刘静
- 作品数:17 被引量:37H指数:4
- 供职机构:华北制药集团新药研究开发有限责任公司更多>>
- 发文基金:微生物药物技术创新与新药创制产学研联盟国家科技攻关计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:生物学化学工程医药卫生更多>>
- 工业用产黄青霉菌基因组的RAPD多态性研究被引量:1
- 2013年
- 为寻找高产菌株的分子标记,尝试利用RAPD(random amplified polymorphic DNA)技术,对青霉素生产菌株进行基因组多态性分析,分别以9株不同产量的产黄青霉菌基因组DNA为模版,筛选引物23条,并且对一条高产菌株特异条带进行了克隆与杂交验证.
- 刘静戴梦章丽赵颖张佳王富强
- 关键词:产黄青霉RAPD基因组多态性
- 丝状真菌产黄青霉DNA提取方法的改进被引量:4
- 2010年
- 为探索提取产黄青霉基因组DNA的简便方法,采用起始菌体量0.2 g,10 g/L十六烷基三甲基溴化铵裂解液,通过液氮/65℃反复冻融对菌种破壁,代替了液氮研磨,且不需要玻璃珠,操作简便,重复性好,提取的DNA质量高,极大地方便了后续基因操作.
- 赵颖刘静戴梦郑桂珍章丽张佳王富强
- 关键词:十六烷基三甲基溴化铵
- 一个新的产黄青霉谷胱甘肽转移酶基因的克隆和鉴定被引量:1
- 2007年
- 以产黄青霉(Penicillium chrysogenum Thom)cDNA为模板,克隆得到一个新的谷胱甘肽转移酶基因PcgstB,其开放阅读框长651bp,编码216个氨基酸的蛋白质。与已知序列进行BLASTp比较显示,该蛋白具有保守的GST结构域,与烟曲霉GstB的序列一致性最高,达65%。将PcgstB与原核表达载体pTrc99A连接得到表达质粒pTrc-gstB,转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导后获得以可溶形式表达的重组PcGstB蛋白。以1-chloro-2,4-dinitrobenzene(CDNB)为底物检测,确认该蛋白具有GST活性。
- 张媛王富强郑桂珍戴梦刘静赵颖任志红赵宝华贾茜
- 关键词:谷胱甘肽转移酶产黄青霉原核表达活性测定
- 一株产蛇孢假单壳素真菌F02Z2172的形态和分子鉴定被引量:2
- 2010年
- 从厦门武夷山自然保护区土壤样品中分离得到一株可产生蛇孢假单壳素(Ophiobolins)的丝状真菌,编号为F02Z2172。通过对其宏观特征、显微特征进行观察并对其ITS、Calmodulin和β-tubulin序列进行分子系统学分析,鉴定为伪弯头曲霉,并对伪弯头曲霉与焦色组内其他菌种的关系进行了讨论。由伪弯头曲霉产生蛇孢假单壳素还是首次报道。
- 李业英石英路新华崔晓兰马瑛赵颖刘静张华
- 关键词:转录间隔区
- 新的产黄青霉苯乙酰辅酶A连接酶基因及提高青霉素产量的方法
- 本发明涉及分离的来自产黄青霉的新的苯乙酰辅酶A连接酶基因(pclB)、其氨基酸序列和表达载体,并证明了该基因的表达受苯乙酸的诱导,进而构建了含有本发明新基因的表达载体和产黄青霉工程菌菌株,该转基因菌株的青霉素产量明显提高...
- 王富强刘静戴梦任志红韦春玲张佳赵颖代明伟贾茜贺建功
- 文献传递
- 新的产黄青霉苯乙酰辅酶A连接酶基因及提高青霉素产量的方法
- 本发明涉及分离的来自产黄青霉的新的苯乙酰辅酶A连接酶基因(pclB)、其氨基酸序列和表达载体,并证明了该基因的表达受苯乙酸的诱导,进而构建了含有本发明新基因的表达载体和产黄青霉工程菌菌株,该转基因菌株的青霉素产量明显提高...
- 王富强刘静戴梦任志红韦春玲张佳赵颖代明伟贾茜贺建功
- 文献传递
- 编码产黄青霉苯乙酸羟化酶的基因及其应用
- 本发明涉及来自产黄青霉的新的编码苯乙酸羟化酶的基因(pahB),该基因编码的多肽及含有该基因的表达载体,并证明了苯乙酸能显著诱导该基因的表达。本发明为利用基因工程手段改造产黄青霉菌从而提高青霉素产量提供了方向和靶点,对于...
- 王富强任志红刘静戴梦郑桂珍王泽建赵颖王红怡贾茜贺建功
- 文献传递
- 编码产黄青酶苯乙酸羟化酶的基因及其应用
- 本发明涉及来自产黄青霉的新的编码苯乙酸羟化酶的基因(pahB),该基因编码的多肽及含有该基因的表达载体,并证明了苯乙酸能显著诱导该基因的表达。本发明为利用基因工程手段改造产黄青霉菌从而提高青霉素产量提供了方向和靶点,对于...
- 王富强任志红刘静戴梦郑桂珍王泽建赵颖王红怡贾茜贺建功
- 文献传递
- 环孢菌素A生产菌原生质体转化系统的建立被引量:2
- 2013年
- 以腐草霉素抗性为选择标记,建立了环孢菌素A生产菌株的基因转化体系,成功将外源基因转入环孢菌素A生产菌,并整合到染色体上。传代实验表明,外源基因可以稳定表达。该体系的建立为环孢菌素A生产菌的基因工程育种奠定了基础。
- 戴梦刘静赵颖张佳章丽郑桂珍
- 关键词:环孢菌素A原生质体转化
- 青霉素高产菌株的理性筛选
- 2007年
- 以青霉素生产菌种87117#为出发菌种,采用紫外线诱变复合前体动态后处理的方法,结合限氧条件下的摇瓶筛选,从177支前体抗性株中筛出XY-137#高产突变株。该菌株摇瓶效价平均提高了8.8%,且遗传特性稳定,单位菌丝产物合成能力强。XY-137#菌株在百吨罐中经过近百批的生产验证,其放罐效价、发酵指数、罐批产量平均提高了3.83%、5.66%和2.69%。
- 娄忻张莉刘靓张玉莲陈丽华刘静贺建功
- 关键词:紫外诱变