崔甜甜
- 作品数:19 被引量:51H指数:3
- 供职机构:西南大学更多>>
- 发文基金:公益性行业(农业)科研专项国家现代农业产业技术体系建设项目国家生猪现代产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 柑橘黄化脉明病毒突变体及其构建方法
- 本发明公开了一种柑橘黄化脉明病毒突变体,是在CYVCV的外壳蛋白基因上进行定点突变或者基因插入/缺失获得,定点突变是指将外壳蛋白基因上的第6817位碱基T突变为C得到,基因插入/缺失是指外壳蛋白基因上C<Sup>6245...
- 宾羽宋震崔甜甜周常勇
- 广东部分地区猪流行性腹泻病毒流行病学调查被引量:18
- 2016年
- 本试验对临床上猪腹泻相关的病原进行了检测并对广东部分地区的猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)展开了分子流行病学的调查。对采集自广东地区的14个规模化猪场的19份腹泻病料进行了RT-PCR检测,并对检出的12株PEDV的COE、ORF3、M以及N基因进行测序和遗传进化分析。结果显示,临床的腹泻案列多为混合感染所致,检出的主要病原有猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、PEDV、猪嵴病毒(PKV)、猪A群轮状病毒(PoRV)以及牛流行性腹泻病毒(BVDV)。与参考毒株CV777相比12株PEDV的COE、ORF3、M、N基因均存在不同程度、不同位点的氨基酸突变。COE、ORF3、M以及N基因的遗传进化分析显示:广东地区的12株PEDV毒株属于同一个分支彼此间的亲缘关系较近但与CV777疫苗毒株以及2012年之前广东地区分离的毒株CHGD-01、CH-GDGZ-2012、GD-1以及GD-A等毒株分属于2个不同的分支,亲缘关系相对较远。结果表明,广东地区现阶段流行的PEDV优势毒株与2012年之前相比可能已经发生了改变,CV777疫苗毒株的免疫效果如何还有待于通过更多的临床实验来验证。
- 白小磊崔进崔甜甜陈耀石庆伟冯嘉萍王林川张桂红
- 关键词:猪腹泻PEDV分子流行病学亲缘关系
- 三元穿梭载体及利用其构建CYVCV侵染性克隆的方法
- 本发明公开了一种三元穿梭载体pTY,其序列如SEQ ID NO:11所示。还公开了一种利用pTY构建柑桔黄化脉明病毒(CYVCV)侵染性克隆的方法,包括如下步骤:(1)制备CYVCV全长cDNA;(2)采用限制性内切酶S...
- 宋震崔甜甜宾羽晏建红李中安周常勇
- 文献传递
- PRRSV XH-GD株NSP7缺失感染性克隆的构建
- 2014年
- PRRSV的非结构蛋白NSP7是病毒的一种高度保守的非结构蛋白,NSP7可以进一步水解产生NSP7α,NSP7β。目前对于NSP7的研究相对较少,对其生物学功能尚不清楚。为了进一步了解PRRSV NSP7对于病毒的复制的作用,本试验通过反向遗传平台在PRRSV XH-GD全长病毒骨架中分别对NSP7α,NSP7β,NSP7编码区进行缺失,构建NSP7以及NSP7部分缺失株的全长cDNA的重组质粒,并对构建的重组质粒进行病毒拯救。结果表明,对NSP7α,NSP7β,NSP7缺失对病毒的拯救是致死性的,推测NSP7对于病毒的复制具有重要作用,本研究结果对于NSP7的相关功能研究提供一定的参考依据。
- 谢杰雄崔甜甜陈耀张民泽崔进查云峰孙龙赵孟孟邓胜朝张桂红
- 关键词:PRRSV
- 柑橘黄化脉明病毒和柑橘叶斑驳病毒的侵染性克隆构建
- 柑橘病毒病害每年都会对世界柑橘产业造成严重的经济损失.柑橘黄化脉明病毒(Citrusyellowclearingveinvirus,CYVCV)作为2009年我国发现侵染柑橘的一种新病毒,会引起柠檬和酸橙嫩叶脉明、黄化、...
- 崔甜甜
- 5株口蹄疫病毒VP1和3A基因的序列分析被引量:4
- 2016年
- 为了解广东地区口蹄疫病毒(FMDV)遗传进化情况,本研究从广东采集5份疑似FMDV感染病料,对样品进行RT-PCR扩增,经克隆测序后,对FMDVs基因序列比对和遗传进化分析。鉴定结果显示,这些病料样品中2份为O型FMDV感染,3份为A型FMDV感染。2个FMDV O型样品中VP1基因的全长均为639 bp,编码213个氨基酸,3A基因的全长均为459 bp,编码153个氨基酸;3个FMDV A型样品中VP1基因的全长均为636 bp,编码212个氨基酸。3A基因的全长均为459 bp,编码153个氨基酸;与国内外分离的O/A型病毒株VP1基因核苷酸序列相比较发现,2个O型病毒VP1基因与O/BY/CHA/2010株核苷酸序列相似性最高(95.0%),均属于耿马谱系FMDV(属ESA基因型);3个A型病毒VP1基因与A/GDMM/CHA/2013株核苷酸序列相似性最高(99.2%),均属于Asia型FMDV。本研究通过对FMDV遗传进化分析为我国FMDV流行病学的研究提供了基础数据,同时对临床上不同型疫苗的选择提供依据。
- 石庆伟冯嘉萍陈耀白小磊崔甜甜崔进王林川张桂红
- 关键词:口蹄疫病毒VP1基因RT-PCR
- 柑橘黄化脉明病毒弱毒分离株及其应用
- 本发明公开了一种柑橘黄化脉明病毒弱毒分离株,该弱毒株相对于强毒株产生的基因突变点是:TGB区域的T<Sup>5306</Sup>→C,A<Sup>5482</Sup>→G,T<Sup>5792</Sup>→C,A<Sup...
- 宋震宾羽崔甜甜周常勇
- 一种快速鉴定柑橘脉突病毒侵染植株的方法
- 本发明提供一种快速鉴定柑橘脉突病毒侵染植株的方法,包括如下步骤:(1)取待测植株根部,提取总RNA;(2)以提取的总RNA为模板,利用柑橘脉突病毒的特异性下游引物EVqR4进行逆转录反应,获得cDNA;(3)以步骤(2)...
- 宋震王艳娇崔甜甜陈洪明李中安周常勇
- 文献传递
- 柑橘脉突病毒实时荧光定量RT-PCR检测体系的建立与应用被引量:16
- 2016年
- 为了快速、灵敏地检测柑橘脉突病毒(Citrus vein enation virus,CVEV),通过设计特异性引物(EVq F4/EVq R4),优化反应条件,建立了CVEV的实时荧光定量RT-PCR检测体系。该方法特异性良好;检测灵敏度比常规RT-PCR高100倍;标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.992,扩增效率101.8%;检测组内和组间变异系数均小于2.85%,重复性较好。利用所建立的实时荧光定量方法对柑橘植株进行检测发现,‘代代酸橙’和‘象山红’植株中CVEV分布不均匀,其中根部病毒滴度最高,分别为162.52和45.32拷贝·ng^(-1) RNA,皮及叶部病毒滴度相对较低。
- 王艳娇崔甜甜黄爱军陈洪明李中安周常勇宋震
- 关键词:实时荧光定量RT-PCR
- 柑橘黄化脉明病毒基因组的长链RT-PCR扩增、克隆及序列分析被引量:3
- 2017年
- 为了建立柑橘黄化脉明病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)基因组长链RT-PCR扩增体系,构建其全长cDNA克隆,为深入了解CYVCV分子特性及其致病机理奠定基础。根据GenBank中CYVCV基因组序列和5′RACE扩增结果设计引物。以感染CYVCV的代代酸橙(Citrus aurantium‘Daidai’)植株总RNA为模板进行长链RT-PCR扩增,得到CYVCV全基因组cDNA,克隆至pGEM-Teasy载体,并进行序列测定与分析。结果显示,建立了一步扩增CYVCV全基因组的长链RT-PCR方法,扩增出约7.5 kb的目标片段;所获得的4个CYVCV全基因组cDNA序列与GenBank中已登录的相关毒株的核苷酸序列同源性为93%~99%。
- 崔甜甜王艳娇宾羽李中安周常勇宋震
- 关键词:全长CDNA