张文强
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 新疆紫草的化学成分及抗炎活性研究
- 背景与目的新疆紫草[Arnebia euchroma（Royle）Johnst]为紫草科（Boraginaceae）软紫草属植物。作为传统药用植物,其在民间被用于治疗烧伤、烫伤和细菌感染,具有悠久的历史。药理学研究表明新...
- 张文强
- 关键词：新疆紫草化学成分萘醌抗炎脂肪酸类气相色谱-质谱联用技术
- 表观遗传学调控Hippo信号通路在肾透明细胞癌中的研究
- 研究背景和目的肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)是最常见的肾癌类型,约占成人恶性肿瘤的2-3%。虽然局限性ccRCC的5年生存率为65%,但转移性ccRCC的5生存...
- 张文强
- 关键词：HIPPO
- 人细胞表面黏附分子P选择素启动子报告基因的构建及鉴定被引量：2
- 2016年
- 目的构建人细胞表面黏附分子P选择素(p-selectin)基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-pselectin-promoter,检测其转录活性,并应用于筛选药物对其转录活性的影响。方法根据UCSC软件查找的人基因组DNA的p-selectin启动子序列并设计两端引物,扩增人基因组DNA中的p-selectin启动子。用限制性内切酶KpnⅠ和XhoⅠ双酶切质粒pGL3-Basic和p-selectin启动子后,将p-selectin基因启动子插入到pGL3-basic报告基因载体上。重组质粒命名为pGL3-pselectin-promoter。将其与内参质粒p RL-SV40瞬时共转染293F细胞,检测双荧光素酶活性。对不同启动子片段长度的p-selectin报告基因进行双荧光素酶的检测。以炎症因子和药物分组刺激转染了报告基因质粒的293F细胞并检测双荧光素酶活性。结果成功构建p-selectin基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-pselectin-promoter,质粒酶切及测序结果完全正确。瞬时共转染pGL3-pselectin-promoter/p RL-SV40组荧光素酶活性为0.8573±0.4703,高于转染pGL3-Basic/p RL-SV40组的荧光素酶活性值0.03955±0.05894。pGL3-1826 bp相比较于pGL3-1092 bp组和pGL3-3738 bp组具有最强的转录活性。炎症因子LPS和TNF-α和药物As2O3均具有上调pGL3-pselectin-promoter转录活性的作用。结论 pGL3-pselectin-promoter在293F细胞中能被转录激活,并验证了炎症因子对其转录表达的作用,并为药物筛选与评价提供解决方案。
- 徐若霆周辉刘玮璐吴炜刘鲜艳张文强谭洁赵明
- 关键词：P选择素荧光素酶
