目的:探讨肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)与蛋白酶抑制剂MG132联合诱导细胞凋亡的可能机制。方法:倒置显微镜下观察TRAIL、蛋白酶抑制剂MG132及两药联合干预24 h A549细胞形态学变化;流式细胞仪技术检测TRAIL、蛋白酶抑制剂MG132及两药联合干预24 h A549细胞凋亡指数变化;ELISA方法检测TRAIL、蛋白酶抑制剂MG132及两药联合干预24 h A549细胞NF-κB活性变化;蛋白印迹技术检测TRAIL、蛋白酶抑制剂MG132及两药联合干预24 h A549细胞凋亡基因蛋白Bax及Caspase-3表达水平。结果:倒置显微镜下可观察到两药联合组细胞呈现皱缩、核碎裂等典型的凋亡特征。流式细胞仪技术结果显示TRAIL与蛋白酶抑制剂MG132联合用药干预24 h细胞凋亡率约为48.78%,与单药组(21.12%)相比,凋亡率显著提高,P=0.002;ELISA结果显示TRAIL与MG132联合干预24 h后,细胞NF-κB活性约为0.23,与TRAIL单药组相比活性明显降低,P=0.008;蛋白印迹技术结果显示TRAIL与蛋白酶抑制剂MG132联合用药干预24 h细胞凋亡基因蛋白Bax及Caspase-3表达显著升高,与单药组相比,具有统计学意义,P=0.005。结论:TRAIL联合蛋白酶抑制剂MG132能显著提高细胞的凋亡率,其机制可能与两药联合后降低NF-κB活性、促进凋亡基因蛋白Bax的表达,进而增高Caspase-3表达有关。
