姚文娟
- 作品数：6 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 谷氨酸棒杆菌赖氨酸转运体结构的初步分析
- 谷氨酸棒杆菌是一种在工业上大规模生产各种氨基酸的革兰氏阳性菌,也是生产赖氨酸的常见菌株.赖氨酸的分泌对于赖氨酸生产而言是十分重要的过程,该过程能将赖氨酸合成途经产生的赖氨酸分泌至培养基中.研究发现,一种新型的转运体和赖氨...
- 姚文娟邓小昭董莉莉杨静静王昊鹏李春雷
- 关键词：谷氨酸棒杆菌绿色荧光蛋白
- 文献传递
- HBV转录后调节序列的功能研究及其在核酸疫苗中的应用
- HBV转录后调节序列/(HPRE/)是乙肝病毒/(HBV/)基因组中在转录后水平调节HBV基因表达的调控序列，广泛存在的细胞核因子即HPRE结合蛋白与该序列结合能促进mRNA向细胞核外转移，从而促进病毒基因的复制和表达，...
- 姚文娟
- 关键词：IFN-Α荧光素酶DNA疫苗生物安全性
- 文献传递
- 毕赤酵母木糖还原酶定点突变改善其对双辅酶的亲和力被引量：2
- 2009年
- 通过毕赤酵母(Pichia stipitis)木糖还原酶(xylose reductase,XR)基因定点突变,获得NADH高亲和力的毕赤酵母木糖还原酶(PsXR),改善了辅酶不同而导致的酿酒酵母胞内氧化还原失衡.同时克隆了PsXR编码基因,通过BLAST工具进行同源性搜索,并用生物软件进行序列比对和结构分析,确定突变位点.用融合PCR方法进行定点突变,并在大肠杆菌表达系统中进行融合表达,且对表达产物进行HIS-TAG亲和纯化,分光光度法检测酶活性,计算比活力.本研究成功获得突变XR编码基因,并收集了纯化的突变蛋白.酶活性检测和比活力计算显示,3种突变酶对2种辅酶的亲和力在一定程度上都发生了变化.与未突变的PsXR相比,3种突变酶对辅酶NADPH的亲和力均显著下降,突变酶M3对辅酶NADH的亲和力未发生变化,而突变酶M1和M4对辅酶NADH的亲和力显著升高,其中突变酶M1对NADH的亲和力明显提高,对NADPH的亲和力明显下降,其活性主要依赖辅酶NADH,提示K270R位点在XR与辅酶结合中起关键作用.
- 董莉莉邓小昭钟辉姚文娟于娟杨静静
- 关键词：木糖木糖还原酶
- 猪囊虫DNA疫苗pEP1的生物安全性研究
- 2009年
- 猪囊虫核酸疫苗pEP1能在猪体内产生较高滴度的保护性抗体，具有较高的免疫保护率，本研究就核酸疫苗pEP1的生物安全性问题进行了深入探讨。首先，将核酸疫苗pEPl以肌注方式免疫仔猪，分别于接种后1天、7天、4周、8周分离各组织，提取组织总DNA，利用PCR技术分析质粒DNA在各组织的分布。研究发现，在疫苗接种后第1天几乎所有组织都能检测到质粒DNA，随着时间的延续，仅在注射部位检测到质粒的存在，说明肌注DNA疫苗在注射部位以外组织中很快被清除。其次，对残存质粒的注射部位组织进行细胞基因组整合可能性分析，并未发现质粒DNA整合入宿主细胞基因组中。同时采集猪舍周围样品，PCR法分析DNA疫苗上的CMV启动子基因、抗性基因和抗原表位基因在环境中发生转移和扩散的可能性，结果显示疫苗质粒并没有转化整合环境细菌。因而我们认为该猪囊虫核酸疫苗对猪体和环境都是安全的，具有很好的应用前景。
- 鲁卫东邓小昭姚文娟林意菊刁振宇周宗安
- 关键词：DNA疫苗生物安全性
- 以报告基因荧光素酶研究HPRE功能元件与IFN-α应答的关系被引量：4
- 2006年
- 目的:以荧光素酶(luciferase,LUC)基因为报告基因,探讨HBV转录后调节序列(HPRE)的功能元件(α、β1和β2)对IFNα作用的影响。方法:用PCR法从载体pGEMluc中扩增LUC基因,并克隆入真核表达载体pcDNA3.0中。以含乙肝病毒(HBV)基因组的质粒A01为模板,扩增HPRE(完整的HPRE)、HPREαβ1及HPREβ1β2片段,并分别插入LUC基因的下游。利用脂质体介导的转染法,将重组质粒分别导入人肝癌细胞株HepG2中,用LUC检测系统检测IFNα作用前后LUC表达活性的变化。结果:经测序证实,重组质粒pcDNA3.0luc、pcDNA3.0lucHPRE、pcDNA3.0lucHPREαβ1及pcDNA3.0lucHPREβ1β2构建成功。检测结果显示,IFNα作用前,HPRE、HPREαβ1和HPREβ1β2均能提高LUC的活性,IFNα作用后,HPRE和HPREβ1β2能明显降低LUC的活性,而HPREαβ1对其表达则没有显著影响。结论:HPRE的功能元件β2与IFNα作用的关系最为密切,而功能元件α和β1在IFNα应答中作用甚小,提示IFNα诱导产生的HPRE抑制性结合蛋白很可能是与β2结合的,为进一步研究IFNα在治疗HBV感染和慢性肝炎中的作用机制,以及HPRE抑制性结合蛋白的作用提供了一定的实验依据。
- 姚文娟刁振宇邓小昭孔晶周宗安高健张云
- 关键词：IFN-Α荧光素酶转染
- 猪囊虫DNA疫苗pPCV的生物安全性
- 2008年
- 以猪囊虫DNA疫苗pPCV为研究对象,其生物安全性问题。将DNA疫苗pPCV以肌注方式免疫仔猪,分别于接种后1d、7d、4周、8周分离各组织,提取组织总DNA,利用PCR技术分析了质粒DNA在各组织的分布,以及与细胞基因组整合的可能性;同时采集环境样品,PCR法分析DNA疫苗上的CMV启动子基因、抗性基因和抗原基因在环境中发生转移和扩散的可能性。结果表明,在疫苗接种后第1天几乎所有组织都能检测到质粒DNA,随着时间的延续,仅在注射部位检测到质粒的存在,并且未发现质粒DNA整合入细胞基因组以及转化环境细菌。实验结果表明肌注DNA疫苗在注射部位以外组织中很快被清除,在注射部位组织及环境细菌中均未发现整合现象,因此认为该DNA疫苗对猪体和环境都是安全的。
- 姚文娟邓小昭刁振宇孔晶钟辉周宗安
- 关键词：DNA疫苗生物安全性
