马丽丽
- 作品数：3 被引量：16H指数：2
- 供职机构：甘肃农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省科技支撑计划项目江苏省博士后科研资助计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸭瘟病毒UL6基因的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2016年
- 为制备鼠抗鸭瘟病毒(DPV)UL6基因的多克隆抗体,采用PCR方法扩增出UL6基因,连接原核表达载体p ET-32a(+),构建表达质粒p ET-UL6,并将其转化大肠杆菌BL21(DE3),于37℃经1.0 mmol/L的IPTG诱导4 h,SDS-PAGE检测融合蛋白的表达情况,将目的蛋白免疫Balb/c小鼠,利用ELISA方法检测特异性抗体效价。结果显示,构建的原核表达质粒经IPTG诱导能正确表达,且表达的重组蛋白能与DPV阳性血清反应,制备的多克隆抗体效价可达1∶16 000。表明,制备的多克隆抗体具有良好的免疫原性,可以用于UL6基因的表达检测。
- 吴双马丽丽朱善元陆辉
- 关键词：鸭瘟病毒原核表达多克隆抗体
- 鸭瘟病毒环介导等温扩增检测方法的建立及应用被引量：5
- 2015年
- 为建立一种简便、快速、灵敏度高、特异性好的鸭瘟病毒(DPV)检测方法,根据GenBank中公布的DPV UL6基因组序列,设计了3对特异性引物,建立了LAMP快速检测方法。该方法的灵敏度可达0.1fg,对其他鸭常见病原体检测结果均为阴性,扩增反应只需在水浴锅中60min内即可完成,可通过肉眼观察颜色变化直接判定结果。结果表明,所建立的LAMP方法简便快捷,省时省力,是适用于现场和基层实验室快速、准确检测DPV的分子生物学方法。
- 马丽丽吴双胡成左伟勇洪伟鸣王永娟贾宁朱善元
- 关键词：鸭瘟病毒环介导等温扩增技术
- 鸭Ⅰ型肝炎病毒一步法RT-LAMP可视化快速检测方法的建立被引量：10
- 2015年
- 本研究根据GenBank中登录的鸭I型肝炎病毒（ DHV I） VP1基因的高度保守序列,设计了特异性的引物,建立了一种灵敏、特异、高效的可视化体外环介导等温扩增方法（ RT-LAMP）。结果表明,该方法的灵敏性可达到10 fg,是常规一步法RT-PCR方法的100倍以上。全部反应可以在1.0～1.5 h内完成,并可以直接通过肉眼观察颜色进行结果判定,该方法对其他鸭常见的病原体检测结果全部为阴性,该方法的建立为下一步研制鸭I型肝炎病毒的RT-LAMP快速检测试剂盒打下基础。
- 胡成朱善元左伟勇王安平吴双洪伟鸣成大荣马丽丽王永娟
- 关键词：环介导等温扩增
