隋靖喆
- 作品数：20 被引量：65H指数：5
- 供职机构：广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 人载脂蛋白AV原核表达载体的构建与纯化研究被引量：1
- 2013年
- 目的:构建人载脂蛋白AV(apolipoprotein AV,apoAV)的原核载体并表达纯化该蛋白。方法:从人肝癌细胞系HepG2中提取总RNA,以反转录的cDNA第一链为模板,经聚合酶链式反应(PCR)扩增得到含有编码apoAV完整成熟肽段的PCR片段。PCR产物和原核表达载体pET30b经核酸内切酶双切后连接,连接产物经转化至大肠杆菌感受态细胞Top10,挑选克隆测序。重组质粒pET30b-apoAV转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并优化诱导表达条件,重组的apoAV经镍离子螯合树脂纯化获得。结果:经测序证实人apoAV目的基因成功克隆入pET30b原核表达载体中,经过IPTG诱导有约40KD的特异性蛋白表达,与预期大小一致。该蛋白在IPTG诱导下的最佳表达时间为5h,最佳浓度在31.3μmol/L。纯化的apoAV纯度在95%以上,产率约为15 mg/L。结论:成功构建人apoAV的原核表达载体,实现了高效表达和纯化,为进一步研究其结构与功能奠定了基础。
- 李国平隋靖喆毕楠满永王抒陈保生黎健
- 关键词：原核表达蛋白纯化
- IL-6通过STAT3/Notch信号通路调控多发性骨髓瘤耐药细胞株对硼替佐米的化疗敏感性被引量：9
- 2022年
- 目的:探讨白细胞介素-6(IL-6)调控多发性骨髓瘤(MM)耐药细胞株对硼替佐米(bortezomib,BTZ)的化疗敏感性及相关作用机制。方法:收集临床BTZ耐药MM患者治疗前后的外周血样本,体外培养人KM3和KM3/BTZ细胞,ELISA法检测MM患者外周血、KM3和KM3/BTZ细胞中IL-6的含量,CCK-8法检测KM3和KM3/BTZ细胞对BTZ的药物敏感性。将KM3/BTZ细胞分为KM3/BTZ对照组(细胞正常培养48 h),IL-6中和抗体Anti-IL-6组(500 ng/ml Anti-IL-6处理细胞48 h),BTZ组(300 ng/ml BTZ处理细胞48 h),BTZ+Anti-IL-6组(300 ng/ml BTZ和500 ng/ml Anti-IL-6处理细胞48 h)。采用CCK-8法检测KM3/BTZ细胞增殖活性,流式细胞术检测KM3/BTZ细胞周期分布情况,Annexin V-FITC/PI双染法检测KM3/BTZ细胞凋亡,实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测KM3/BTZ细胞IL-6、Notch1、信号转导和转录激活因子3(STAT3)mRNA表达水平,蛋白质印迹法(Western blot)检测KM3/BTZ细胞IL-6、Notch1、STAT3蛋白表达水平。结果:治疗后BTZ耐药MM患者外周血中IL-6含量显著高于治疗前(P<0.05)。KM3/BTZ细胞中IL-6含量显著高于KM3细胞(P<0.05)。KM3/BTZ细胞对BTZ的敏感性显著低于KM3细胞(P<0.05),耐药指数(RI)为19.62。Anti-IL-6和BTZ均可抑制KM3/BTZ细胞增殖、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡(P<0.05);与单一药物处理相比,Anti-IL-6和BTZ联合处理对KM3/BTZ细胞的作用更为明显(P<0.05),且显著下调KM3/BTZ细胞IL-6、Notch1、STAT3 mRNA和蛋白表达(P<0.05)。结论:拮抗IL-6可以增加BTZ的化疗敏感性,IL-6可能通过STAT3/Notch信号通路降低MM细胞对BTZ的敏感性。
- 刘莹隋靖喆朱丽华戴益蕫海群程鹏
- 关键词：多发性骨髓瘤硼替佐米化疗敏感性
- 肝脏胰岛素受体急性敲除对载脂蛋白B和三酰甘油分泌的影响
- 2013年
- 目的分析肝脏组织特异性的胰岛素信号急性缺失对载脂蛋白B和三酰甘油分泌的影响。方法应用Cre-LoxP系统原理，在重组酶基因的上游插入肝组织特异性白蛋白基因启动子，以此构建组织特异性表达的腺病毒。扩增纯化后的腺病毒经胰岛素受体Floxed小鼠尾静脉注射，分别在注射2d、4d和6d后收集小鼠血浆，测定新生载脂蛋白B和极低密度脂蛋白三酰甘油分泌速率，抽提肝脏脂质并用酶法检测脂质含量，并用免疫印迹法分析胰岛素受体和脂代谢相关蛋白在肝脏内的表达。结果小鼠在注射含重组酶的腺病毒2d、4d和6d后，胰岛素受体表达依次降低30．50％（P〈0．05）、60．12％（P〈0．01）和99．54％（P〈0．001），极低密度脂蛋白三酰甘油的分泌速率分别降低20．43％（P〈0．05）、33．63％（P〈0．05）和44．21％（P〈0．01）；下调了固醇调控结合蛋白1和脂肪酸合成酶以及极低密度脂蛋白形成相关蛋白的表达，但不影响新生载脂蛋白B100的分泌和肝脏脂质含量；而在含重组酶的腺病毒注射6d后新生载脂蛋白B48升高约35．07％（P〈0．05）。结论肝脏胰岛素信号急性缺失降低极低密度脂蛋白中三酰甘油的分泌速率并呈现时间依赖性，揭示小鼠肝脏分泌较小的极低密度脂蛋白颗粒，这种变化可能和肝脏内脂肪酸的合成速度下降有关。
- 李国平唐蔚青隋靖喆黎健陈保生
- 关键词：肝细胞脂蛋白类VLDL载脂蛋白B类
- 狼疮性肾炎患者免疫功能指标的检测被引量：2
- 2013年
- 目的分析狼疮肾炎(LN)患者的免疫功能指标。方法选取65例SLE患者,其中35例并发肾炎为LN组,30例未并发肾炎为SLE无肾炎组,以30例体检健康者作为对照组,同时检测各组外周血T淋巴细胞亚群水平及相关血清学免疫指标。结果 LN患者组外周血CD4+细胞水平、CD4+/CD8+比值及C3水平明显低于SLE无肾炎组及健康人对照组(P<0.05),IgG、IgM、24 h尿蛋白定量、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)水平明显高于SLE无肾炎组及健康人对照组。结论 LN患者T淋巴细胞亚群数量及补体水平均显著降低,与肾功能损害相关。
- 吴君荣秦雪邓燕王健李晞莫翠菊隋靖喆翟励敏杨石李山赵铖
- 关键词：系统性红斑狼疮狼疮肾炎T细胞亚群免疫功能
- 系统性红斑狼疮肾炎患者的免疫功能检测及其临床意义
- 目的:分析系统性红斑狼疮肾炎患者免疫功能及其临床意义.方法:选取65例SLE患者,其中35例并发肾炎为LN组,30例未并发肾炎为SLE非肾炎组,同时收集30例健康体检者作为对照组,同时检测病例组和对照组外周血T淋巴细胞亚...
- 吴君荣秦雪邓燕王健李晞莫翠菊隋靖喆翟励敏杨石李山赵铖
- 缺氧诱导因子1基因多态性与HBV相关性肝炎、肝硬化、肝癌的遗传易感性研究
- 目的:缺氧诱导因子(Hypoxia inducible factor -1，HIF-1)作为缺氧环境下诱导的主要的核转录激活因子，在机体应对缺氧的过程中发挥了重要作用。本实验主要通过对HIF-1α基因rs11549465...
- 隋靖喆
- 关键词：肝硬化肝癌缺氧诱导因子基因多态性遗传易感性
- 文献传递
- 抗核膜抗体阳性患者在送检抗核抗体中的临床意义被引量：2
- 2021年
- 目的探讨抗核膜抗体(ANEA)在临床连续送检抗核抗体(ANA)标本中的阳性率及其临床意义。方法回顾性分析该院门诊和住院患者连续送检的107 937例ANA检测标本,对荧光模型判读为ANEA阳性的患者进行临床资料收集与分析。另选取50例ANEA阴性但ANA阳性的患者和65例健康体检者作为疾病对照组和健康对照组,分析ANEA阳性患者实验室检查结果的特点。结果 107 937例ANA常规检测标本中ANA阳性27 467例,ANA总体阳性率为25.45%;荧光模型判读为ANEA 220例,占ANA阳性标本的0.80%。ANEA阳性患者诊断为自身免疫性疾病(AID)141例,其中以原发性胆汁性胆管炎(PBC)最为常见,为30例(21.28%);诊断为非AID患者79例,占ANEA阳性患者的35.91%。AID患者荧光滴度以中、高滴度(1∶320、1∶1 000)为主(66.67%),非AID患者荧光滴度以低滴度(1∶100)为主(81.01%)。与疾病对照组和健康对照组比较,ANEA阳性患者血清γ-谷氨酰转移酶和碱性磷酸酶水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 ANEA可见于多种临床疾病,主要以AID为主,特别是PBC最为常见。中、高滴度的ANEA阳性患者同时出现GGT、ALP水平异常升高,要注意临床随诊,警惕AID发生。
- 王健周薇黄欣琪隋靖喆徐涓娟李晞
- 关键词：抗核抗体自身免疫性疾病
- BIO-RAD VARIANTⅡ与TOSOH HLC-723G8糖化血红蛋白分析仪结果比对和偏倚评估
- 翟励敏李山李海炜彭契六王健邓燕谢丽李泰阶何雨杨石莫翠菊隋靖喆吴君荣秦雪
- 仿真模拟联合翻转课堂教学在自身抗体检验教学中的效果分析被引量：11
- 2020年
- 目的探讨仿真模拟联合翻转课堂教学在自身抗体检验教学中的效果。方法选择广西医科大学第一附属医院医学检验技术专业四年制本科70名学生作为研究对象,采用随机数字表法分为传统教学组和仿真模拟联合翻转课堂教学组,每组各35名。自身抗体检验实习结束后,采用出科考核和问卷调查表进行教学效果评估。结果两组学生出科考核成绩差异均有统计学意义(P<0.05)。带教教师对仿真模拟联合翻转课堂教学组带教教师对教学效果各项指标的评价均优于传统教学组,仿真模拟联合翻转课程教学组学生对教学效果各项指标的评价均优于传统教学组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论仿真模拟联合翻转课堂教学能提高自身抗体检验项目实习的教学效果,调动学生学习的积极性,提高学生主动参与、发现问题及解决问题的能力,为该方法在医学检验临床实习教学中的推广及应用提供了理论依据。
- 王健徐涓娟隋靖喆张小莲齐运伟李晞
- 关键词：仿真模拟教学传统教学
- 两种糖化血红蛋白分析仪结果比对和偏倚评估被引量：3
- 2014年
- 目的对BIO-RAD VARIANTⅡ与TOSOH HLC-723G8糖化血红蛋白分析仪进行结果比较和偏倚评估,为实验室提供准确可靠的数据。方法以BIO-RAD VARIANTⅡ糖化血红蛋白分析仪为参考系统,以TOSOH HLC-723G8糖化血红蛋白分析仪为待比系统,依据美国临床实验室标准化协会EP9-A2文件要求,分别在上述两种检测系统中,检测40份常规样本,记录实验结果,检查离群点,计算直线回归方程和相关系数,进行相关性的比较,并对其进行偏倚评估。结果两个检测系统检测糖化血红蛋白结果回归方程为Y=1.006 X-0.298,呈正相关(r2=0.998,P<0.05),TOSOH HLC-723G8的测定糖化血红蛋白结果比BIO-RAD VARIANTⅡ低,两个检测系统有恒定偏倚,但偏倚随糖化血红蛋白浓度增加而减小,偏倚小于允许误差。结论两个检测系统检测糖化血红蛋白结果具有良好的相关性,结果存在恒定的负偏倚,但偏倚均在允许误差范围内,检验性能满足临床对糖尿病患者的监测要求。
- 翟励敏李山李海炜杨石莫翠菊隋靖喆吴君荣秦雪
- 关键词：糖化血红蛋白偏倚
