刘权
- 作品数：10 被引量：29H指数：4
- 供职机构：广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西科技计划项目广西青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 自噬在乙二醇诱导的大鼠肾内晶体形成中的调控作用被引量：3
- 2019年
- 目的:探讨自噬在乙二醇诱导的大鼠肾内晶体形成中的调控作用。方法:健康雄性SPF级SD大鼠40只,分为正常对照组、结石模型组、N-乙酰半胱氨酸(NAC)处理组(0.75%乙二醇+NAC)、雷帕霉素处理组(0.75%乙二醇+雷帕霉素)和氯喹处理组(0.75%乙二醇+氯喹),每组8只。干预4周后,应用Western blot和免疫组化检测各组肾脏组织中自噬关键蛋白LC3-II的表达水平;透射电镜观察各组肾组织中自噬泡的数量;应用试剂盒检测各组24 h尿液中总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平;全自动生化仪检测各组血清肌酐及尿素氮的水平;ELISA法检测各组24 h尿液中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和肾损伤分子1(Kim-1)的水平。钙盐染色法观测各组肾脏晶体的沉积情况,评价肾组织的病理学变化。结果:与结石模型组相比,雷帕霉素处理组和氯喹处理组中LC3-II的表达水平和自噬泡数量均增加,而在NAC处理组中LC3-II的表达水平和自噬泡数量均减少(P<0.05)。与结石组相比,雷帕霉素处理组中T-SOD和GSH-Px水平降低,而氯喹处理组和NAC处理组中T-SOD和GSH-Px的活性增加(P<0.05)。与正常组相比,结石组中血清肌酐、尿素氮、NGAL和Kim-1的水平及肾脏内晶体沉积增加(P<0.05);在雷帕霉素处理组中肾脏损伤进一步加重,晶体沉积进一步增加,而在氯喹处理组和NAC处理组中肾脏损伤明显减轻,晶体的沉积明显减少。结论:乙二醇激活自噬后可以促进大鼠肾内晶体的形成。应用抗氧化剂和自噬抑制剂不仅可以降低肾脏内的自噬水平,还可以减轻肾脏损伤,减少晶体沉积,降低肾结石的形成率。
- 李德荣刘云龙王翔孙焱康珏宁刘权何子奇陶芝伟关晓峰邓耀良
- 关键词：自噬乙二醇草酸钙肾结石活性氧
- 高浓度草酸作用下HK-2细胞系中外泌体的提取与鉴定被引量：5
- 2017年
- 目的 探讨高浓度草酸作用下HK-2细胞系中外泌体提取与鉴定的方法.方法 2016年6月至2017年1月进行实验.配制含草酸浓度分别为0、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00、5.00、8.00、10.00mmoL/L的DMEM/F12无血清培养基,分别对HK-2细胞干预48 h,然后用CCK-8法检测不同浓度草酸对HK-2细胞生存率的影响.结合倒置显微镜下观察细胞的形态学变化,选择2.00 mmol/L的草酸作为实验浓度.用2.00 mmol/L草酸对HK-2细胞系干预48 h,收集干预后的HK-2细胞系的上清液,采用超速离心法提取外泌体;透射电镜观察外泌体的形态、大小;Nanosight系统检测外泌体的粒径与分布;蛋白质印迹法检测外泌体特异性蛋白HSP70、CD63的表达.结果 CCK-8法检测结果显示0、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00、5.00、8.00、10.00 mmol/L组细胞的生存率分别为（100.0±4.0）％、（97.7±1.5）％、（97.3±2.1）％、（87.7±2.1）％、（76.0±1.0）％、（58.1±2.6）％、（52.7±1.5）％、（37.7±3.2）％、（31.3±2.0）％.透射电镜下外泌体呈杯口状,包膜为典型的双层膜结构.Nanosight系统显示2.00mmoL/L组外泌体峰值粒径为56 nm,整体平均粒径为87 nm,粒径为30～150 nm的比例为91.2％.蛋白质印迹法检测结果显示外泌体中明显表达HSP70和CD63蛋白,提取外泌体后的HK-2细胞表达HSP70蛋白,不表达CD63蛋白.结论 2.00 mmol/L草酸作用HK-2细胞48 h后,可以通过超速离心法提取丰富的、较高纯度的外泌体,这将为后续深入研究高浓度草酸背景下外泌体的信号转导奠定基础.
- 何子奇关晓峰刘权刘云龙邓耀良
- 关键词：外泌体肾结石草酸
- 肾结石中晶体细胞反应的新贵：钙化性纳米微粒被引量：3
- 2018年
- 日前认为晶体-细胞反应中，肾脏炎性损伤在肾结石的形成中起到十分重要的作用，而近年来钙化性纳米微粒逐渐被认为是肾结石形成的启动因素之一，并成为研究热点。本文拟就肾结石晶体细胞炎性反应中钙化性纳米微粒充当的角色进行综述。
- 吴基华刘权邓耀良
- 关键词：肾结石炎性反应
- 羟基磷灰石诱导巨噬细胞炎性反应及凋亡被引量：1
- 2017年
- 目的观察羟基磷灰石（HAP）对巨噬细胞炎性反应及凋亡的影响。方法将HAP用无血清1640培养基稀释至50、100、200、400 μg/ml，空白对照组为0 μg/ml，分别加入巨噬细胞中，采用细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测细胞活力，微量酶标仪法检测细胞上清液的乳酸脱氢酶（LDH）活性，实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）法检测细胞肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-1β mRNA相对表达量，流式细胞术检测凋亡率，荧光酶标仪法测线粒体膜电位，Western blot检测细胞B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）、活化半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Cleave Caspase-3）的表达。结果巨噬细胞暴露于不同浓度HAP下，与空白对照组比较，细胞活力逐渐降低，LDH活性逐渐升高，HAP浓度为400 μg/ml最显著（P＝0.000、P＝0.001）。TNF-α、IL-1β mRNA相对表达量均逐渐上升[（1.49±0.07、1.77±0.12、1.92±0.53、2.20±0.49）、（1.51±0.06、2.70±0.17、3.19±0.12、4.32±0.59）]，HAP浓度为400 μg/ml最显著（P＝0.000、P＝0.000）。凋亡率逐渐增加[（3.68±1.16）%、（4.69±1.61）%、（8.14±1.08）%、（15.20±0.88）%、（22.90±0.99）%]，线粒体膜电位荧光强度逐渐下降，bcl-2蛋白的表达逐渐降低，Cleave Caspase-3蛋白表达逐渐增加，HAP浓度为400 μg/ml时均最显著（P＝0.000）。结论HAP可诱导巨噬细胞经线粒体途径凋亡并上调炎症基因TNF-α、IL-1β mRNA的表达。
- 刘权陶芝伟关晓峰吴基华刘云龙何子奇邓耀良
- 关键词：羟基磷灰石巨噬细胞脱噬作用炎性反应肾结石
- 3D模型打印联合机器人辅助腹腔镜行肾窦内肾盂切开取石术治疗鹿角形肾结石的初步临床研究(附3例报告)被引量：6
- 2018年
- 目的:探讨3D模型打印联合机器人辅助腹腔镜行肾窦内肾盂切开取石术治疗鹿角形肾结石的可行性和安全性。方法:回顾性分析2016年11月~2017年10月收治的3例鹿角形肾结石患者的临床资料,3例患者均在术前进行3D模型打印,并结合模型设计手术方案,然后行机器人辅助腹腔镜肾窦内肾盂切开取石术。结果:3例患者均顺利完成手术,无明显并发症发生。手术时间125~260min;术中出血量30~80ml;术后引流量60~120ml;术后引流时间2~4d;术后住院时间5~8d。复查泌尿系平片有1例患者肾上盏结石残留,结石直径约为1cm,术后1个月行输尿管软镜碎石术治愈。结论:3D模型打印联合机器人辅助腹腔镜行肾窦内肾盂切开取石术治疗鹿角形肾结石安全可行,可以作为经皮肾镜取石术(PCNL)的有益补充。
- 关晓峰王翔陶芝伟梁伟霞刘权顾能玉金宏邓耀良
- 关键词：鹿角形肾结石3D打印肾窦内肾盂切开取石术
- M2型巨噬细胞对草酸钙晶体刺激肾小管上皮细胞损伤的影响被引量：1
- 2018年
- 目的探讨M2型巨噬细胞对草酸钙晶体(CaOx)刺激肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的影响。方法将人单核细胞(THP-1)经佛波酯(PMA)及白细胞介素(IL)-4、IL-13序贯诱导为M2型巨噬细胞,使用实时定量PCR、Western Blot、ELISA法检测其表型标志物,以鉴定诱导分化情况。用浓度为0.5 mg/m L的CaOx刺激HK-2细胞,利用Transwell建立M2型巨噬细胞(上室)与HK-2细胞(下室)共培养模型,实验分组为HK-2细胞组、HK-2细胞+M2型巨噬细胞共培养组、HK-2细胞+CaOx组、HK-2细胞+CaOx+M2型巨噬细胞共培养组。使用CCK-8法检测各组HK-2细胞活力、微量酶标仪法测各组HK-2细胞上清液的乳酸脱氢酶(LDH)活性、DAPI进行凋亡染色和Western Blot检测各组HK-2细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况。划痕实验观测M2型巨噬细胞对HK-2细胞的迁移、修复的影响。结果表型标志物鉴定结果显示,成功将THP-1细胞序贯诱导为M2型巨噬细胞。CCK-8法结果显示M2型巨噬细胞显著增加CaOx对HK-2细胞损伤后的活力,且M2型巨噬细胞对HK-2细胞增殖具有促进作用(P<0.05)。LDH活性检测结果显示M2型巨噬细胞显著性降低CaOx刺激HK-2细胞的LDH活性(P<0.05)。DAPI染色及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达结果显示M2型巨噬细胞具有抑制CaOx刺激HK-2细胞凋亡的作用。划痕实验显示M2型巨噬细胞对HK-2细胞具有促进迁移、修复的作用。结论 M2型巨噬细胞对CaOx刺激HK-2细胞的损伤具有一定的抑制作用,且可促进HK-2细胞增殖、迁移。
- 刘权关晓峰陶芝伟王翔吴基华刘云龙何子奇邓耀良
- 关键词：M2型巨噬细胞草酸钙晶体肾小管上皮细胞
- 阿托伐他汀对草酸钙晶体诱导的细胞炎症反应的影响及其机制探讨被引量：5
- 2019年
- 目的探讨阿托伐他汀(Atorvastatin,ATV)对草酸钙晶体诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)炎症反应的影响及其作用机制。方法取HK-2细胞分为对照组(正常培养基培养)、ATV组(40μmol/LATV预处理3h后换成正常培养基)、草酸钙晶体刺激组(含4mmol/L草酸钙晶体的培养基)和ATV干预组(40μmol/LATV预处理3h后,换成含4mmol/L草酸钙晶体的培养基)。培养12h后收集细胞,采用免疫组化染色检查和蛋白质印迹法检测Nod样受体蛋白3(NLRP3)和Cleavedcaspase-1的表达水平;采用免疫荧光染色法和蛋白质印迹法检测NF-κB的表达水平;收集细胞培养上清液,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测白细胞介素(IL)-1β和IL-18的浓度。结果蛋白质印迹法检测结果显示,ATV组较对照组NLRP3(0.125±0.013与0.135±0.007)和Cleaved caspase-1(0.090±0.014与0.095±0.006)的相对表达量有所减少,但差异均无统计学意义(P>0.05);草酸钙晶体刺激组较对照组NLRP3(0.315±0.021与0.135±0.007,P<0.001)和Cleavedcaspase-1(0.235±0.008与0.095±0.006,P<0.001)的相对表达量明显增多;ATV干预组较草酸钙晶体刺激组NLRP3(0.245±0.007与0.315±0.021,P<0.05)和Cleavedcaspase-1(0.170±0.017与0.235±0.008,P<0.05)的相对表达量明显下降。免疫组化染色检查结果显示各组的NLRP3和Cleavedcaspase-1表达趋势与蛋白质印迹法检测结果一致。ELISA结果显示,ATV组较对照组细胞培养液中炎症因子IL-1β[(162.00±21.21)pg/ml与(183.50±7.78)pg/ml,P>0.05]和IL-18[(176.50±24.12)pg/ml与(182.50±20.51)pg/ml,P>0.05]浓度有所减低,但差异无统计学意义;草酸钙晶体刺激组较对照组细胞培养液中炎症因子IL-1β[(850.50±48.79)pg/ml与(183.50±7.78)pg/ml,P<0.001]和IL-18[(526.00±39.61)pg/ml与(182.50±20.51)pg/ml,P<0.001]浓度显著增高;ATV干预组较草酸钙晶体刺激组细胞培养液中炎症因子IL-1β[(452.50±36.06)pg/ml与(850.50±48.79)pg/ml,P<0.01]和IL-18[(403.50±23.33)pg/ml与(526.00±39.61)pg/ml,P<0.05]
- 孙焱陶芝伟康珏宁刘权王翔龙诗彬李德荣邓耀良
- 关键词：炎症细胞因子阿托伐他汀草酸钙晶体人肾小管上皮细胞
- 羟基磷灰石对人肾小管上皮细胞骨桥蛋白表达的影响及机制探讨被引量：4
- 2017年
- 目的观察羟基磷灰石(HAP)对人肾小管上皮细胞株HK-2细胞骨桥蛋白(OPN)表达的影响,探讨HAP在肾结石形成中的作用机制。方法体外培养HK-2细胞,分为正常对照组、HAP1组、HAP2组、HAP3组及HAP4组。正常对照组在正常培养液中培养,HAP1~4组分别在正常培养液中加入200、400、600、800 ng/m L的HAP悬液。各组培养至12、24、48、72 h时,采用CCK-8法检测细胞活力。培养至24 h时,采用RT-q PCR法检测各组细胞中OPN mRNA的表达,采用Western blot法检测各组细胞中OPN蛋白的表达。结果随着HAP浓度增加,细胞存活率逐渐降低,细胞存活率与HAP的浓度呈负相关(r=-0.566 3,P<0.01)。随着HAP作用时间延长,细胞存活率逐渐降低,细胞存活率与HAP作用时间呈负相关(r=-0.796 3,P<0.01)。正常对照组、HAP1组、HAP2组、HAP3组、HAP4组OPN mRNA相对表达量分别为1.151±0.029、1.201±0.004、1.269±0.029、1.179±0.022、1.406±0.058,HAP2组、HAP4组OPN mRNA相对表达量均高于正常对照组(P均<0.05)。正常对照组、HAP1组、HAP2组、HAP3组、HAP4组OPN蛋白相对表达量分别为0.418±0.010、0.436±0.016、0.512±0.021、0.562±0.016、0.627±0.023,HAP2、HAP3、HAP4组OPN蛋白相对表达量均高于正常对照组(P均<0.05)。结论 HAP可使人肾小管上皮细胞出现损伤并上调OPN表达,可能是其参与肾结石形成的机制之一。
- 余骏川邓耀良黎承杨陶芝伟关晓峰吴基华宁鑫刘云龙何子奇刘权
- 关键词：羟基磷灰石骨桥蛋白肾小管上皮细胞细胞损伤
- 肾及肾上腺肿瘤高仿真3D打印模型在泌尿外科住院医师规范化培训教学中的应用效果
- 2024年
- 目的探讨肾及肾上腺肿瘤高仿真3D打印模型在泌尿外科住院医师规范化培训教学中的应用效果。方法将40名参加泌尿外科住院医师规范化培训的医师随机分为试验组和对照组,每组20名。收集肾及肾上腺肿瘤的CT影像资料,打印成高仿真3D模型。给予对照组传统教学,给予试验组传统教学联合高仿真3D打印模型教学。教学结束后,比较两组医师的理论知识考核成绩和对教学方法的评价。结果试验组医师的理论知识考核成绩,以及学习兴趣、解剖认识、知识记忆、医患沟通、临床思维、教学满意度条目得分高于对照组(P<0.05)。结论高仿真3D打印模型可以直观展示肾及肾上腺肿瘤的立体解剖结构,有助于加深医师对相关知识的理解、记忆,提高教学质量,是一种有效的教学方法。
- 关晓峰刘权王翔韦光立李继杨顾能钰邓耀良
- 关键词：肾肿瘤肾上腺肿瘤癌栓住院医师规范化培训
