宋怀婷
- 作品数：5 被引量：6H指数：1
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- Nulp1基因抑制P19CL6细胞向心肌细胞分化被引量：1
- 2010年
- Nulp1基因是已克隆的一个新的bHLH转录因子亚家族成员。前期的研究表明:Nulp1蛋白作为一个转录抑制子对SRF信号途径有极强的抑制作用。为了进一步研究Nulp1基因在心肌分化中的作用,在能够高效分化为心肌细胞的P19CL6细胞系中过表达Nulp1基因,发现心肌分化标志基因的表达被抑制;用RNA干扰技术,使Nulp1基因在P19CL6细胞系中的内源表达降低,发现心肌分化标志基因的表达提高,说明Nulp1基因能够抑制P19CL6细胞系向心肌细胞的分化。
- 刘仕杰梁洁宋怀婷邓云莫小阳万永奇李永青袁婺洲江志钢吴秀山王跃群
- 关键词：心肌分化RNA干扰
- myh6蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备被引量：1
- 2010年
- 斑马鱼心脏发育模型中,myh6编码是一种促进心室心肌细胞扩张的转录因子。为了进一步研究myh6在心脏发育和心脏疾病发生中的功能,需要获得斑马鱼myh6蛋白并制备其抗体。从斑马鱼心脏组织中提收总RNA,通过反转录得到心脏组织特异表达基因的cDNA,PCR扩增得到myh6部分编码区序列,然后将其连接到pGEX-4T载体上获得原核表达。经酶切及测序鉴定后,转化BL21细菌,并用IPTG诱导表达融合蛋白,谷胱甘肽琼脂糖珠亲和纯化,将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western blotting检测抗体的特异性。结果显示,获得了myh6原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗myh6多克隆抗体,为myh6功能的进一步研究提供了有力的工具。
- 梁艳宋怀婷李竞超吴秀山袁婺洲
- 关键词：融合蛋白多克隆抗体
- 斑马鱼基因Myh6和Nodal与果蝇CG3295基因的多克隆抗体制备及表达研究
- 心脏的发育是一个极其复杂的过程,斑马鱼模型是研究心脏发育的分子机制的理想模型之一。Myh6是心脏发育的标志基因,促进心室心肌细胞扩张;Nodal是调节心脏左右不对称发育的关键基因。目前在斑马鱼模型中很少有利用抗体在蛋白水...
- 宋怀婷
- 关键词：NODAL多克隆抗体
- 文献传递
- Nodal蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备被引量：1
- 2010年
- 斑马鱼心脏发育模型中Nodal编码转录因子调节心脏的左右不对称发育,为了进一步研究Nodal信号途径在心脏发育中的调控作用和心脏疾病发生的分子机制,需要获得斑马鱼Nodal蛋白并制备其抗体。采用从斑马鱼心脏组织中提取RNA,通过反转录得到心脏组织各种表达基因的cDNA为模板,PCR扩增得到Nodal部分编码区序列,然后将其连接到pET-28a载体上获得原核表达。经酶切及测序鉴定后,转化Rosseta细菌,并用IPTG诱导表达融合蛋白,Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western blotting检测抗体。获得了Nodal原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗Nodal多克隆抗体,为Nodal功能的进一步研究奠定了基础。
- 宋怀婷梁洁莫小阳邓云万永奇李永青袁婺洲江志钢吴秀山王跃群
- 关键词：NODAL融合蛋白多克隆抗体
- KLHL31促进C2C12细胞的肌原分化被引量：2
- 2010年
- 人类KLHL31基因是本实验室已克隆的基因,其蛋白质含有保守的BTB和串连重复的Kelch结构域,已有报道表明其在人类成体骨骼肌和心肌组织中特异表达。RT-PCR分析表明在C2C12细胞肌原分化过程中过表达KLHL31能够提高肌原分化标志基因MyoD与Myogenin的转录水平;荧光报告系统分析发现过表达KLHL31能够增强肌原分化相关基因MCK启动子的活性,表明KLHL31能够促进C2C12细胞的肌原分化。
- 梁洁刘仕杰宋怀婷邓云莫小阳万永奇李永青袁婺州江志钢吴秀山王跃群
- 关键词：C2C12细胞MYODMYOGENIN
