李竞超
- 作品数:3 被引量:1H指数:1
- 供职机构:湖南师范大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 果蝇血液发育候选基因CG8419的相互作用蛋白研究
- 心血管疾病严重危害人类的健康。心血管发育是一个复杂的过程,受一系列转录因子的精确调控。从分子水平上系统地研究控制心血管发育及相关基因的相互调控关系,有助于人们深入认识心血管疾病发生的机制。果蝇CG8419基因是是本室克隆...
- 李竞超
- 关键词:免疫共沉淀
- 斑马鱼ANF基因的克隆及多克隆抗体的制备
- 2011年
- 心房钠尿肽ANF是钠尿肽家族中的一员,是心肌细胞分泌的一种循环激素,主要在心房组织分泌。生物信息学分析表明,斑马鱼ANF基因开放阅读框全长321bp,编码106个氨基酸,PCR扩增获得斑马鱼ANF基因全长。将所得的PCR片段插入原核表达载体pGEX-4T-1中,并将重组质粒(pGEX-4T-1-ANF)转化大肠杆菌BL21。通过IPTG诱导表达GST-ANF融合蛋白,经GST亲和层析法纯化后,免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗体,Western blotting分析表明,制备的抗体具有良好的高效价性和特异性。
- 李竞超吴坚梁艳莫小阳吴秀山
- 关键词:融合蛋白多克隆抗体
- myh6蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备被引量:1
- 2010年
- 斑马鱼心脏发育模型中,myh6编码是一种促进心室心肌细胞扩张的转录因子。为了进一步研究myh6在心脏发育和心脏疾病发生中的功能,需要获得斑马鱼myh6蛋白并制备其抗体。从斑马鱼心脏组织中提收总RNA,通过反转录得到心脏组织特异表达基因的cDNA,PCR扩增得到myh6部分编码区序列,然后将其连接到pGEX-4T载体上获得原核表达。经酶切及测序鉴定后,转化BL21细菌,并用IPTG诱导表达融合蛋白,谷胱甘肽琼脂糖珠亲和纯化,将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western blotting检测抗体的特异性。结果显示,获得了myh6原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗myh6多克隆抗体,为myh6功能的进一步研究提供了有力的工具。
- 梁艳宋怀婷李竞超吴秀山袁婺洲
- 关键词:融合蛋白多克隆抗体