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迟健
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
北京蛋白质组研究中心
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发文基金:
国家重点基础研究发展计划
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相关领域:
生物学
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合作作者
柳刚
北京蛋白质组研究中心
姜俊义
北京蛋白质组研究中心
李晓玲
北京蛋白质组研究中心
刘莹
北京蛋白质组研究中心
孙龙钦
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2014
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S100A9蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定
被引量:3
2014年
目的制备S100A9重组蛋白及其单克隆抗体(mAb),并对抗体进行特异性鉴定。方法以成人肝cDNA表达文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-S100A9和pET-32a-S100A9。融合蛋白在大肠杆菌中表达,纯化后以His-S100A9作为免疫原制备鼠mAb。采用ELISA和Western blot法鉴定筛选抗体。挑取杂交瘤细胞株制备腹水并纯化,采用Western blot法和间接免疫荧光染色鉴定mAb的特异性。结果 GST-S100A9和His-S100A9融合蛋白均成功构建表达。共筛选到抗S100A9杂交瘤细胞18株,其中15株在Western blot检测中与重组蛋白呈强阳性反应,3株呈弱阳性反应。2株可识别肝癌组织间隙液中的S100A9天然蛋白。结论成功地制备出多株抗S100A9的mAb。
刘洋洋
李晓玲
左威
迟健
柳刚
孙龙钦
姜俊义
刘莹
关键词:
S100A9
单克隆抗体
杂交瘤
细胞融合
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