戴梦
- 作品数:22 被引量:39H指数:4
- 供职机构:华北制药集团新药研究开发有限责任公司更多>>
- 发文基金:微生物药物技术创新与新药创制产学研联盟国家科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学化学工程轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 万古霉素高产菌株选育及发酵配方优化
- 2022年
- 为了提高东方拟无枝酸菌产万古霉素的发酵单位,降低生产成本,采用紫外诱变、常压室温等离子体诱变对东方拟无枝酸菌出发菌株V19-02进行诱变处理,通过筛选链霉素抗性突变菌株,选育高产菌株;通过对发酵培养基中碳源和氮源进行筛选,选取葡萄糖、淀粉、低温豆粉、酵母粉4个因素进行均匀设计。结果表明,获得的高产菌株V19-1-07摇瓶发酵单位提高33.7%,且具有良好的传代稳定性;优化后的培养基配比质量分数为葡萄糖8.0%、淀粉1.0%、低温豆粉1.0%、酵母粉4.0%、氯化钠1.0%、磷酸二氢钾0.1%;小试结果证明,优化配方可使50 L罐发酵单位平均达到14110μg/mL,比原始配方提高了28.9%。因此,研究获得的高产菌株V19-1-07可应用于万古霉素工业化发酵生产,以帮助企业降低成本,进一步提高竞争力。
- 王会会程启东戴梦赵建强任风芝任风芝张志江
- 关键词:发酵工程万古霉素复合诱变菌种选育均匀设计
- 工业用产黄青霉菌基因组的RAPD多态性研究被引量:1
- 2013年
- 为寻找高产菌株的分子标记,尝试利用RAPD(random amplified polymorphic DNA)技术,对青霉素生产菌株进行基因组多态性分析,分别以9株不同产量的产黄青霉菌基因组DNA为模版,筛选引物23条,并且对一条高产菌株特异条带进行了克隆与杂交验证.
- 刘静戴梦章丽赵颖张佳王富强
- 关键词:产黄青霉RAPD基因组多态性
- 丝状真菌产黄青霉DNA提取方法的改进被引量:4
- 2010年
- 为探索提取产黄青霉基因组DNA的简便方法,采用起始菌体量0.2 g,10 g/L十六烷基三甲基溴化铵裂解液,通过液氮/65℃反复冻融对菌种破壁,代替了液氮研磨,且不需要玻璃珠,操作简便,重复性好,提取的DNA质量高,极大地方便了后续基因操作.
- 赵颖刘静戴梦郑桂珍章丽张佳王富强
- 关键词:十六烷基三甲基溴化铵
- 霉酚酸产生菌原生质体转基因方法的建立被引量:4
- 2013年
- 【目的】建立霉酚酸产生菌短密青霉菌的遗传转化体系。【方法】以腐草霉素抗性为选择标记,利用聚乙二醇介导原生质体融合,进行外源基因转化。【结果】聚乙二醇介导的短密青霉菌原生质体转化效率为每微克DNA 2-3个转化子;转化子的PCR检测结果显示外源基因已经整合到短密青霉菌基因组中,转化子抗性稳定。【结论】霉酚酸产生菌短密青霉菌转基因体系的建立为该菌进行分子生物学研究以及基因工程育种奠定了基础。
- 任志红苏彩云闫敬戴梦赵颍王红怡代明伟张佳
- 关键词:霉酚酸原生质体基因转化
- 产黄青霉原生质体融合及融合子初步分析
- 2014年
- 目的以青霉素工业生产菌株产黄青霉为研究对象,对丝状真菌原生质体融合及其融合子进行了初步的研究。方法通过紫外线诱变和基因转化筛选出具有不同遗传标记的2株亲本菌株,对供体亲本菌株原生质体热灭活后进行原生质体融合,并对融合子进行了分离及传代分离。结果在选择性培养基上筛选到5株融合子,融合率为2.97×10-5,融合子分离和传代分离后产生亲本菌株分离子和异核体。结论 5株融合子均为异核体,在自然条件下融合子很难形成杂合二倍体和重组子。
- 任志红张佳闫敬赵颖戴梦王红怡代明伟张志江
- 关键词:产黄青霉原生质体融合融合子
- 编码产黄青霉苯乙酸羟化酶的基因及其应用
- 本发明涉及来自产黄青霉的新的编码苯乙酸羟化酶的基因(pahB),该基因编码的多肽及含有该基因的表达载体,并证明了苯乙酸能显著诱导该基因的表达。本发明为利用基因工程手段改造产黄青霉菌从而提高青霉素产量提供了方向和靶点,对于...
- 王富强任志红刘静戴梦郑桂珍王泽建赵颖王红怡贾茜贺建功
- 文献传递
- 编码产黄青酶苯乙酸羟化酶的基因及其应用
- 本发明涉及来自产黄青霉的新的编码苯乙酸羟化酶的基因(pahB),该基因编码的多肽及含有该基因的表达载体,并证明了苯乙酸能显著诱导该基因的表达。本发明为利用基因工程手段改造产黄青霉菌从而提高青霉素产量提供了方向和靶点,对于...
- 王富强任志红刘静戴梦郑桂珍王泽建赵颖王红怡贾茜贺建功
- 文献传递
- 环孢菌素A生产菌原生质体转化系统的建立被引量:2
- 2013年
- 以腐草霉素抗性为选择标记,建立了环孢菌素A生产菌株的基因转化体系,成功将外源基因转入环孢菌素A生产菌,并整合到染色体上。传代实验表明,外源基因可以稳定表达。该体系的建立为环孢菌素A生产菌的基因工程育种奠定了基础。
- 戴梦刘静赵颖张佳章丽郑桂珍
- 关键词:环孢菌素A原生质体转化
- 蛋白核小球藻高密度高蛋白发酵工艺研究被引量:1
- 2023年
- 试验旨在提高蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)的生物量和蛋白含量,对发酵配方和发酵工艺进行优化。采用Design-Expert 12 Perfect软件对复合碳源、氮源和维生素等13种因子进行Plackett-Burman筛选,得到显著效应因子为复合碳源(葡萄糖+淀粉,按2.5∶1.0的比例添加能够增加核蛋白小球藻发酵产量)、有机氮源(尿素)、维生素B_(12)(VB_(12))。对上述3个显著效应因子进行Box-Behnken试验设计,通过响应面分析获得最优添加量为复合碳源7.4 g/L、尿素8.8 g/L、VB_(12) 0.4 g/L。经250 mL和1 000 mL三角摇瓶培养基试验验证以及50 L发酵罐补料工艺验证,得出3个不同水平发酵的效果均高于对照组,藻体密度分别提高38.9%、31.1%、42.5%,蛋白浓度分别提高29.8%、31.0%、31.4%。研究表明,优化补料条件下,蛋白核小球藻50 L发酵罐OD_(680 nm)值为0.929,干重91.64 g/L,蛋白含量达43%。
- 孙术超王耀耀任风芝任风芝王会会张雪霞葛鹍鹏郝惠云
- 关键词:蛋白核小球藻发酵工艺复合碳源
- 四羟基环孢菌素衍生物转化菌株发酵条件优化被引量:2
- 2014年
- 目的对四羟基环孢菌素衍生物([γ-HyMeLeu4]CyA)转化菌Nonomuraea dietziae的发酵条件进行优化。方法采用均匀设计对发酵培养基进行优化,考察糊精、黄豆饼粉、葡萄糖、酵母粉和蛋白胨对发酵单位的影响,同时对底物环孢菌素A的添加时间、添加量和发酵培养时间进行了摸索。结果得到了最优培养基配方为:糊精1.2%、葡萄糖3.0%、酵母粉0.9%、蛋白胨0.5%、黄豆饼粉1.5%;底物添加最佳时间是36h,添加量是400μg/mL,最佳放瓶时间是96h。在优化后的培养条件下,[γ-HyMeLeu4]CyA的产量提高了63%左右。结论优化后的发酵条件更适合转化菌的生长,有利于目的产物产量的提高,该发酵条件的优化为[γ-HyMeLeu4]CyA的工业化生产奠定了基础。
- 章丽戴梦郑桂珍赵颖刘静张佳王富强
- 关键词:发酵条件优化均匀设计