高博
- 作品数：3 被引量：14H指数：2
- 供职机构：西南民族大学生命科学与技术学院更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 家兔GAPDH基因实时荧光定量RT-PCR方法的建立被引量：9
- 2010年
- 根据GenBank登录的家兔GAPDH基因保守区域CDS序列设计1对引物,通过反应体系及反应条件优化,成功建立了检测家兔GAPDH基因的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法。结果表明,该方法检测GAPDH的最低拷贝数为32拷贝/μL,在较广的范围内（3.2×10^1-3.2×10^7拷贝/μL）有良好的线性关系（r=0.999）;熔解曲线分析显示扩增产物的特异性单峰,其Tm为（87±0.2）℃;5个不同浓度标准品组内试验变异系数为1.67%4.73%,组间试验变异系数为2.66%8.74%。该方法具有快速、灵敏、高通量及可重复性强等优点,为GAPDH基因作为内参基因进行家兔功能基因与病原基因表达的定量分析提供了方法学基础。
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- 关键词：家兔实时荧光定量RT-PCR内参基因
- 快速检测猪瘟兔化弱毒疫苗株的TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立被引量：3
- 2009年
- 在猪瘟病毒兔化弱毒疫苗株(HCLV)的5′端非编码区设计一对引物和一条TaqMan探针,通过优化反应条件,成功建立了特异性检测HCLV的荧光定量RT-PCR方法.结果表明:该方法检测的最低拷贝数为45拷贝/μL,灵敏度比普通PCR方法高104倍,在较广的范围内(4.5×101～4.5×106拷贝/μL)有良好的线性关系(r=0.994);分别以乙型脑炎病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、副猪嗜血杆菌、牛病毒性腹泻/黏膜病病毒作为模板进行TaqManRT-PCR扩增,未出现阳性信号;4个不同浓度标准品组内试验变异系数为1.90%～5.82%,组间试验变异系数为4.02%～5.69%;HCLV3个cDNA样本组内试验变异系数为3.72%～4.93%;组间试验变异系数为2.99%～4.02%.该方法具有很好的灵敏性、特异性及稳定性,能够快速准确定量检测HCLV,为HCLV疫苗的研制、猪瘟病毒分子生物学等方面研究提供了一种快捷有效的工具.
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- 关键词：荧光定量RT-PCR
- 鸡传染性贫血病毒的分子生物学研究进展被引量：2
- 2009年
- 鸡传染性贫血病毒(CAV)为圆环病毒科、圆环病毒属,其核酸结构为环状单股DNA、衣壳呈二十面体对称,无囊膜。本文介绍了CAV基因组结构、基因组复制与转录、结构蛋白与功能,以及对该病防治的研究进展,并就该病毒的分子生物学研究前景做了分析。
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- 关键词：鸡传染性贫血病毒分子生物学免疫抑制
