许可
- 作品数:2 被引量:11H指数:1
- 供职机构:四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 大肠杆菌glgC基因的定点突变及功能分析被引量:1
- 2008年
- 利用PCR从Escherichia coli JM109基因组中扩增到全长为1296bp的glgC基因编码区,通过PCR重组方法进行点突变,获得氨基酸突变的3个突变体,分别是Pro295Ser(Val121Ala,Met151Ile和Val334Asp)、Gly336Asp单点突变和Pro295Ser/Gly336Asp(Lys109Arg),其基因分别命名为295+3、336和295/336+1。将突变和未突变的基因分别克隆到pET32-a,构建重组质粒pET-glgC、pET-295+3、pET-336和pET-295/336+1,在文中分别简称为a、b、c和d。转化大肠杆菌BL21(DE3),在1mmol/L IPTG诱导下表达。SDS-PAGE电泳分析显示,在约67kDa处有1条明显与预期大小一致的蛋白质,表明目的基因已得到融合表达。上述转化子的碘染和糖原含量测定结果,第336位的Gly变成Asp后,宿主菌的糖原含量提高;Pro295Ser/Gly336Asp(Lys109Arg)的突变导致宿主菌的糖原含量与Gly336Asp突变体相近,表明在336突变基因的基础上增加Pro295Ser的突变没有进一步加大宿主菌中AGPase酶的反馈抑制效应的降低。已有的结果显示,Pro295Ser可以降低AGPase酶的反馈抑制效应活性,而实验中295+3突变基因转入宿主菌后细胞糖原含量明显降低,推测这个结果可能是295+3中的Val334Asp的突变造成,而334位的氨基酸可能是AGPase功能域中的一个重要位点。
- 周爽许可何明雄张义正
- 关键词:定点突变重组PCR
- 三个甘薯品种光合特性与生产量关系的比较被引量:10
- 2008年
- 对种植于成都地区的3个甘薯品种的植株性状、光合特性、鲜薯产量、茎叶产量等进行了分析比较,结果表明:绵粉一号在生长前期净光合速率最低,而在生长后期则最高;潮薯一号在生长前期净光合速率最高,而在生长后期则最低;徐薯18在生长前期与后期都处于中间水平。在3个品种中,绵粉一号是低产量高淀粉含量的品种,潮薯一号是高产量高淀粉含量的品种,徐薯18则是产量与淀粉含量都较高的品种。
- 许可周爽何博文张义正
- 关键词:甘薯净光合速率T/R生物产量