周伟平
- 作品数：9 被引量：56H指数：5
- 供职机构：无限极(中国)有限公司更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划广东省中国科学院全面战略合作项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 镰刀菌诱导白木香结香部位总RNA提取方法的研究被引量：3
- 2015年
- 目的白木香树在自然条件下不产生树脂,以自然、微生物或人工方式可使之形成沉香树脂。＂小孔滴注法＂接种镰刀菌人工诱导白木香结香,8个月后野外采集白木香结香部位（分泌黑色树脂的树干组织）,提取其总RNA,为阐明沉香特征产物的代谢途径、揭示人工诱导白木香结香的分子机制奠定基础。方法 ＂小孔滴注法＂人工造香,手工割取白木香结香部位。分别采用CTAB-Li Cl法、Trizol试剂法、RN09试剂盒法、改良异硫氰酸胍-CTAB法和Qiagen试剂盒法提取总RNA并检测完整性。结果与其它四种提取方法相比,Qiagen试剂盒法提取的RNA条带清晰,OD260/OD280比值在1.8-2.0的范围内。结论 Qiagen试剂盒法适用于镰刀菌人工诱导白木香结香部位总RNA提取,对其它次生代谢物质含量较高的植物中提取总RNA具有一定的借鉴意义。
- 陈晓东周伟平刘少烽陈晓颖钟兆健章卫民高晓霞
- 关键词：白木香RNA提取
- 铁包金根、茎特征图谱的研究
- 2013年
- 目的:建立铁包金根、茎HPLC特征图谱,为该药材质量评价研究提供参考。方法:采用HPLC构建24批不同产地不同种类铁包金根、茎的特征图谱,通过聚类分析和主成分分析对特征图谱进行化学模式识别。结果:以11个共有峰为特征指纹信息构建HPLC特征图谱,9批细叶勾儿茶和多叶勾儿茶根为一类,12个细叶勾儿茶和多叶勾儿茶的茎和3个多叶勾儿茶的根聚为一类。结论:HPLC特征图谱的构建为铁包金根、茎的质量评价研究提供参考依据。
- 谢明容周伟平徐煜纯董雷严寒静高晓霞
- 关键词：HPLC特征图谱模式识别
- 假鹰爪茎、叶组织内生真菌的分布和rDNA ITS序列系统发育分析被引量：5
- 2013年
- 目的研究假鹰爪(Desmos chinensis Lour.)茎、叶组织中内生真菌的分布及其rDNA ITS序列系统发育。方法采用石蜡永久制片法观察鹰爪茎、叶组织显微结构,细胞化学法确定内生真菌的分布,平板分离法分离培养内生真菌,对分离菌株进行rDNA ITS区PCR扩增和测序,通过rDNA ITS序列进行内生真菌的分类鉴定及系统发育分析。结果假鹰爪茎中的内生真菌主要分布在韧皮部薄壁细胞,叶中主要分布主脉上方厚角细胞以内的薄壁细胞、栅栏组织、海绵组织。共分离14株内生真菌,分属于拟茎点霉属(Phomopsis)、刺盘孢属(Colletotrichum)和球座菌属(Guignardia),其中拟茎点霉(P.spp.)占总菌株数的57.1%,其次为胶孢刺盘孢(C.gloeosporioides)和芒果球座菌(G.mangiferae)。结论内生真菌在假鹰爪茎、叶组织中均有分布,无明显组织特异性;rDNA ITS序列系统发育较好的揭示了假鹰爪内生真菌的系统进化关系。
- 高晓霞王磊周伟平严寒静李浩华章卫民
- 关键词：系统发育RDNA
- 白木香叶与沉香形成相关的信号分子研究被引量：6
- 2013年
- 目的应用气相色谱-质谱连用技术结合数据分析对未结香和已结香的白木香树的叶中挥发性成分进行比较。方法 15批白木香(树龄10个月至35年)用三氯甲烷冷浸后超声提取,GC-MS检测,主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对结果进行判别分析。结果白木香叶中共鉴定出75种挥发性成分,PCA和OPLS-DA进行分类,再用变量重要性投影法挑选得9个对差异贡献最大的潜在标志物;结香的白木香叶中芳香族的量显著降低(P<0.05),萜类成分角鲨烯的量显著升高(P<0.05)。生育酚仅在已结香的白木香叶中检测到。结论未结香和已结香白木香叶挥发性成分存在显著差异,为快速的、非破坏性的沉香药材采收时间及质量评价提供参考依据。
- 高晓霞周伟平谢明容陈晓颖郭晓玲章卫民吴关庆
- 关键词：结香
- 沉香中苄基丙酮与浸出物含量相关性研究被引量：24
- 2012年
- 目的:研究白木香结香过程中苄基丙酮与浸出物含量(%)之间的相关性。方法:采用气相色谱法测定样品中苄基丙酮含量。按中国药典(2010年版)一部沉香鉴别项下相关要求测定样品醇溶性浸出物的含量,并进行理化鉴别;应用"小孔滴注法"进行人工造香试验。结果:苄基丙酮浓度在5.780～104.0μg/mL(r=0.9997)及0.07500～28.20μg/mL(r=0.9995)范围内有良好的线性关系;加样回收率为99.9%～101.6%(n=6),RSD=0.65%。沉香商品药材中苄基丙酮与浸出物含量之间不呈正比关系。随着人工造香时间的增加,有些白木香结香部位的醇溶性浸出物和苄基丙酮含量均呈增加趋势;有些白木香结香部位醇溶性浸出物含量增加,而苄基丙酮含量呈下降趋势。结论:气相色谱法测定沉香中苄基丙酮含量操作简便,测定结果准确、重复性好;"小孔滴注法"人工造香技术快速可行,为沉香形成机理研究提供基础。
- 高晓霞周伟平钟兆健柳欣晶章卫民吴关庆
- 关键词：浸出物
- 西藏冬虫夏草水提液HPLC指纹图谱研究及核苷类成分测定被引量：9
- 2014年
- 目的建立西藏不同产区27批冬虫夏草水提液的高效液相色谱指纹图谱，并定量测定其6种主要核苷类成分（尿苷、肌苷、鸟苷、胸苷、腺苷、2＇-脱氧腺苷）的质量分数。方法采用高效液相色谱法，色谱柱为Agilent Eclipse XDB—C18柱（250mm×4．6mm，5μm），检测波长260nm，以甲醇．水为流动相进行梯度洗脱，柱温25℃，流速O．8mL·min^-1。结果建立了冬虫夏草水提液的HPLC指纹图谱，包含11个共有峰，各峰分离良好，指认出尿苷、肌苷、鸟苷、胸苷、腺苷、2’-脱氧腺苷6个特征成分．同时测定了其质量分数；6种特征成分质量浓度分别在10．71-96．4（r=0．9999），8．50～76．41（r：0．9999）。7．838-70．54（r=0．9999），1．120-10．08（r=0．9998），5．715-51．44（1-=0．9999），0．2625～2．363μg·mL^-1（r=0．9997）范围内与峰面积呈良好的线性关系；平均回收率依次为96．5％、97．7％、97．5％、95．2％、96．8％、101．5％，RSD分别为2．3％、2．7％、2．0％、2．6％、3．0％、2．7％（n=6）。结论本试验建立的指纹图谱可同时对冬虫夏草的6种主要核苷类成分进行分析，对评价藏产冬虫夏草的质量具有重要意义。
- 高晓霞周伟平谢明容代安国熊卫萍章卫民
- 关键词：冬虫夏草HPLC指纹图谱核苷类成分
- 湛江南药场引种檀香rDNAITS序列系统发育分析被引量：1
- 2014年
- 目的研究广东湛江南药场引种檀香与檀香科内植物rDNA ITS序列系统发育的关系。方法采用改良CTAB法提取檀香总DNA,分别对样品rDNA ITS区进行PCR扩增和测序,通过rDNA ITS序列进行分类鉴定及系统发育分析。结果 11个样品rDNA ITS序列间的遗传距离为0.000%-0.144%,邻接法和最大简约法构建的系统发育树显示国内引种自印度和印度尼西亚的檀香与印度檀香聚为一亚支（支持率为84%和95%）。结论基于rDNA ITS序列的测序分析和构建系统发育树的分子生物学方法,可为檀香药材的种类鉴定提供科学依据。
- 邓乐君周伟平刘少烽蔡聪高晓霞陈晓颖
- 关键词：檀香RDNAITS序列系统发育分析
- 镰刀菌诱导结香对白木香叶内生真菌分布和群落构成的影响研究被引量：6
- 2014年
- 为了研究沉香形成前后白木香叶组织中内生真菌的分布和群落构成,采用石蜡永久制片法观察白木香叶组织显微结构,细胞化学法确定内生真菌的分布。通过改良的CTAB法对白木香进行总DNA提取,利用真核生物通用引物同时对植物和内生真菌rDNA ITS序列进行PCR扩增,构建内生真菌rDNA ITS文库,RFLP分析和序列测定,用PUAP软件进行系统发育分析,构建最大简约树。结果表明:镰刀菌诱导结香前后,白木香内生真菌菌丝主要分布于海绵组织和韧皮部,结香后韧皮部内生真菌菌丝相对丰度明显增大;茎点霉是未结香白木香叶内生真菌优势种群,刺盘孢菌是已结香白木香叶内生真菌优势种群;刺盘孢菌是未结香和已结香白木香唯一共有内生真菌,且丰度差异较大。不依赖分离培养的分子生物学方法可快速直观地用于植物组织内生真菌的鉴定。白木香叶内生真菌具有一定的遗传多样性,沉香形成前后白木香内生真菌群落构成差异较大。
- 高晓霞周伟平王磊章卫民严寒静
- 关键词：白木香RDNA
- HPLC法测定西藏主产区冬虫夏草中尿苷和腺苷的含量被引量：5
- 2011年
- 目的建立HPLC法同时测定西藏产冬虫夏草中尿苷及腺苷的含量。方法采用Agilent EclipseXDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,检测波长260 nm,以甲醇-水为流动相梯度洗脱,流速1.0mL/min,柱温33℃。结果尿苷和腺苷分别在32.95～439.3μg/mL(r=0.999 9)和3.486～46.48μg/mL(r=0.999 9)范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.5%、95.6%,RSD值分别为1.8%和2.4%(n=6)。来自西藏的23批冬虫夏草中尿苷的含量在1.209～2.192 mg/g范围内,腺苷含量在0.083 8～0.884 mg/g范围内。结论本法简便、准确,重复性好,可快速测定冬虫夏草中尿苷和腺苷的含量,为控制西藏冬虫夏草的质量提供参考依据。
- 周伟平高晓霞代安国熊卫萍谢荣钟兆健章卫民
- 关键词：冬虫夏草尿苷腺苷HPLC法
