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人载脂蛋白AV原核表达载体的构建与纯化研究被引量：1: 2013年; 目的:构建人载脂蛋白AV(apolipoprotein AV,apoAV)的原核载体并表达纯化该蛋白。方法:从人肝癌细胞系HepG2中提取总RNA,以反转录的cDNA第一链为模板,经聚合酶链式反应(PCR)扩增得到含有编码apoAV完整成熟肽段的PCR片段。PCR产物和原核表达载体pET30b经核酸内切酶双切后连接,连接产物经转化至大肠杆菌感受态细胞Top10,挑选克隆测序。重组质粒pET30b-apoAV转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并优化诱导表达条件,重组的apoAV经镍离子螯合树脂纯化获得。结果:经测序证实人apoAV目的基因成功克隆入pET30b原核表达载体中,经过IPTG诱导有约40KD的特异性蛋白表达,与预期大小一致。该蛋白在IPTG诱导下的最佳表达时间为5h,最佳浓度在31.3μmol/L。纯化的apoAV纯度在95%以上,产率约为15 mg/L。结论:成功构建人apoAV的原核表达载体,实现了高效表达和纯化,为进一步研究其结构与功能奠定了基础。; 李国平隋靖喆毕楠满永王抒陈保生黎健; 关键词：原核表达蛋白纯化

一个新的脂肪因子——脂联素的结构与功能的研究进展被引量：10: 2005年; 脂联素是脂肪组织特异分泌的一个具有重要功能的细胞因子,在血浆中以多种形式存在,在能量代谢和糖代谢等生理过程中发挥重要的调节作用。本文介绍有关脂联素的分子生物学、结构与功能、特异受体的发现及其与肥胖、胰岛素抵抗和动脉粥样硬化等关系研究的新进展。; 毕楠陈保生; 关键词：分子生物学脂肪因子糖脂代谢

冠心病患者载脂蛋白A5和载脂蛋白C3基因多态性的研究: 研究表明,血浆脂质和脂蛋白代谢异常是冠心病的独立危险因素,与遗传因素密切相关。人载脂蛋白A5基因(APOA5)是2001年通过对人和小鼠基因组序列比对发现的一个新基因,位于人11号染色体长臂23区的APOA1/C3/A4...; 毕楠陈保生; 关键词：冠状动脉疾病脂蛋白基因多态性限制性片断长度甘油三酯

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毕楠