易亮
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
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- 氯化钴化学模拟低氧与低氧环境对大鼠肺动脉成纤维细胞的作用比较被引量：2
- 2017年
- 目的比较氯化钴(CoCl_2)化学模拟低氧及低氧环境对于原代大鼠肺动脉成纤维细胞(PAFs)增殖、迁移、表型转化的作用。方法分离培养原代大鼠PAFs,利用CoCl_2刺激细胞,或通过低氧细胞培养(1%O_2)刺激诱导PAFs,通过CCK-8试验、细胞划痕、细胞迁移、表型转化标志蛋白及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路蛋白表达的实验结果比较CoCl_2与低氧环境对于PAFs的作用。结果与对照组相比,100μmol/mL CoCl_2刺激对PAFs的细胞增殖活力、迁移能力、细胞表型转化能力的作用无明显影响(P>0.05);而1%O_2可以明显提高PAFs的细胞增殖活力和迁移活力,并可以使α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达上调(P<0.05)。结论 CoCl_2化学模拟低氧与低氧环境对PAFs的促增殖、促迁移、促表型转化作用存在差异。
- 柴晓宇许慧莹刘钟桧易亮刘新民
- 关键词：氯化钴低氧肺动脉成纤维细胞表型转化
- NVP-BEZ235抑制低氧诱导的大鼠肺部炎症反应
- 2017年
- 目的评价PI3K/mTOR双重抑制剂NVP-BEZ235对低氧诱导的大鼠肺部炎症及血清炎性因子的作用。方法将18只SD雄性大鼠随机分为对照组、低氧组和NVP-BEZ235干预组(均n=6),低氧组和干预组置于低压低氧(0.5大气压、吸入氧浓度约10%)环境饲养,干预组于实验第1日起给予NVPBEZ235(35 mg·kg^(-1))隔日灌胃给药,对照组匹配常氧饲养,21 d后全部动物以5%戊巴比妥钠麻醉后取材。肺组织固定后石蜡包埋并行HE染色及Masson染色并进行病理评分;ELISA方法检测各组大鼠血清中白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、转化生长因子(TGF)-β水平。结果低氧组大鼠肺泡炎症评分及肺纤维化评分显著高于对照组(P<0.01),NVP-BEZ235干预组炎症评分及肺纤维化评分显著低于低氧组(P<0.01)。低氧组大鼠血清IL-1β、TNF-α、TGF-β较对照组显著升高(P<0.01),干预组IL-1β、TNF-α较低氧组降低(P<0.01),而TGF-β水平增高(P<0.05)。结论 NVP-BEZ235可以抑制低氧诱导的肺动脉高压大鼠的肺部炎症及纤维化水平,抑制血清IL-1β和TNF-α水平升高,提高血清TGF-β的表达水平。
- 柴晓宇易亮许慧莹刘钟桧刘新民
- 关键词：炎症肺动脉低氧转化生长因子Β
- 氯化钴对原代大鼠肺动脉成纤维细胞的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:探究氯化钴对于原代大鼠肺动脉成纤维细胞(PAF)的增殖、迁移、表型转化作用的影响。方法:分离培养大鼠肺动脉成纤维细胞,利用氯化钴刺激PAF细胞,并通过MTT、细胞划痕、Transwell、表型转化标志蛋白测定以及PI3K/Akt信号通路蛋白的变化研究氯化钴对PAF的影响。结果:MTT结果显示,与对照组相比,氯化钴可以抑制大鼠肺动脉成纤维细胞的增殖活性(P<0.001),并呈浓度依赖性。划痕实验及Transwell实验提示较高氯化钴(200μmol·L^(-1))处理PAF细胞后可以抑制细胞迁移。随浓度增加,氯化钴可以抑制PAF的P110α、p-Akt蛋白表达。结论:氯化钴对于体外培养的原代大鼠肺动脉成纤维细胞的增殖、迁移和表型转化特性有一定的抑制作用,这可能与氯化钴抑制PI3K/Akt信号通路的表达有关。
- 柴晓宇许慧莹刘钟桧易亮刘新民
- 关键词：氯化钴增殖P13K
- 多聚肌苷酸-多聚胞苷酸诱导肺腺癌A549细胞凋亡的机制被引量：1
- 2017年
- 目的研究多聚肌苷酸多聚胞苷酸［Poly（I：C）］对肺腺癌A549细胞活力的影响，探讨Poly（I：C）诱导A549细胞凋亡机制。方法用Poly（I：C）和脂质体3000转染A549细胞，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）检测细胞存活力；采用流式细胞术检测细胞凋亡；Western blotting用于检测凋亡相关蛋白、实时定量PCR检测细胞因子β干扰素（IFNβ）、趋化因子10（CXCL10）的表达。使用pancaspase抑制剂ZVADFMK和caspase8特异性抑制剂ZIETDFMK抑制凋亡蛋白后，观察Poly（I：C）诱导A549细胞凋亡的变化。RNA干扰实验敲低黑色素瘤分化相关抗原5（MDA5）、维甲酸诱导基因Ⅰ（RIGⅠ）的表达，进行上述指标的检测。结果200 ng/ml Poly（I：C）转染后，肺腺癌A549细胞的存活率为74.92%±6.24%，较转染前（95.32%±3.05%）降低（t=2.883，P=0.041）。100、200、400 ng/ml的Poly（I：C）诱导A549细胞凋亡率分别为9.97%±0.88%、23.63%±1.41%、32.57%±2.39%，与对照组（0.74%±0.15%）相比，差异均有统计学意义（t=4.489，P=0.002；t=11.616，P=0.000；t=16.932，P=0.000）。此外，死亡受体途径蛋白如TNF相关的凋亡诱导配体（TRAIL）、cleavedcaspase8、cleavedcaspase3明显升高，同时MDA5/RIGⅠ通路激活以及IFNβ、CXCL10的表达上调。pancaspase抑制剂ZVADFMK、caspase8抑制剂ZIETDFMK使细胞凋亡率分别降至3.17%±0.66%、5.35%±0.64%，与不加抑制剂（15.87%±0.93%）相比，差异有统计学意义（t=8.643，P=0.001；t=6.824，P=0.002）。RIGⅠ、MDA5敲低后，Poly（I：C）诱导的TRAIL、IFNβ、CXCL10表达下调。结论Poly（I：C）能降低A549细胞的存活率，通过激活死亡受体途径诱导A549细胞的凋亡，并且MDA5/RIGⅠ可能参与了该凋亡途径，此过程可能与IFNβ、CXCL10有关。
- 易亮孙丹韩倩柴晓宇刘新民
- 关键词：肺肿瘤细胞凋亡
