宋直钰
- 作品数:2 被引量:0H指数:0
- 供职机构:军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 血小板输注对肿瘤生长及免疫调节作用
- 目的初步探讨血小板输注对小鼠肿瘤生长及机体免疫功能的影响。方法将2×105的小鼠黑色素瘤细胞B16F10尾静脉接种于4-5周龄C57BL/6雄性小鼠,建立实验性肺转移模型。实验分成3组:对照组,即不输血小板;自体血小板输...
- 赵敬湘宋直钰魏广智汤永永王宇玲
- MMP-2-PEX原核表达纯化及其对黑色素瘤细胞与内皮细胞黏附的影响
- 2010年
- 目的探讨原核表达的人源基质金属蛋白酶2的C端结构域(MMP-2-PEX)对黑色素瘤细胞A375与内皮细胞黏附的影响。方法利用RT-PCR方法从人成纤维肉瘤细胞HT1080中克隆MMP-2 C端结构域,构建原核表达载体pET-His-PEX;转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达;盐酸胍裂解包涵体,经镍琼脂糖凝胶柱纯化,透析复性后获得MMP-2-PEX蛋白,随后对其进行Western印迹和质谱鉴定。采用明胶酶谱法检测MMP-2-PEX的活性;采用平行板流动小室系统检测在流动状态下MMP-2-PEX对A375细胞与脐静脉内皮细胞HUVEC黏附的影响,通过小鼠实验性肺转移模型检测MMP-2-PEX对A375细胞在小鼠肺内癌栓形成的影响。结果 Western印迹和质谱鉴定原核表达的MMP-2-PEX蛋白正确,明胶酶谱检测MMP-2-PEX能够明显抑制MMP-2的活性。表达的MMP-2-PEX蛋白能够在流动状态下抑制A375细胞与HUVEC细胞的黏附,其黏附抑制率与MMP-2-PEX蛋白浓度增加成正相关,MMP-2-PEX浓度为12.5,25和50μg/ml时抑制率分别为32.5%,41.4%和53.9%。用MMP-2-PEX处理后,A375细胞在小鼠肺内癌栓的形成与对照组相比降低了26.4%。结论原核表达的人MMP-2-PEX在体外流动状态下可抑制A375细胞与内皮细胞的黏附,并抑制A375细胞在小鼠肺内癌栓的形成。
- 宋直钰赵敬湘魏广智张磊汤永永王字玲
- 关键词:基质金属蛋白酶2黑色素瘤细胞黏附内皮细胞