂耐药细胞系及稳定高表达人野生型DNA聚合酶beta(polβ)的食管癌细胞系,分析polβ高表达与食管癌细胞耐药的相关性.方法:顺铂(cDDP)中等浓度、间歇作用法历时9mo建立耐药细胞系Ec9706/cDDP;同时脂质体转染法将人野生型polβ重组绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-AC3转染入Ec9706细胞,经G418筛选得到稳定转染细胞系.荧光显微镜观察转染效果,普通倒置显微镜观察细胞形态变化.RT-PCR方法分别检测耐药细胞与转染细胞中polβmRNA的表达水平,MTT法检测各组细胞对cDDP的敏感性.结果:荧光显微镜下转染细胞荧光强,转染效率高,倒置显微镜下耐药细胞与转染前后细胞形态无明显改变.RT-PCR结果表明耐药细胞Ec9706/cDDP中polβ表达较亲本细胞增加,转染细胞的polβ表达较空载体转染细胞、对照细胞也增加.Ec9706/cDDP细胞耐药指数为15.70;转染后细胞对cDDP的敏感性降低,耐药指数为1.78.结论:成功建立了耐药细胞系Ec9706/cDDP与稳定高表达人野生型polβ的Ec9706细胞系,polβ的高表达可引起耐药性的产生,耐药细胞中polβ的表达也增高.polβ的表达与食管癌细胞的耐药性有一定相关性.; 李敏臧文巧付庆李文涛董子明; 关键词：DNA聚合酶Β 转染食管肿瘤抗药性肿瘤四甲基偶氮唑蓝

李敏

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