周辉
- 作品数：11 被引量：19H指数：2
- 供职机构：北京大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金中华医学基金会基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程理学自动化与计算机技术更多>>
- 苯并[a]芘暴露引起小鼠脑内β淀粉样蛋白相关分泌酶及降解酶表达变化被引量：2
- 2019年
- 目的探讨苯并[a]芘(benzo[a]pyrene, BaP)暴露后小鼠脑组织中β淀粉样蛋白(βamyloid, Aβ)生成相关分泌酶及降解酶的表达变化。方法 30只C57BL/6小鼠随机分为对照组和低、高剂量BaP染毒组,经腹腔注射分别给予溶剂玉米油和1.0和5.0 mg/kg·bw的BaP,1次/d,连续60 d。采用实时定量PCR法检测淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)、Aβ分泌酶和降解酶mRNA的表达;通过Western blot观察Aβ蛋白、Aβ分泌酶和降解酶的蛋白表达。本研究中涉及的Aβ分泌酶包括两个β分泌酶(β位点分泌酶1和2,Bace1/2)和γ分泌酶的4个亚基(Psen1、Nct、Aph1a和Pen2);Aβ降解酶包括胰岛素降解酶(IDE)和脑啡肽酶(NEP)。结果高剂量BaP染毒后APP的mRNA和Aβ蛋白水平明显增加,分别为对照组的1.61倍(P<0.01)和1.33倍(P<0.01)。Aβ分泌酶中的Bace1、Bace2和Nct的mRNA表达量明显上升,与对照组相比,低、高剂量组Bace1为1.57倍(P<0.01)和1.50倍(P<0.01);Bace2为1.39倍(P>0.05)和2.32倍(P<0.01);Nct为1.97倍(P<0.05)和2.77倍(P<0.01),两剂量组间差异有统计学意义(P<0.05)。BaP暴露后Bace1和Psen1的蛋白表达都呈增加趋势,在BaP低、高剂量组中Bace1蛋白表达上调到对照组的1.82倍(P<0.05)和2.09倍(P<0.01);Psen1在低、高剂量BaP暴露后的表达量是对照组的1.64倍(P<0.05)和1.24倍(P<0.01)。Aβ降解酶IDE的mRNA和蛋白水平均没有明显变化;NEP的mRNA表达呈剂量依赖性的下降趋势,低和高剂量组中的表达量分别为对照组的57%(P<0.01)和29%(P<0.01),其蛋白水平也明显下调,低和高剂量组下降到对照组的43%(P<0.01)和25%(P<0.01),且两组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论 BaP暴露后小鼠脑内的Aβ及其分泌酶表达增加,同时Aβ降解酶表达水平下调,提示BaP暴露可能会干扰Aβ的生成和降解,从而可能对相关疾病如阿尔茨海默症的发生起促进作用。
- 赵雨佳刘丹刘樾高慧明周辉
- 关键词：苯并[A]芘Β淀粉样蛋白
- LTα和NQO1基因多态性与儿童毛细支气管炎易感性的关联性
- 2017年
- 目的探讨LTα和NQO1单核苷酸多态性(SNPs)与儿童毛细支气管炎易感性的联系。方法对北京某幼儿园98名儿童进行问卷调查与DNA采集,将明确诊断为毛细支气管炎的46名研究对象归为病例组,未诊断的52名研究对象归为对照组,得到成组病例对照设计,检测LTα的rs2844484位点和NQO1的rs2917666位点的基因型,采用配对t检验、配对χ2检验及条件Logistic回归进行共显性、显性、隐性模型分析和危险因素分层分析。结果经被动吸烟、购置新家具情况、动物皮毛接触史、雾霾天佩戴口罩习惯校正后,在隐性模型中,rs2844484位点基因型在毛细支气管炎病例组和对照组中的分布差异具有统计学意义(P<0.05),共显性和显性模型下的rs2844484位点及所有模型下rs2917666位点基因型在毛细支气管炎中的分布差异均无统计学意义(P>0.05)。对隐形模型按被动吸烟、购置新家具、动物皮毛接触、雾霾天佩戴口罩4个相关危险因素分层,无被动吸烟史、儿童出生后未购置新家具、无动物皮毛接触史条件下,与AG/GG基因型相比,rs2844484携带AA基因型的个体发生毛细支气管炎的风险明显增加(校正OR分别为3.649,3.985,5.202,95%CI分别为1.270-10.486,1.053-15.088,1.685-16.058,均P<0.05)。结论 LTα基因rs2844484位点SNP可能是儿童毛细支气管炎发生的易感因素,而NQO1基因rs2917666位点SNP在儿童毛细支气管炎发病过程中不是主要易感因素。
- 王祎星张慧峰廖洁莹周辉
- 关键词：毛细支气管炎NQO1
- 抑制星形胶质细胞Cx43可保护LPS诱导的多巴胺神经元损伤被引量：2
- 2018年
- 目的探讨星形胶质细胞缝隙连接蛋白Cx43在脂多糖(LPS)诱导的多巴胺神经元退变中的作用。方法体外培养SD大鼠原代中脑神经元-胶质细胞和原代混合胶质细胞,随机分为对照组、LPS(10 ng/ml)组、Cx43抑制剂^(43)Gap27(200μg/ml)组、LPS+^(43)Gap27组、半通道阻滞剂18β-GA(10μmol/L)组和LPS+18β-GA组。通过免疫组化检测络氨酸羟化酶(TH)阳性细胞的数目与形态;检测细胞外液中腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)、谷氨酸浓度表征胶质细胞的半通道功能,检测一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量以及活性氧簇(ROS)表征神经免疫反应的强度。RT-qPCR、Western blot与免疫荧光检测星形胶质细胞Cx43的mRNA和蛋白表达。结果 LPS处理导致多巴胺神经元渐进性死亡;在此过程中,细胞外液中的ATP与谷氨酸水平升高,差异有统计学意义(P<0.05),此升高与胶质细胞半通道活性紧密联系;同时发现星形胶质细胞上的Cx43在LPS诱导的神经免疫中表达下降,且变化有统计学意义(P<0.05);而预处理Cx43抑制剂^(43)Gap27或者半通道阻滞剂18β-GA后,LPS引发的胶质细胞外的ATP和谷氨酸释放明显减少,该变化有统计学意义(P<0.05);同时,LPS引发的多巴胺神经元的损伤也几乎被完全抑制,多巴胺神经元数目从对照组的49%上升为114%与117%,该变化有统计学意义(P<0.05);同时LPS引起的免疫反应也部分被抑制,细胞上清中的TNF-α含量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论星形胶质细胞缝隙连接蛋白Cx43在LPS引发的多巴胺神经元退变中扮演重要角色,其半通道的开放可能是促进神经免疫反应、诱发神经毒性的重要原因,表明Cx43可能是帕金森病(PD)的一个潜在病理靶点。
- 黄焕焕赵雨佳张慧峰李清如周辉
- 关键词：星形胶质细胞脂多糖多巴胺神经元
- 苯并[a]芘对脑内多巴胺能神经元和α-突触核蛋白的影响及其机制被引量：1
- 2020年
- 目的:分析苯并[a]芘[benzo(a)pyrene,BaP]暴露对帕金森病病理特征多巴胺能神经元和α-突触核蛋白表达的影响,并探讨可能的机制。方法:8月龄人源SNCA转基因小鼠随机分为BaP染毒组和对照组,分别腹腔注射1.0 mg/kg体质量的BaP和玉米油溶剂,连续注射60 d。通过转轮实验观察小鼠运动功能障碍状况,通过免疫组织化学与免疫蛋白印迹实验观察BaP对多巴胺能神经元和α-突触核蛋白的影响,采用实时荧光定量PCR法检测相关mRNA的表达。研究中涉及的基因主要与神经递质转运蛋白、神经递质受体、细胞自噬和α-突触核蛋白聚集与降解相关。结果:BaP染毒后,转轮实验中小鼠运动时间显著降低(P<0.05),小鼠黑质多巴胺能神经元明显减少,为对照组的62%(P<0.05),中脑α-突触核蛋白表达增多,为对照组的1.36倍(P<0.05)。BaP染毒后,小鼠中脑14种mRNA表达显著下调(P均<0.05),主要涉及α-突触核蛋白降解与细胞自噬、神经元转运体、神经递质受体等功能;而Synphilin-1表达显著上调(P<0.01),与α-突触核蛋白合成有关。结论:BaP暴露抑制神经递质受体、多巴胺转运体蛋白功能和细胞自噬作用,阻碍α-突触核蛋白降解,从而诱导黑质多巴胺能神经元变性死亡和α-syn聚集体形成,增加帕金森病发病风险。
- 祁宇泽权会会徐卫星李清如周辉
- 关键词：多巴胺能神经元Α-突触核蛋白帕金森病
- 超细碳颗粒物促进环境毒素鱼藤酮的多巴胺神经毒性
- 目的 帕金森病是全球第二大神经退行性病,被认为是环境因素与遗传因素共同作用的结果。近年来,大气污染被认为与帕金森病形成有关,然而其致病性与毒性机制还很不清晰。方法 建立原代大鼠中脑神经细胞-胶质细胞混合培养体系,同时建立...
- 王吟曦刘丹张慧峰王祎星周辉
- 关键词：鱼藤酮小胶质细胞NADPH氧化酶
- 模拟肽Gap27抑制缝隙连接蛋白43在帕金森病小鼠模型中的作用
- 2022年
- 目的:探索在6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)诱导的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠模型中,应用缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)选择性抑制剂模拟肽Gap27能否改善多巴胺神经元死亡以及对Cx43表达的影响。方法:将18只C57BL/6小鼠随机分为对照组、6-OHDA组与6-OHDA+Gap27组,每组6只,进行双侧黑质脑立体定位注射。对照组注射抗坏血酸盐溶液,6-OHDA组注射6-OHDA溶液,6-OHDA+Gap27组注射6-OHDA和Gap27混合溶液,用免疫组织化学法对多巴胺神经元标志物酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)染色检测多巴胺神经元数量,实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测Cx43信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,mRNA)表达,免疫荧光染色检测Cx43蛋白分布,Western blot法检测小鼠中脑Cx43蛋白及Cx43的第368位点丝氨酸磷酸化(Cx43 phosphorylation at serine 368,Cx43-ps368)蛋白含量。结果:注射6-OHDA后,小鼠出现黑质多巴胺神经元大量死亡,6-OHDA组TH阳性神经元数量降为对照组的27.7%±0.02%(P<0.01),模拟肽Gap27的使用减少了多巴胺神经元死亡数量,6-OHDA+Gap27组TH阳性神经元数量为6-OHDA组的(1.64±0.16)倍(P<0.05);此外,6-OHDA引起Cx43蛋白含量增加,Cx43-ps368蛋白含量降低。Gap27减弱了6-OHDA引起的Cx43蛋白与Cx43-ps368蛋白含量变化,6-OHDA组中脑总Cx43蛋白含量为6-OHDA+Gap27组的(1.44±0.07)倍(P<0.05),为对照组的(1.68±0.07)倍(P<0.01),且6-OHDA组Cx43-ps368蛋白含量及占总Cx43蛋白比例显著低于6-OHDA+Gap27组(P<0.05)。结论:模拟肽Gap27在6-OHDA诱导的小鼠模型中可减少黑质多巴胺神经元死亡从而发挥神经保护作用,6-OHDA引起的Cx43蛋白过表达对多巴胺神经元可能存在神经毒性,而降低Cx43蛋白水平及维持Cx43-ps368蛋白水平可能是Gap27发挥保护作用的机制。
- 权会会徐卫星祁宇泽李清如周辉黄婧
- 关键词：缝隙连接蛋白436-羟基多巴胺帕金森病
- 不同出行方式PM_(2.5)个体暴露水平的比较研究被引量：6
- 2016年
- 目的在不同浓度大气PM_(2.5)水平下,比较不同出行方式的PM_(2.5)个体暴露水平,并进一步比较地铁站不同位置的PM_(2.5)浓度,以期为城市居民选择适宜的出行方式提供科学依据。方法于2015年12月30日至2016年1月4日,选择北京市城区的某条路线作为研究地点,使用便携式PM_(2.5)监测仪同时测量步行、乘坐公交车和地铁3种出行方式的PM_(2.5)个体暴露水平;对地铁站台、安检处和地铁车厢内的PM_(2.5)浓度进行同步监测并比较。结果在同一研究时期,步行、乘坐公交车和地铁测得的PM_(2.5)个体暴露浓度均值分别为219.34、209.61、167.56μg/m3。当大气PM_(2.5)浓度较低时(≤60μg/m3),乘坐地铁的PM_(2.5)个体暴露水平高于步行和乘坐公交车;当大气PM_(2.5)浓度较高时(>100μg/m3),乘坐地铁的个体PM_(2.5)暴露水平明显低于步行和公交车,差异均有统计学意义(P<0.05)。监测期间地铁站台、安检处和车厢内的PM_(2.5)浓度均值分别为196.90、170.20、136.82μg/m3。结论在不同的大气PM_(2.5)污染水平下,不同出行方式的人群PM_(2.5)个体暴露水平不同。
- 李嘉琛王裕王童张永亮窦长松蔡源发李渊博李宏宇许珺辉宋逸周辉李国星邓芙蓉
- 关键词：PM2.5
- 苯并[a]芘对神经胶质细胞中胰岛素降解酶与脑啡肽酶表达的影响被引量：2
- 2018年
- 目的:探讨苯并[a]芘[benzo(a)pyrene,Ba P]对神经胶质细胞中具有β-淀粉体(β-amyloid,Aβ)清除作用的胰岛素降解酶(insulin-degrading enzyme,IDE)及脑啡肽酶(neprilysin,NEP)表达的影响。方法:制备新生SD大鼠原代神经胶质细胞混合培养体系,接受不同浓度的Ba P、Aβ1-42寡聚体、Aβ1-42纤维体单独或联合处理24 h后,采用细胞增殖-毒性检测试剂盒测定细胞存活率。随机分为对照组、Ba P(2.00μmol/L)组、Aβ1-42(20.00 mg/L)寡聚体组、Ba P+Aβ1-42寡聚体组、Aβ1-42(20.00 mg/L)纤维体组、Ba P+Aβ1-42纤维体组,其中Ba P均为预处理12 h后再与不同聚集状态的Aβ1-42共同作用。进一步采用实时荧光定量PCR及蛋白质免疫印迹技术检测体系中IDE、NEP的mRNA和蛋白表达水平。结果:20.00μmol/L及以下浓度的Ba P处理,20.00、40.00 mg/L的Aβ1-42寡聚体或Aβ1-42纤维体单独处理,Ba P与Aβ1-42寡聚体或Ba P与Aβ1-42纤维体联合处理对神经胶质细胞的存活率均无明显影响。与对照组相比,Ba P单独处理组中IDE、NEP的mRNA和蛋白水平均未明显改变;而Aβ1-42寡聚体单独作用可明显上调IDE的mRNA及蛋白水平(P<0.05),同时Ba P预处理可显著抑制Aβ1-42寡聚体作用引起的IDE表达水平上调(P<0.05);另一方面,Aβ1-42纤维体在单独处理或有Ba P预处理情况下,IDE、NEP的mRNA和蛋白水平均未发生明显改变。结论:在对细胞存活率无明显影响的前提下,Ba P预处理显著抑制了Aβ寡聚体作用后的IDE表达水平上调,提示苯并[a]芘可能干扰Aβ寡聚体降解途径导致Aβ增多聚集,进而可能促进认知功能降低及阿尔兹海默病的形成。
- 张慧峰黄焕焕赵雨佳李清如祁宇泽周辉
- 关键词：苯并[A]芘胰岛素降解酶脑啡肽酶神经胶质
- 苯并[a]芘对神经胶质细胞中IDE与NEP表达的调控
- 目的 苯并[a]芘(Benzo[a]pyrene,BaP)是一种在环境中广泛存在的多环芳烃化合物,目前其神经毒性受到广泛关注.本研究欲通过观察苯并[a]芘对神经胶质细胞中胰岛素降解酶(IDE)及脑啡肽酶(NEP)表达水平...
- 张慧峰周辉
- 关键词：苯并[A]芘
- 雾霾和沙尘暴天气细颗粒物对人角质细胞促炎症作用和过敏反应的影响被引量：6
- 2017年
- 目的观察细颗粒物PM_(2.5)对人角质细胞HaCaT的促炎症作用和过敏反应的影响。方法在雾霾天气和沙尘暴天气下分别收集PM_(2.5),用多次超声水浴法提取PM_(2.5)全颗粒,雾霾天气和沙尘暴天气下收集制备的PM_(2.5)分别记为PM_(2.5)non-dust即PM_(2.5)(N)、PM_(2.5)dust即PM_(2.5)(D)。实验组分为PM_(2.5)(N)、PM_(2.5)(D)及PM_(2.5)+2,4-二硝基氯苯(2,4-dinitrochlorobenzol,DNCB)联合作用组,采用MTT实验、实时荧光定量PCR实验、ELISA检测测定各处理组作用后细胞存活率、相关促炎症因子IL-18、IL-1α、TNF-α表达变化。结果与对照组相比HaCaT细胞经各组处理后的细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05)。HaCaT细胞经PM_(2.5)(N)处理后,IL-1α、TNFα的胞内mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);而经PM_(2.5)(D)处理后IL-1α、TNFα的表达明显增加,变化倍数分别上调为2.65倍(P<0.01)、1.69倍(P<0.05);HaCaT细胞经PM_(2.5)(N)、PM_(2.5)(D)处理后IL-18的胞外释放量与对照相比均有显著增加(P<0.01),而胞内表达水平存在差异;且PM_(2.5)预处理可明显拮抗化学致敏剂DNCB导致的IL-18细胞外蛋白含量增加(P<0.05)。颗粒物组分分析显示,TNF-α的产生与PAHs(r=0.929)、WSOC(r=0.905)成正相关;而IL-18和IL-1α的产生与PAHs(r=-0.901,r=-0.864)、WSOC(r=-0.847,r=-0.919)成负相关。结论本研究表明了不同组分PM_(2.5)引发皮肤角质细胞免疫反应的异同;沙尘天气比雾霾天气的PM_(2.5)可能具有更强的促炎症效应;而雾霾天气的PM_(2.5)的致敏反应可能更为持久,颗粒物的致敏反应可能通过TLR2/4等促免疫通路导致。
- 刘丹赵雨佳王祎星张慧峰高慧明周辉
- 关键词：细颗粒物过敏反应
