徐维佳
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 供职机构：厦门出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 凡纳滨对虾桃拉综合征病毒主要结构蛋白基因的克隆及原核表达被引量：2
- 2007年
- 根据GenBank中桃拉病毒的全基因组序列,分别设计扩增该病毒主要结构蛋白基因vp1、vp2、vp3的相应引物,以发病的凡纳滨对虾中提取的总RNA为模板,利用RT-PCR技术对目的基因进行了扩增,分别获得分子量为1 164、849、507bp的基因片段,与预期一致.再将目的基因与pET-28a载体连接,分别构建重组表达载体pET-VP1、pET-VP2和pET-VP3,重组子经酶切和测序鉴定后导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测.SDS-PAGE电泳的结果表明,在37℃下,0.5mmol/dm3的IPTG诱导表达的重组蛋白均以包涵体的形式存在,重组蛋白VP1、VP2、VP3的大小分别为48、36、24KDa.本研究的结果为制备桃拉病毒主要结构蛋白的特异性抗体,进而研制桃拉病毒快速检测试剂盒奠定了基础.
- 刘棠彭小莉陈亮徐维佳陈伟玲方元炜陈双雅谢明星
- 关键词：桃拉病毒结构蛋白原核表达凡纳滨对虾
- 对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒衣壳蛋白基因的克隆表达及抗体制备被引量：2
- 2008年
- 本文根据GenBank登录的对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)的全基因组序列(NC-002190),设计出主要结构蛋白基因的相应引物,从厦门发病的对虾中,提取DNA,以此为模板,利用PCR扩增目的基因.再将目的基因分别与pGEX-6p1载体和pET-28a载体连接,构建重组表达载体pGEX-IV、pET-IV,重组子经酶切和测序鉴定后导入表达型大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测,大小约为62KDa和41KDa,与预测大小一致.将pET-IV表达重组蛋白经纯化,免疫小鼠,W estern免疫印迹反应结果表明其抗体均可与pGEX-IV和pET-IV表达的蛋白发生特异性反应.本研究的结果为对虾IHHNV的快速检测及其免疫提供了研究基础.
- 彭小莉刘棠徐维佳王群力陈伟玲陈双雅王景明谢明星
- 关键词：衣壳蛋白基因克隆及表达蛋白质纯化对虾
- 牛白细胞黏附缺陷病液相基因芯片检测方法的建立被引量：4
- 2013年
- 从福建某奶牛场200头进口荷斯坦牛采血提取牛血液DNA,根据已知牛染色体上CD18编码基因序列383位碱基由A变为G而引起牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)设计特异性野生型和突变型引物,建立液相基因芯片检测方法用于牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)的检测,结果检出2头母牛为BLAD携带者,检出率为0.67%,没有发现患病牛。结果证明建立的液相基因芯片检测方法是一种敏感性和特异性很高的筛选奶牛BLAD有害基因的新方法。
- 谢明星彭小莉苗春柳刘棠陈伟玲王群力王景明周斌华徐维佳许秋贝
