魏婷
- 作品数：3 被引量：3H指数：2
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 甲状腺素促进miPS细胞向心肌细胞分化的非基因机制的作用
- 2016年
- 目的探讨三碘甲腺原氨酸(thyroxine,T3)在诱导小鼠诱导多能干细胞(mi PSC)向心肌细胞分化过程中非基因的机制作用。方法培养Oct4-GFP+mi PS细胞,利用悬滴培养形成拟胚体(embryoid body,EB)的方法诱导mi PSC向心肌细胞分化,在诱导过程中分别添加甲状腺素T3和甲状腺素类似物三碘甲腺乙酸(triiodothyroacetic acid,Triac)。实验共分对照组、T3处理组、T3+Triac处理组。分别在诱导分化第4、6和12天,在倒置显微镜下观察细胞的分化情况,采用免疫荧光染色法检测分化第12天心肌细胞特异性结构蛋白α-actinin及肌钙蛋白(cardiac troponin,c Tn)T的表达,Western blot法检测c Tn T和p-JNK/JNK的表达情况。结果诱导分化第4、6和12天,T3处理组跳动EB数量明显多于对照组和T3+Triac组(P<0.05);免疫荧光染色显示T3处理组的α-actinin和c Tn T表达量较对照组和T3+Triac组明显增强(P<0.05);Western blot结果表明T3显著提高c Tn T的表达量(P<0.05);细胞内信号分子JNK蛋白的磷酸化水平明显大于对照组和T3+Triac组(P<0.05)。结论甲状腺素通过的非基因机制促进mi PS细胞向心肌细胞分化,这种作用机制可能跟JNK信号通路有关。
- 燕松欧东波赵佩李晓莉魏婷陈焱郑强荪
- 关键词：甲状腺素JNK
- Integrin β_1在维生素C诱导小鼠诱导性多能干细胞向心肌样细胞分化中的作用被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨整联蛋白β1(Integrinβ1)在维生素C(Vc)诱导小鼠诱导性多能干细胞(induced pluripotent stemcells,iPSCs)向心肌样细胞(cardiomyocytes,CMs)分化中的作用。方法:在立式显微镜下,分别摘取胚胎(12.5 d、14.5 d及16.5 d)BALB/c胎鼠、新生(出生1 d,P1)和成年BALB/c小鼠的心脏,提取总RNA,半定量及实时定量PCR分析心脏发育不同时期Integrinβ1的表达。利用悬滴培养形成拟胚体(embryoid body,EB)的方法体外诱导iPSCs向心肌样细胞分化,诱导过程中分别添加Vc和integrinβ1抑制剂(HMβ1-1)处理,共分为3组:对照组、Vc处理组和Vc+HMβ1-1处理组。诱导分化的第3、5、7天,半定量及实时定量PCR检测Oct4、integrinβ1和心肌特异性因子(α-MHC、MLC2a)。用免疫荧光染色法检测心肌特异性结构蛋白心肌肌钙蛋白I(cTnI)的表达。结果:Inte-grinβ1在心脏胚胎发育时期(E12.5、E14.5、E16.5、P1)的表达递增(P<0.01),成年期表达有所回落(P<0.01)。半定量及实时定量PCR的结果提示,Vc组α-MHC、MLC2a的表达显著高于对照组(P<0.01),加integrinβ1抑制剂HMβ1-1后表达量降低(P<0.01)。跳动EBs计数的结果提示,诱导分化第10、14、18、22、26天,Vc组跳动EBs的百分率显著高于对照组(P<0.01);而Vc+HMβ1-1组跳动EBs的百分率相对于Vc组显著降低(P<0.01)。免疫荧光染色显示,Vc组有较强的cTnI表达,添加integrinβ1抑制后,Vc+HMβ1-1组cTnI的表达明显减弱。结论:Vc可促进iPSCs向心肌细胞分化,其机制可能是通过integrinβ1介导。
- 魏婷曾迪欧东波丁璐李雪郑强荪
- 关键词：诱导性多能干细胞小鼠
- microRNA-1和microRNA-133参与小鼠诱导多能干细胞向心肌的分化被引量：2
- 2015年
- 目的研究microRNA-1(miRNA-1)和microRNA-133(miRNA-133)对小鼠诱导多能干细胞(mi PSCs)向心肌分化的影响。方法 RT-PCR分析mi PSC分化过程中microRNA-1和microRNA-133的表达变化;microRNA-1和micro-133反义寡核苷酸转染mi PSCs,增强miRNA-1和miRNA-133表达;并按照转染分子的不同,将细胞分为对照组(添加miRNA-U6)、miRNA-1组、miRNA-133组和miRNA-1+miRNA-133组。RT-PCR、q-PCR和免疫荧光化学染色检测miRNA转染并诱导mi PSCs分化后,各组细胞内miRNA-1和miRNA-133的表达变化以及心肌细胞相关特异性基因和蛋白的变化。结果 mi PSCs心肌分化过程中miRNA-1,miRNA-133的表达具有差异性,均在后期有显著增高(P<0.01);在分化过程中单独过表达miRNA-1和miRNA-133对心肌的分化并未有促进作用,但共表达miRNA-1和miRNA-133后,却显著增加心肌细胞的搏动数量和心肌基因的表达,并且促进了心肌细胞成熟。结论 miRNA-1和miRNA-133通过协同作用促进mi PSCs体外分化为心肌细胞,显著提高mi PSC向心肌细胞定向分化效率。
- 丁璐李晓莉曾迪陈焱欧东波魏婷郑强荪
- 关键词：MICRORNA诱导性多能干细胞心肌细胞
