黄申
- 作品数:10 被引量:9H指数:2
- 供职机构:北京理工大学生命学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学化学工程医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 一种固定化重组磷脂酶B用于植物油脂脱胶的方法
- 本发明提供了一种用固定化重组磷脂酶B对植物毛油脱胶的方法。由于现有的酶法脱胶中酶的制取一般较困难,成本高且较难从反应体系中分离回收,因此,提出了以NKA型大孔树脂固定重组磷脂酶B的固定化载体并应用于植物油脂脱胶的过程。本...
- 李春戴大章梁美丽黄申
- 文献传递
- 含离子液体体系中固定化细胞转化甘草酸生成单葡萄糖醛酸基甘草次酸被引量:5
- 2011年
- 研究疏水性离子液体1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐([BMIM]PF6)与醋酸-醋酸钠缓冲液两相体系中,固定化产紫青霉Penicillium purpurogenum Li-3细胞转化甘草酸(GL)生成单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的反应,并与缓冲液单相体系作为对照。确定了在[BMIM]PF6/缓冲液两相体系中,最适离子液体加入比例、缓冲液pH、反应温度、底物浓度分别为10%、5.83、5℃和6.0 mmol/L,在此条件下反应58 h,甘草酸转化率为87.03%,比缓冲液单相体系提高了15.02%。离子液体循环使用8次后,回收利用率维持在85.28%。主产物GAMG和副产物甘草次酸(GA)在两相体系中得到有效分离,为后续产物分离带来便利。
- 陈金燕刘桂艳黄申童延斌李春
- 关键词:甘草酸甘草次酸离子液体固定化细胞
- 固定化产紫青霉连续化合成GAMG的研究
- 单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)是通过甘草酸(GL)水解失去外端葡萄糖醛酸基的产物,与甘草酸相比,GAMG具有更高的抗炎、抗过敏、抗癌等活性,且毒性低、溶解性好,便于体内运输。另外,GAMG的甜度是甘草酸的5倍,是GL...
- 肖玉清黄申李春
- 关键词:甘草酸固定化细胞连续化反应器
- 文献传递
- 固定化产紫青霉连续化合成GAMG的研究
- 单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)是通过甘草酸(GL)水解失去外端葡萄糖醛酸基的产物,与甘草酸相比,GAMG具有更高的抗炎、抗过敏、抗癌等活性,且毒性低、溶解性好,便于体内运输。另外,GAMG的甜度是甘草酸的5倍,是GL...
- 肖玉清黄申李春
- 关键词:甘草酸固定化细胞连续化反应器
- 理性设计提高β-葡萄糖醛酸苷酶的热稳定性被引量:2
- 2015年
- 采用同源序列比对策略和脯氨酸效应的设计策略,以同源建模的三维结构为基础,结合定点突变技术,对重组产紫青霉β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS-E)进行理性设计,获得了2个热稳定性明显提高的突变体PGUS-E I130V和PGUS-E G280P,再将突变位点进行组合获得突变体PGUS-E I130V+G280P。相比PGUS-E,PGUS-E I130V、PGUS-E G280P和PGUS-E I130V+G280P在60℃下的半衰期T1/2分别比原始酶的23 min提高3.5倍,5倍和5.5倍,达到82 min,117 min和128min。突变体的动力学参数Kcat/Km值分别为1.534×107 mol-1·L·min-1,1.368×107mol-1·L·min-1和1.283×107 mol-1·L·min-1,与原始酶(1.316×107 mol-1·L·min-1)接近,对底物的亲和力基本不变。结果表明在蛋白质构象不稳定的区段中引入脯氨酸,以及在相应位置引入嗜热菌的氨基酸,均可提高蛋白质热稳定性。
- 汤恒黄申冯旭东李春
- 关键词:Β-葡萄糖醛酸苷酶分子模拟动力学蛋白质稳定性脯氨酸
- 响应面法优化固定化荧光假单胞菌磷脂酶B的研究
- 2014年
- 以脱胶油磷含量为响应值,采用响应面法和Central-Composite设计对制备固定化荧光假单胞菌磷脂酶B(PfPLB)主要工艺参数(海藻酸钠浓度、壳聚糖浓度和加酶量)进行了优化,并且采用回归分析拟合了三个固定化因子与响应值(磷含量)的回归模型.该模型预测最佳的固定化Pf-PLB条件为:海藻酸钠3%,壳聚糖1.14%,加酶量1000 U/kg.研究固定化Pf-PLB的酶学性质,结果表明其最适反应温度为40℃,比游离酶提高15℃;最适反应pH为5.5,比游离酶降低1个pH单位.固定化Pf-PLB具有较好的酶活稳定性,连续反应6次,其相对活性为初始值的51.6%,显示出良好的应用前景.
- 姜芳燕黄申李春
- 关键词:荧光假单胞菌响应面固定化
- 荧光假单胞菌BIT-18磷脂酶B基因的克隆及生物信息学分析被引量:2
- 2013年
- 利用PCR从Pseudomonas fluorescens BIT-18总DNA中成功扩增到编码Pf-PLB的全长基因,并进行测序.通过生物信息学分析,可知Pf-PLB基因全长1272 bp,编码423个氨基酸,理论分子量为45.8kDa,等电点为5.53,在N末端有一个包含23个氨基酸的信号肽.进化树及序列分析结果显示,pfplb是PLBs新基因家族的成员.采用模建软件Modeller进行人工建模,结果表明Pf-PLB为由14股Strand组成的β-桶状蛋白,本研究为Pf-PLB进一步高效表达及其脱胶机理研究奠定基础.
- 姜芳燕黄申李春
- 关键词:生物信息学PSEUDOMONASFLUORESCENS
- 一种间歇补料发酵生产单葡萄醛酸基甘草次酸的方法
- 本发明涉及一种间歇补料发酵生产单葡萄醛酸基甘草次酸(GAMG)的方法,属于生物转化技术领域。具体方法为:首先用可诱导产生β-葡萄糖醛酸苷酶的微生物分别在种子培养基和含有甘草酸的发酵培养基中培养诱导出相应的β-葡萄糖醛酸苷...
- 李春杨晓刚周娟娟黄申
- 文献传递
- 固定化细胞连续生产单葡萄糖醛酸基甘草次酸的工艺及装置
- 本发明涉及利用产紫青霉Li-3(Penicillium purpurogenum Li-3)CGMCC NO.5446固定化细胞转化甘草酸连续生产单葡萄糖醛酸基甘草次酸的工艺及装置,属于生物化工领域。用硅藻土和海藻酸钙共...
- 李春肖玉清黄申吕波戴大章
- 文献传递
- 一种间歇补料发酵生产单葡萄醛酸基甘草次酸的方法
- 本发明涉及一种间歇补料发酵生产单葡萄醛酸基甘草次酸(GAMG)的方法,属于生物转化技术领域。具体方法为:首先用可诱导产生β-葡萄糖醛酸苷酶的微生物分别在种子培养基和含有甘草酸的发酵培养基中培养诱导出相应的β-葡萄糖醛酸苷...
- 李春杨晓刚周娟娟黄申