鞠建松
- 作品数：53 被引量：75H指数：4
- 供职机构：河北师范大学更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学化学工程更多>>
- 原玻璃蝇节杆菌D-氨基酸氧化酶及突变体的酶学特性研究
- [目的]研究原核生物来源D-氨基酸氧化酶的酶学特性.[方法]通过PCR从原玻璃蝇节杆菌中克隆获得D-氨基酸氧化酶基因,构建原核表达载体,并以该表达载体为模板,采用QuickChange Site-Directed Mut...
- 冯利伟李辉欣徐书景鞠建松赵宝华
- 猪肺炎支原体168弱毒菌株P65-DnaKc融合蛋白的表达及免疫原性被引量：4
- 2015年
- 研究猪肺炎支原体168(Mycoplasma hyopneumoniae 168,Mhp168)弱毒株融合蛋白P65-DnaKc免疫原性。根据GenBank中Mhp168弱毒株p65和dnaKc基因的开放阅读框设计特异性引物,进行PCR扩增,构建原核表达载体pET-28α-P65,pET-28α-DnaKc以及pET-28α-P65-DnaKc,经原核表达并纯化获得的蛋白与佐剂以体积比1∶1乳化后免疫小鼠,通过酶联免疫吸附反应(ELISA)测定小鼠血清的抗体效价。选取抗体效价较高的小鼠进行攻毒试验,记录分析试验结果。经间接ELISA试验证明单蛋白P65、DnaKc以及融合蛋白P65-DnaKc均具有良好的免疫原性,血清效价分别为:1∶12 800、1∶51 200和1∶204 800,融合蛋白的血清抗体效价明显高于单蛋白;攻毒试验证明,P65-DnaKc重组蛋白疫苗的保护率可达90%。融合蛋白P65-DnaKc具有良好的优于P65和DnaKc单蛋白的免疫原性。
- 刘思远刘东关婉怡鞠建松赵宝华
- 关键词：猪肺炎支原体P65基因
- 丙氨酸消旋酶C-端结构域重组体的构建及其功能初探被引量：1
- 2021年
- 【目的】将嗜碱芽孢杆菌丙氨酸消旋酶OF4DadX的N-端结构域分别与多个不同种属的丙氨酸消旋酶C-端结构域重组,探究丙氨酸消旋酶C-端结构域功能。【方法】利用基因拼接构建丙氨酸消旋酶重组基因,通过镍亲和层析纯化酶蛋白,采用D-氨基酸氧化酶偶联法检测重组酶蛋白的酶学特性,借助分子筛和HPLC液相色谱分析其聚合状态及动力学参数。【结果】通过基因拼接构建了12个重组基因,经检测,表达、纯化获得的重组酶蛋白中只有OF4TtDadX240c具有催化活性,其活性仅为OF4DadX的60.54%,酶催化动力学结果显示OF4TtDadX240c催化反应速率Vmax/Km下降约10倍,但其稳定性大幅提高,半衰期比OF4DadX延长约5倍,耐热性提高较明显;聚合状态表明OF4DadX、OF4TMDadX226c和OF4TtDadX240c为二聚体结构,其他酶蛋白均为单体,但OF4TMDadX226c未检测到活性,推测可能是酶催化活性中心移位,未能形成质子转移而失去活性。【结论】丙氨酸消旋酶C-端折叠结构域对消旋酶低聚化、稳定性和酶催化功能具有重要作用。
- 何广正韩卿卿翟浠佐徐书景鞠建松
- 关键词：酶学特性二聚化基因重组
- 一种丙氨酸消旋酶的突变体酶蛋白及其制备方法
- 本发明公开了一种丙氨酸消旋酶的突变体酶蛋白及其制备方法。根据同源序列二级结构比对结果，通过定点突变技术将腾冲嗜热厌氧菌中丙氨酸消旋酶的173、360两个位点分别突变，构建双点突变表达载体pET‑S173Q/Q360Y，通...
- 鞠建松韩卿卿徐书景任晓朴窦金萍郭博涵何广正赵宝华
- 文献传递
- 一种合成DL-丙氨酸的三基因共表达载体及应用
- 本发明公开了一种合成DL‑丙氨酸的三基因共表达载体的构建及应用。根据同尾酶原理，将假坚强芽胞杆菌中编码丙氨酸脱氢酶(ald)、丙氨酸消旋酶(alr)和葡萄糖脱氢酶(gdh)基因串联插入到改造过的质粒pET‑22bNS上，...
- 鞠建松徐书景王珊珊孙晴晴蔡晓赵宝华
- 文献传递
- 采用钠盐调酸发酵生产D-乳酸的工艺研究被引量：3
- 2014年
- 对芽孢乳杆菌CASD采用钠盐调酸发酵生产D-乳酸的工艺进行了探索.以廉价花生粕为唯一氮源,采用氢氧化钠为中和剂,D-乳酸的发酵质量浓度达到118.2g/L,糖酸转化率为89.1%,光学纯度达到99.3%,满足乳酸聚合要求.钠盐调酸适用于电渗析分离纯化乳酸工艺,该研究为开发新型的连续发酵-分离耦合生产D-乳酸工艺提供了技术基础.
- 李媛徐书景张庆王丽敏于波鞠建松赵宝华
- 关键词：D-乳酸氢氧化钠
- 假坚强芽胞杆菌中乙醇降解相关酶的克隆、表达及酶学特性被引量：4
- 2013年
- 【目的】研究假坚强芽胞杆菌OF4中乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的酶学特性。【方法】通过引物设计,采用PCR技术从嗜碱芽胞杆菌OF4的基因组DNA中扩增获得乙醇脱氢酶(adh)基因和乙醛脱氢酶(aldh)基因,构建表达载体,通过异源原核表达,Ni-NTA柱层析纯化酶蛋白,分析其酶学特性。【结果】乙醛脱氢酶的最适反应温度为35℃,最适反应pH值为8.0,酶蛋白的活力为979.6 U/mg,其稳定性在25℃和35℃下比45℃稍好;尽管由于乙醇脱氢酶的表达量低而未能纯化获得酶蛋白,但通过双基因共表达及乙醇耐受性实验发现乙醇脱氢酶也具备较高的催化活性。【结论】成功地从假坚强芽胞杆菌OF4中克隆获得了乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶基因,二者共同作用能够较大提高宿主对乙醇的耐受性。
- 鞠建松马宁赵冉冉刘景伟徐书景赵宝华
- 关键词：乙醛脱氢酶乙醇脱氢酶乙醇耐受性共表达
- 腾冲嗜热厌氧菌丙氨酸消旋酶底物通道氨基酸位点的功能被引量：4
- 2018年
- 【目的】通过定点突变探究腾冲嗜热厌氧菌MB4中生物合成型丙氨酸消旋酶Tt Alr底物通道内氨基酸位点A172和S173的功能。【方法】利用定点突变PCR技术构建突变体,通过亲和层析法纯化酶蛋白,采用D-氨基酸氧化酶偶联法检测各突变蛋白的活性及其稳定性。【结果】通过定点突变PCR成功得到8个突变体,酶学特性分析发现,A172位点突变为丝氨酸(S)后酶蛋白的相对活性有所提升,但含有该位点突变的酶蛋白稳定性均大幅下降;S173位点突变为天门冬氨酸(D)后导致突变体蛋白的最适反应温度提升了15°C,半衰期大幅延长,但相对活性明显下降。【结论】丙氨酸消旋酶Tt Alr底物通道内A172和S173位点均是影响酶蛋白催化活性和稳定性的关键位点。
- 何广正韩卿卿徐书景赵宝华鞠建松
- 关键词：定点突变酶学特性
- 一种合成四氢嘧啶的三基因共表达载体及应用
- 本发明公开了一种高效合成四氢嘧啶的三基因共表达载体的构建及应用。根据同尾酶原理，将假坚强芽孢杆菌中编码L‑二氨基丁酸转氨酶(ectA)、L‑二氨基丁酸乙酰转移酶(ectB)和四氢嘧啶合成酶(ectC)基因依次插入到改造过...
- 鞠建松徐书景宋瑞甜王珊珊王青青孙韩聪赵宝华
- 文献传递
- 一种具有高转化率的反式-4-羟基-L-脯氨酸羟化酶改造基因及其应用
- 本发明公开了一种具有高转化率的反式-4-羟基-L-脯氨酸羟化酶改造基因及其应用。通过优化指孢囊菌（<I>Dactylosporangium</I><I/>sp.<I/>RH1）中反式-4-羟基-L-脯氨酸羟化酶（GenB...
- 李玮鞠建松薛张伟张金秀王立安张琳琳李天云张庆陈娇娇
