刘莹 作品数:70 被引量:59 H指数:4 供职机构: 哈尔滨医科大学 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 金属学及工艺 更多>>
二芳基哌嗪类化合物及其医药用途 本发明涉及通式I所表示的二芳基哌嗪类化合物,其溶剂合物、立体异构体或其可药用盐,含有它们的药用组合物,以及所述化合物用于制备预防或治疗手术后疼痛、偏头痛、内脏痛、神经性疼痛等各种疼痛以及由阿片类等镇痛药物引起的成瘾性和耐... 恽榴红 董国兴 张树卓 张城 吴宁 王好山 庞冲 陈瑛 王勃 刘莹 刘晓燕 苏瑞斌 杨日芳 郑建全 李锦文献传递 醛脱氢酶8A1融合蛋白的表达及其多克隆抗体的制备与鉴定 被引量:1 2008年 目的:重组表达醛脱氢酶8A1(aldehyde dehydrogenase 8 family member A1,ALDH8A1)蛋白,制备其多克隆抗体,并进行抗体的特异性鉴定,以及蛋白在组织和细胞内的定位。方法:以成人肝cDNA文库为模板,PCR扩增ALDH8A1目的片段,并构建重组表达载体pGEX-4T-1-ALDH8A1和pET-32a-ALDH8A1,经测序鉴定插入载体的DNA片段序列正确后,转化大肠杆菌BL21,诱导表达GST-ALDH8A1和His-AL-DH8A1融合蛋白。经Western blot确定其为目的蛋白后,纯化重组融合蛋白,并以GST-ALDH8A1免疫家兔制备抗人AL-DH8A1多克隆抗体。用His-ALDH8A1包板,ELISA法测定兔抗人ALDH8A1血清效价;Western blot鉴定兔抗人ALDH8A1血清在重组蛋白和天然蛋白中的反应特异性;免疫组化法确定ALDH8A1蛋白在组织和细胞中的定位。结果:成功构建重组表达载体pGEX-4T-1-ALDH8A1和pET-32a-ALDH8A1;获得包涵体形式表达的GST-ALDH8A1和可溶性形式表达的His-ALDH8A1融合蛋白;应用纯化的重组蛋白GST-AL-DH8A1免疫家兔,获得兔抗人ALDH8A1血清,ELISA测定抗血清的效价为1∶256000。Western blot结果显示,制备的AL-DH8A1兔多抗可特异地识别成人肝总蛋白以及293T、A549、HeLa、U937、HepG2细胞总蛋白中一个相对分子质量(Mr)约53000的ALDH8A1天然蛋白,与文献报道的ALDH8A1的Mr一致,表明ALDH8A1在正常肝组织与癌细胞中都有表达。免疫组化结果表明ALDH8A1蛋白定位于人肝癌细胞胞质中。结论:成功制备出兔抗人ALDH8A1多克隆抗体,此抗体可应用于ELISA,Western blot和免疫组化检测,为进一步研究ALDH8A1的功能奠定了基础。 刘佳莹 李淑珍 李晓玲 刘莹 柳晓兰 高建恩 仲飞 孙启鸿关键词:重组蛋白 多克隆抗体 咪唑啉受体候选蛋白(IRAS)剪接体的确证与功能研究 咪唑啉受体(Imidazoline Receptor,IR)是一种新型受体.I1R亚型存体内具有重要的生理作用.如血压调节,胰岛素分泌等,其内源性配体胍丁胺在阿片依赖中的作用也逐渐受到重视。Piletz通过两种IR蛋白抗... 王勃 刘莹 从玉文 李锦关键词:咪唑啉受体 剪接体 文献传递 以眩晕起病的后循环梗死56例临床分析 被引量:4 2013年 目的探讨以眩晕起病的后循环梗死患者临床特点,提高对后循环缺血的识别。方法回顾性分析56例以眩晕起病的后循环梗死患者的危险因素、临床表现、颅脑MRI表现和预后。结果本组60岁以上患者45例(80.2%),合并脑血管病常见危险因素51例(91.1%);主要体征为眼震、视力障碍、共济失调、轻偏瘫、面瘫、言语障碍及感觉障碍等;MRI示急性期病灶位于脑干和小脑;预后大多预后良好,而大面积小脑梗死病死率较高。结论对于60岁以上以眩晕为主诉患者,尤其合并脑血管病危险因素的男性患者是后循环缺血的高发人群。 乔红 张雷 钟平 汪国胜 刘莹关键词:眩晕 后循环缺血 3-(1-芳基哌啶-4-基)-2-芳基噻唑啉-4-酮类化合物、其制备方法及用途 本发明属于医药化工领域,涉及3‑(1‑芳基哌啶‑4‑基)‑2‑芳基噻唑啉‑4‑酮类化合物、其可药用盐、其制备方法及用途。具体地,本发明涉及式I所示的化合物或其可药用盐。本发明的化合物或其可药用盐具有明显的N型钙离子通道阻... 恽榴红 董国兴 张树卓 张城 吴宁 王好山 庞冲 陈瑛 王勃 刘莹 刘晓燕 苏瑞斌 杨日芳 郑建全 李锦文献传递 血红蛋白A2单克隆抗体的制备与鉴定 2007年 本研究目的是制备鼠抗人血红蛋白A2(HBA2)单克隆抗体(McAb)并进行初步鉴定。将正常人胎肝组织匀浆离心并分离出人胎肝核总蛋白,用人胎肝核总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,并通过间接ELISA法、Western blot及免疫组织化学的方法对单克隆抗体进行特异性鉴定,通过免疫沉淀和Uni-ZAPXR表达文库筛选鉴定抗原。结果表明:通过间接ELISA筛选获得分泌AEE091抗体的杂交瘤细胞1株,其分泌的单克隆抗体Ig亚类(型)为IgG1(κ);Western blot结果显示,该抗体识别分子量为15kD的蛋白;Western blot识别AEE091免疫沉淀获得的分子量为15kD的抗原;同时应用单克隆抗体AEE091对人肝脏cDNA表达文库(Uni-ZAPXR)进行筛选,筛选所获得的阳性噬菌斑测序结果显示两个阳性克隆插入序列均为HBA2。结论:经筛选获得了分泌AEE091抗体的杂交瘤细胞株。AEE091抗体能特异识别HBA2抗原,因而其在HBA2的功能研究和珠蛋白生成障碍性贫血筛查等方面具有应用价值。 陈志成 杨金菊 刘蓉 曲海霞 王婉 刘莉 柳晓兰 陈勇 刘莹 高建恩 孙启鸿关键词:血红蛋白A2 单克隆抗体 CDNA表达文库 地中海贫血 胍丁胺-咪唑啉受体系统对阿片功能系统调节的新发现 李锦 苏瑞斌 吴宁 李昕 路新强 魏晓莉 刘茵 李斐 王晓菲 刘莹 李松 为研究胍丁胺-咪唑啉受体作用系统对阿片功能的调节作用及机制,首次对胍丁胺的阿片功能调节作用进行了系统研究,发现外源性和内源性胍丁胺对阿片功能有显著调节作用;首次构建了稳定表达I1咪唑啉受体候选蛋白IRAS以及共同稳定表达...关键词:关键词:胍丁胺 咪唑啉受体 Clusterin抗原的表达、抗体制备及其初步鉴定 被引量:1 2008年 目的:制备Clusterin(CLU)多克隆和单克隆抗体(mAb),并进行特性鉴定。方法:以成人肝cDNA表达文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-CLU和PET-32a-CLU。GST-CLU融合蛋白在大肠杆菌中表达,被作为免疫原制备兔多抗和鼠mAb。采用ELISA法和Western blot鉴定抗CLU抗血清在重组蛋白和天然蛋白中的特异性。采用West-ern blot,间接免疫荧光,免疫组化鉴定mAb的特异性。结果:GST-CLU融合蛋白在相对分子质量(Mr)约54 000处呈现明显表达条带。Western blot鉴定表明,制备的抗CLU兔多克隆抗体可特异地识别成人肝总蛋白中Mr约52 000和58 000的CLU蛋白。获得9株可稳定分泌抗CLU的杂交瘤细胞株可识别重组人CLU蛋白,其中有2株可特异性结合HepG2细胞质中的蛋白,4株可特异性结合成人肝脏组织肝细胞质中的蛋白。结论:成功地制备出兔抗人CLU抗血清和9株抗CLU的mAb,为进一步研究CLU在肿瘤中的功能奠定了实验基础。 张迎春 刘莹 杨金菊 柳晓兰 迟俊 高建恩 唐晓波 朱大岭 孙启鸿关键词:CLUSTERIN 原核表达 多克隆抗体 单克隆抗体 烟碱样胆碱能受体(N-AChR)的分离提纯以及在药理毒理研究中的应用 2005年 本文报告了从丁氏双鳍电鳐电器官中分离纯化N—AChR,研究其生化性质,并在毒物、药物、实验性重症肌无力(EAMG)等方面进行了研究。一、N—AChR的分离提纯:N—AChR膜片可用于研究天然状态下受体性质和功能。我们用几次蔗糖密度连续梯度和不连续梯度离心分离,得到的受体膜片无活性胆碱酯酶,比活性达5nmol α-神经毒素结合点/mg蛋白。采用眼镜蛇α-神经毒素为配基制成的亲和层析柱,提纯了N—AChR蛋白,达到了等电聚焦纯,等电点为5.2。发现PAGE出现两条带, 池木根 刘莹 王玉霞关键词:分离提纯 毒理研究 ACHR 药理 生化性质 重症肌无力 Ras相关C3肉毒毒素底物1(Rac1)多克隆抗体的制备及应用 被引量:1 2015年 目的制备抗Ras相关C3肉毒毒素底物1(Rac1)兔多克隆抗体并进行初步应用。方法以人宫颈癌细胞系He La细胞c DNA为模板,构建重组表达质粒p ET-32a-Rac1。His-Rac1融合蛋白在大肠杆菌中成功表达,将纯化后的融合蛋白作为免疫原免疫家兔制备兔多克隆抗体。分别采用ELISA、Western blot法和免疫组织化学技术对抗Rac1抗血清的效价及特异性进行鉴定。结果 His-Rac1融合蛋白成功构建并高效表达。制备的抗Rac1兔多克隆抗体可以检测到He La细胞、MCF-7细胞的Rac1蛋白,并能识别人肾组织中的Rac1蛋白。结论成功制备了兔抗人Rac1多克隆抗体,该抗体可以识别多种天然样本中的Rac1蛋白。 张莉莉 郝露 左威 马维佳 刘莹关键词:RAC1 原核表达 多克隆抗体