戴波
- 作品数：11 被引量：13H指数：2
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- Fn14基因真核重组质粒的构建及表达
- Fn14(nbroblast growth factor-inducible 14)是TWEAK(TNF-related weak inducer of apoptosis)的受体之一,为Ⅰ型跨膜蛋白,可通过连接不同的含...
- 肖定璋戴波余细勇
- 关键词：重组质粒基因表达
- 文献传递
- 人Fn14基因真核重组质粒的构建及其表达被引量：5
- 2008年
- 目的构建人成纤维细胞生长因子诱导早期反应蛋白14(fibroblast growth factor-inducible 14,Fn14)基因真核重组质粒及其表达。方法从人肝细胞癌组织抽取总RNA,RT-PCR扩增出Fn14基因全长cDNA,经测序正确后,核酸内切酶EcoRⅠ、XbaⅠ酶切PCR产物,亚克隆入pcDNA 3.1-Myc载体,重组质粒pcDNA 3.1-Myc-Fn14经酶切及测序鉴定正确后转染COS-7细胞,通过免疫组织化学DAB法检测Myc-Fn14融合蛋白的表达。结果重组质粒pcDNA 3.1-Myc-Fn14经EcoRⅠ、XbaⅠ酶切及测序鉴定正确,重组质粒包含人Fn14基因完整编码区。免疫组织化学检测结果显示,重组质粒转染COS-7细胞后成功表达Myc-Fn14融合蛋白,转染空载体pcD-NA 3.1-Myc的COS-7细胞未见Myc-Fn14融合蛋白表达。结论构建了人Fn14基因真核表达载体,该重组质粒可表达含Myc-Fn14的融合蛋白,为研究Fn14功能奠定了基础。
- 肖定璋杨挺戴波余细勇
- 关键词：基因克隆真核表达重组质粒
- 细胞因子在心肌重构中的作用被引量：1
- 2006年
- 心肌成纤维细胞是心肌合成胶原的主要场所。应激与机械牵张使心肌细胞表达细胞因子。促炎性细胞通过心肌成纤维细胞与心肌细胞的旁分泌作用产生细胞因子,并引起神经-体液变化,通过不同的信号转导通路激活相应基因表达改变引起心肌成纤维细胞的增殖、胶原合成和心肌细胞外基质蛋白的表达,从而参与心肌重构过程。而多种细胞因子均能激活基质金属蛋白酶(MMPs),并通过金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)共同调控MMPs。心肌重构就是两者之间动态平衡被打破而出现的病理过程。
- 戴波余细勇陈一岳
- 关键词：心肌重构细胞因子心肌成纤维细胞心肌梗死胶原
- RNA干扰沉默MIF基因对HeLa细胞生长、迁移和黏附性的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)对宫颈癌HeLa细胞生长、迁移和黏附能力的影响。方法:通过反转录病毒载体介导RNA干扰,获得稳定抑制MIF表达的HeLa细胞株。Western印迹法检测MIF蛋白沉默效果以及FAK、ICAM-1、Bax和Bcl-2蛋白表达情况。观察HeLa细胞生长状态的变化,采用迁移实验、黏附实验和软琼脂糖克隆形成实验检测MIF对HeLa细胞迁移和黏附能力的影响。通过裸鼠成瘤实验观察沉默MIF基因后HeLa细胞的成瘤效果。肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor α,TNF-α)和放线菌酮(cycloheximide,CHX)诱导细胞凋亡后,FCM法检测沉默MIF基因对HeLa细胞凋亡的影响。结果:构建获得稳定抑制MIF蛋白表达的HeLa-pSUPER-MIF细胞株。MIF基因沉默后细胞生长减慢,迁移能力和黏附功能减弱;HeLa细胞中FAK、ICAM-1的表达量减少,无法在裸鼠中形成肿瘤;同时能减少TNF-α和CHX诱导的细胞凋亡,并且使Bax表达量下降。结论:MIF通过影响HeLa细胞中FAK、ICAM-1的表达,促进肿瘤细胞生长,增加肿瘤细胞的迁移和黏附能力,因此MIF可能是肿瘤形成过程中的重要因子。
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- 关键词：RNA干扰巨噬细胞游走抑制因子细胞生理学HELA细胞
- MIF相互作用蛋白的筛选及其功能研究
- 目的：巨噬细胞移动抑制因子（MIF）是长期进化中的一个保守蛋白质,具有抑制巨噬细胞迁移的作用。在细胞免疫性方面,特别是在迟发性变态反应方面具有重要作用。MIF 是一种多效的促炎因子,在病理条件下加剧炎症进程。因此 MIF...
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- 关键词：巨噬细胞移动抑制因子
- 文献传递
- Fn14绿色荧光蛋白载体的构建与表达
- 目的Fn14(fibro-blast growth factor-inducible 14)是一种Ⅰ型跨膜蛋白,可通过连接含有TRAF(TNF re- ceptor-associated Factor)结构域的受体蛋白或...
- 肖定璋戴波余细勇
- 文献传递
- siRNA靶向MIF重组逆转录病毒载体构建及稳定表达细胞株的筛选被引量：1
- 2008年
- 目的:构建并鉴定巨噬细胞移动抑制因子(MIF)特异性siRNA重组逆转录病毒载体,将其导入PHOENIX细胞中,筛选出分泌MIF-siRNA病毒的包装细胞,其分泌的病毒可以抑制MIF蛋白的表达,并初步了解稳定沉默MIF细胞株的特性。方法:体外合成含针对MIF特异基因序列的寡核苷酸并定向克隆入pSuper.retro逆转录病毒载体,构建的载体通过酶切、测序鉴定后,采用脂质体介导转染包装病毒细胞株PHOENIX,收获病毒上清;将其感染HeLa细胞株,经过嘌呤霉素筛选得到抑制MIF表达的HeLa细胞株。Western blotting鉴定MIF表达的抑制效果并通过迁移实验、软琼脂糖克隆形成实验比较HeLa-pSuper-MIF和HeLa-pSuper-mock之间的特性。结果:构建了重组逆转录病毒载体pSuper-MIF,转染包装病毒细胞株PHOENIX,病毒上清感染HeLa细胞,抑制了HeLa细胞内源性MIF蛋白的表达。沉默MIF蛋白后导致HeLa细胞迁移能力下降,不依赖支持物生长的特性减弱和黏附能力下降,同时稳定表达沉默MIF蛋白的细胞株生长周期停留在G0/G1期与对照组相比凋亡减少。结论:构建了重组逆转录病毒载体pSuper-MIF,转染包装细胞所产生的病毒上清,能够抑制HeLa细胞内的MIF蛋白表达,表明MIF对HeLa细胞的迁移和不依赖支持物生长能力有重要作用。
- 戴波肖定璋余细勇
- 关键词：巨噬细胞移动抑制因子RNA干扰逆转录病毒载体
- Fn14对干细胞来源的瓣膜间质细胞肌动蛋白的影响
- 在组织工程的研究和应用中,种子细胞的来源、均一性、黏附及分泌能力等是制约组织工程发展的重要瓶颈问题之一。具有高度自我复制能力、增殖能力和多向分化潜能的MSCs是组织工程种子细胞的理想来源。组织工程瓣膜的间质细胞(成肌纤维...
- 黄薇余细勇肖定璋林秋雄单志新李晓红戴波杨敏林曙光
- 关键词：干细胞
- 文献传递
- siRNA靶向MIF重组逆转录病毒载体构建及稳定表达细胞株的筛选
- 构建并鉴定MIF特异性siRNA重组逆转录病毒载体,将其导入PHOENIX细胞中,筛选出分泌MIF- siRNA病毒的包装细胞,其分泌的病毒可以抑制MIF蛋白的表达,并初步了解沉默MIF的稳定细胞株的特性。体外合成含针对...
- 戴波肖定璋余细勇
- 关键词：SIRNAMIF逆转录病毒载体
- 文献传递
- 类硫氧还蛋白-2基因真核表达载体构建及其表达
- 目的硫氧还蛋白是细胞内最重要的二硫键还原酶,对维持细胞内蛋白质的还原状态并正常发挥功能起着重要的作用。此外,硫氧还蛋白、硫氧还蛋白还原酶和硫氧还蛋白过氧化物酶组成了细胞内最重要的抗氧化系统之一,在对抗细胞的氧化应激上起着...
- 戴波肖定璋林秋雄郑猛余细勇
