郎立伟
- 作品数:4 被引量:21H指数:3
- 供职机构:军事医学科学院毒物药物研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 双抗体夹心酶联免疫法检测不同样品中的蓖麻毒素被引量:6
- 2009年
- 目的应用酶联免疫吸附分析方法(ELISA)检测待测样品中的蓖麻毒素。方法用蛋白G亲和层析柱纯化蓖麻毒素单克隆抗体(4C13,3D74,5E4和5H6),以3D74及辣根过氧化物酶(HRP)标记的4C13建立的双抗体夹心ELISA对含有蓖麻毒素的多种样品进行检测。结果抗蓖麻毒素的单克隆抗体经亲和层析纯化后具有较高的蛋白纯度,应用HRP标记的4C13与3D74建立双抗体夹心ELISA,对于溶解于磷酸缓冲液中的蓖麻毒素标准品的检测灵敏度可达2.5μg·L-1;对于土壤、面粉、牛奶、咸菜汁、雪碧、可乐和腐乳汁中的蓖麻毒素样品检测的灵敏度为2.5~5.0μg·L-1;与磷酸缓冲液样品相比较,含有相同浓度蓖麻毒素的小鼠和人血清样品ELISA的阳性结果明显减弱。结论双抗体夹心酶联免疫法能够有效用于含有蓖麻毒素样品的检测分析。
- 郎立伟王玉霞王晨宇赵宇贾培媛傅风华
- 关键词:蓖麻毒素双抗体夹心酶联免疫吸附分析
- Western印迹法分析蓖麻毒素在正常小鼠血清和肝组织匀浆中的稳定性被引量:2
- 2010年
- 以重组蓖麻毒素A链(rRTA)免疫家兔,制备的抗rRTA兔血清效价高,能达到1∶51200.以兔多抗血清为检测抗体,建立蓖麻毒素的Western印迹检测法,对蓖麻毒素检测灵敏度可达1 ng.含有蓖麻毒素的小鼠血清和肝组织匀浆(蓖麻毒素终浓度为0.67μg/mL)在37℃孵育0~4 h后,应用此法体外观察蓖麻毒素在正常小鼠组织样品中的稳定性,结果显示Western印迹可用于组织中蓖麻毒素的测定,蓖麻毒素可在小鼠血清和肝组织匀浆中稳定存在.
- 郎立伟王晨宇王玉霞陆丽娜傅风华
- 关键词:蓖麻毒素WESTERN印迹免疫分析
- 蓖麻毒素检测方法研究进展被引量:6
- 2009年
- 蓖麻毒素是一种从蓖麻子中分离的核糖体失活蛋白,其含量高,易于纯化。作为蛋白合成抑制剂,它可以通过吸入、食入及静脉注射等方式致人中毒,已被列入《禁止化学和生物武器公约》控制清单1之中。对于这一潜在的生化战剂,快速、灵敏的检测方法是预防中毒发生和中毒后医学救治的重要手段。理想的蓖麻毒素检测方法应具有高灵敏性、高特异性,并可对多种样品进行快速分析。本文综述了近年来蓖麻毒素检测方法的研究进展。
- 郎立伟王玉霞
- 关键词:蓖麻毒素检测限
- 生物样品中蓖麻毒素的双夹心酶联免疫定量检测方法及应用被引量:11
- 2011年
- 目的建立定量检测生物样品中蓖麻毒素的双夹心ELISA方法并研究毒素在大鼠体内的分布。方法利用抗蓖麻毒素的单克隆抗体(MAb)3D74和辣根过氧化物酶(HRP)标记的小鼠抗蓖麻毒素单克隆抗体4C13,建立了定量检测血清和组织样品中蓖麻毒素的双夹心ELISA方法,并对方法学进行了必要的验证。结果建立的双抗夹心ELISA方法检测组织中蓖麻毒素的浓度范围为1.25~320 ng/ml,最低定量限为2.5 ng/ml,日内和日间精密度分别小于3.5%和9%。将该方法应用于蓖麻毒素组织分布的定量测定,结果显示,大鼠静脉染毒后毒素可以在心、肝、脾、肺、肾、肠和脂肪等组织分布,以脾脏的分布为最高,其次为肝脏,染毒后0.5和2 h脾与血清的比值分别为3.9和7.2。在脑和肌肉中未检出毒素。结论建立的双夹心ELISA方法简便、灵敏,可以用于定量检测血清和组织等生物样品中的毒素含量,为蓖麻毒素的毒物代谢动力学研究及毒素中毒的快速检测提供了技术支撑。
- 王晨宇郎立伟钟玉环王玉霞贾培媛武军华李桦
- 关键词:蓖麻毒素酶联免疫分析