刘景伟
- 作品数:1 被引量:4H指数:1
- 供职机构:邢台医学高等专科学校更多>>
- 发文基金:河北省自然科学基金河北省科技支撑计划项目河北省高等学校科学技术研究青年基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 假坚强芽胞杆菌中乙醇降解相关酶的克隆、表达及酶学特性被引量:4
- 2013年
- 【目的】研究假坚强芽胞杆菌OF4中乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的酶学特性。【方法】通过引物设计,采用PCR技术从嗜碱芽胞杆菌OF4的基因组DNA中扩增获得乙醇脱氢酶(adh)基因和乙醛脱氢酶(aldh)基因,构建表达载体,通过异源原核表达,Ni-NTA柱层析纯化酶蛋白,分析其酶学特性。【结果】乙醛脱氢酶的最适反应温度为35℃,最适反应pH值为8.0,酶蛋白的活力为979.6 U/mg,其稳定性在25℃和35℃下比45℃稍好;尽管由于乙醇脱氢酶的表达量低而未能纯化获得酶蛋白,但通过双基因共表达及乙醇耐受性实验发现乙醇脱氢酶也具备较高的催化活性。【结论】成功地从假坚强芽胞杆菌OF4中克隆获得了乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶基因,二者共同作用能够较大提高宿主对乙醇的耐受性。
- 鞠建松马宁赵冉冉刘景伟徐书景赵宝华
- 关键词:乙醛脱氢酶乙醇脱氢酶乙醇耐受性共表达