卢春晓 作品数:4 被引量:12 H指数:3 供职机构: 即墨市畜牧兽医局 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 青岛市公共领域科技支撑计划项目 现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
2007年~2010年H9N2亚型禽流感病毒分离株对SPF鸡的致病特性研究 被引量:5 2013年 本研究对2007年~2010年我国H9N2亚型禽流感病毒分离株的鸡胚平均死亡时间(MDT)进行分析,发现自2008年下半年来分离的H9N2亚型禽流感病毒对鸡胚的致病性有增强的趋势,在此基础上,选择MDT在60.5~96.3h之间的9株病毒,比较其对SPF鸡的致病力。结果表明,对鸡胚致病性强的毒株,对SPF鸡的致病性也较强,能引起气管、肺、十二指肠、肾和脑等多器官的系统性感染,而且病毒在各组织器官的复制能力与致病性呈正相关。在感染SPF鸡后,所有毒株均呈现不同程度的排毒,而致病力较强毒株的感染组,排毒的比例更高,排毒时间也更长。这些数据表明,H9N2病毒在进化过程中,致病力发生了一定的变化,新近出现了一些对鸡致病力增强的毒株,这提示我们必须重视对H9N2病毒进化和变异的监测,加强对H9N2病毒的防控。 王守春 张毅 卢春晓 王晓红 徐守振 王建琳 李海英 周顺 王光 郭妍妍 毕玉海 尹燕博关键词:H9N2亚型禽流感 SPF鸡 H9N2亚型禽流感病毒辽宁分离株HA1蛋白的原核表达 被引量:4 2013年 为表达H9N2亚型禽流感病毒的HA1蛋白,从H9N2亚型禽流感病毒辽宁分离株中扩增其HA1基因片段,将扩增得到的HA1基因克隆至原核表达载体pGEX-6p-1中,转化到BL21(DE3)中进行表达。结果表明,IPTG诱导融合蛋白表达条件确定最佳诱导时间为8h,IPTG最佳终浓度为0.8mmol/L。经SDS-PAGE和Western blot分析鉴定,表达产物的分子质量约为61ku。 陈欣 张乐萃 卢春晓 尹燕博关键词:H9N2亚型禽流感病毒 疫苗 大肠埃希菌 H9N2亚型禽流感病毒三重RT-PCR诊断技术的建立与应用 2014年 为建立H9N2亚型禽流感病毒三重RT-PCR诊断技术,参考Gen Bank登录的H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的HA、NA、M基因序列,利用Primer Premier5.0软件设计3对可扩增HA、NA、M基因的特异性引物以及反转录引物。3对引物扩增的c DNA片段大小分别为1 742、1 410、1 027 bp。结果:通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,建立了H9N2亚型禽流感病毒三重RT-PCR诊断技术,与目的片段大小相符的片段,经测序均正确,且与其他常见禽病病原不存在交叉反应。该方法对HA基因的最低检出量为10-2μg/μL c DNA,对NA基因的最低检出量为10-2μg/μL c DNA,对M基因的最低检出量为10-3μg/μL c DNA。通过对30份H9N2阳性病毒液进行三重PCR,均可同时扩出HA、NA、M基因。结果表明,本试验建立了H9N2亚型禽流感病毒三重RT-PCR诊断技术,为提高H9N2亚型禽流感病毒HA、NA、M基因序列分析的效率奠定基础。 陈欣 尹燕博 张乐萃 卢春晓关键词:H9N2亚型禽流感 HA基因 NA基因 M基因 2008年~2012年山东胶东鸡场NDVIBVAIV(H9)感染情况调查 被引量:3 2013年 为了解2008年1月~2012年6月山东胶东青岛、潍坊和烟台三地区新城疫病毒(NDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)和H9亚型禽流感病毒(AIV(H9))的感染情况,采用RT—PCR对送检的5001份患有呼吸道症状的病料进行了检测。结果显示,3地区3种病毒的总阳性率为48.49%,其中AIV(H9)感染率最高,为26.15%。青岛地区NDV和IBV的阳性率均最高,分别为15.94%和11.63%,潍坊地区AIV(H9)阳性率最高(29.23%)。4年半间AIV(Hg)感染下降明显,但NDV近3年感染明显抬头。寒冷月份3种病毒感染较高,3月份NDV和AIV(H9)阳性率均最高,分别为21.07%和38.17%;10月份1BV阳性率最高为15.40%。3种病毒混合感染阳性率为6.66oA,以NDV+AIV(H9)二重感染最常见(2.98%),NDV+IBV+AIV(H9)三重感染为0.40%。结果表明,山东胶东地区NDV、IBV和AIV(Hg)的感染情况较普遍,存在一定程度的混合感染,为有效防控山东省规模鸡场该3种主要疾病提供了依据。 徐守振 郭妍妍 卢春晓 韩丽敏 尹燕博关键词:RT-PCR