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谭洁

作品数：1 被引量：2H指数：1
供职机构：南方医科大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇选择素
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光素
  • 1篇荧光素酶
  • 1篇人细胞
  • 1篇黏附分子
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞黏附
  • 1篇基因
  • 1篇分子
  • 1篇报告基因
  • 1篇P选择素
  • 1篇表面黏附分子

机构

  • 1篇南方医科大学

作者

  • 1篇吴炜
  • 1篇赵明
  • 1篇周辉
  • 1篇刘玮璐
  • 1篇徐若霆
  • 1篇张文强
  • 1篇谭洁
  • 1篇刘鲜艳

传媒

  • 1篇南方医科大学...

年份

  • 1篇2016
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
人细胞表面黏附分子P选择素启动子报告基因的构建及鉴定被引量：2
2016年
目的构建人细胞表面黏附分子P选择素(p-selectin)基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-pselectin-promoter,检测其转录活性,并应用于筛选药物对其转录活性的影响。方法根据UCSC软件查找的人基因组DNA的p-selectin启动子序列并设计两端引物,扩增人基因组DNA中的p-selectin启动子。用限制性内切酶KpnⅠ和XhoⅠ双酶切质粒pGL3-Basic和p-selectin启动子后,将p-selectin基因启动子插入到pGL3-basic报告基因载体上。重组质粒命名为pGL3-pselectin-promoter。将其与内参质粒p RL-SV40瞬时共转染293F细胞,检测双荧光素酶活性。对不同启动子片段长度的p-selectin报告基因进行双荧光素酶的检测。以炎症因子和药物分组刺激转染了报告基因质粒的293F细胞并检测双荧光素酶活性。结果成功构建p-selectin基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-pselectin-promoter,质粒酶切及测序结果完全正确。瞬时共转染pGL3-pselectin-promoter/p RL-SV40组荧光素酶活性为0.8573±0.4703,高于转染pGL3-Basic/p RL-SV40组的荧光素酶活性值0.03955±0.05894。pGL3-1826 bp相比较于pGL3-1092 bp组和pGL3-3738 bp组具有最强的转录活性。炎症因子LPS和TNF-α和药物As2O3均具有上调pGL3-pselectin-promoter转录活性的作用。结论 pGL3-pselectin-promoter在293F细胞中能被转录激活,并验证了炎症因子对其转录表达的作用,并为药物筛选与评价提供解决方案。
徐若霆周辉刘玮璐吴炜刘鲜艳张文强谭洁赵明
关键词：P选择素荧光素酶
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