岳娟
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 供职机构：华南理工大学生物科学与工程学院更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 高产果糖基转移酶米曲霉菌株的选育被引量：3
- 2013年
- 为了获得果糖基转移酶活力较高的米曲霉菌株,应用基因组改组技术对其进行选育。以米曲霉菌株SBB201(Aspergillus oryzae SBB201)为出发菌,利用米曲霉分生孢子紫外线-氯化锂复合诱变建立候选文库,并以此作为原生质体融合的出发菌株制备原生质体并进行PEG介导的融合。通过3轮基因组改组,筛选得到一株果糖基转移酶活力达到178.90U/g的菌株,相对原始菌株的酶活105.09U/g提高了70.24%,并经传代培养测定,融合突变株具有较好的遗传稳定性。
- 何小妮陈子健蒋波王玉海岳娟张毅
- 关键词：果糖基转移酶米曲霉复合诱变基因组改组
- 编码米曲霉果糖基转移酶基因在大肠杆菌中的重组表达被引量：3
- 2014年
- 为了大量获得果糖基转移酶,本文通过RT-PCR扩增获得米曲霉果糖基转移酶基因,连接到大肠杆菌pEASY-E1质粒上,并转化到大肠杆菌BL21-DE3菌株中成功表达,通过对重组菌诱导表达条件的优化,最终确定在诱导温度为25℃,诱导剂异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)浓度为1.0μmol/mL的条件下,该重组酶可以顺利表达。利用重组质粒PEASY-S1上的6×组氨酸标签,用亲和层析的方法纯化能够得到较高纯度的果糖基转移酶。以蔗糖为底物,用该酶进行果糖基转化生产低聚果糖的实验结果表明:重组果糖基转移酶具有一定催化能力,其酶活力达到59.0 U/g,且在低温诱导时稳定表达,具备一定的潜在开发利用价值。本实验成功在大肠杆菌中重组表达出果糖基转移酶,并且能够短时间内、大量表达具有催化活性的果糖基转移酶,可望为果糖基转移酶的工业化提供理论基础。
- 王玉海岳娟王鹏林晓珊张毅
- 关键词：果糖基转移酶大肠杆菌蛋白表达
