刘芳
- 作品数：204 被引量：1,119H指数：17
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划湖北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学经济管理更多>>
- CD80-IgG融合蛋白的表达、纯化与鉴定
- 2005年
- 目的构建CD80IgG融合基因表达载体,表达并纯化该融合蛋白,初步探讨其增强抗肿瘤免疫的作用方法将小鼠CD80分子胞外段和IgGFc段cDNA串联起来,定向克隆入质粒pcDNA3.0中,使其在哺乳动物细胞中表达。采用免疫亲和层析法纯化,免疫印迹和斑点ELISA鉴定表达的融合蛋白,流式细胞术、MTT法检测其增强白血病细胞CD80分子表达及促进T细胞增殖的功能。结果DNA测序证明两段基因正确插入质粒载体;亲和层析纯化得到浓度为0.1mg/ml,纯度为95%的蛋白质溶液;免疫印迹、ELISA表明该蛋白质即为CD80IgG融合蛋白流式细胞术证明其能够提高白血病细胞表面CD80分子的表达。结论成功构建融合基因表达载体,表达并纯化出融合蛋白,该蛋白可增强CD80分子的表达。
- 何伟刘芳冯献启张敏刘凌波邹萍
- 关键词：融合基因
- 抗TGFβ1核酶以及嵌合型核酶的细胞外和肝星状细胞内活性鉴定被引量：2
- 2005年
- 大量研究表明转化生长因子β1参与细胞的多种生理和病理过程.为了研究TGFβ1在这些过程中的详细发病机制,设计了针对TGFβ1的非嵌合型锤头状核酶和U1小核RNA嵌合型核酶.鉴定非嵌合型锤头状核酶和U1小核RNA嵌合型核酶的胞外以及活化型肝星状细胞内的活性.核酶的胞外切割反应结果证实,非嵌合型核酶的胞外活性优于U1小核RNA嵌合型核酶.进一步研究发现,U1小核RNA嵌合型核酶在转染的肝星状细胞内可以高效下调TGFβ1的表达,且其胞内活性明显强于非嵌合型核酶.这些结果表明,抗TGFβ1的U1小核RNA嵌合型核酶不仅为TGFβ1在细胞的生理和病理过程中具体作用机制的研究提供一种有效的工具,而且有望为TGFβ1相关性疾病的治疗提供一个有效手段.
- 宋宇虎刘芳田德安薛秀兰刘南植吴小力林菊生金由辛
- 关键词：核酶锤头状核酶TGFΒ活性鉴定细胞外
- 血清及腹水肿瘤标志物对良恶性腹水的鉴别诊断价值被引量：13
- 2014年
- 目的评价血清及腹水肿瘤标志物对良恶性腹水的诊断价值。方法回顾性分析435例患者临床资料,检测血清、腹水肿瘤标志物,并绘制肿瘤标志物受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)。结果设定肿瘤标志物的临界值,恶性腹水组癌胚抗原(CEA)、CA19-9、CA15-3高于临界值的患者比例明显高于良性腹水组(均P<0.05),而血清和腹水CA12-5无明显差异;腹水肿瘤标志物的诊断效能优于血清肿瘤标志物,其中腹水CEA诊断价值最高;与单一肿瘤标志物相比,联合检测腹水肿瘤标志物(CEA+CA19-9+CA15-3)其诊断价值更高。结论联合检测CEA、CA19-9、CA15-3对于良、恶性腹水的鉴别诊断有重要的价值,尤其是腹水中肿瘤标志物,使用ROC曲线可以更客观地评价其诊断价值。
- 窦倩商海涛叶进徐可树侯晓华宋宇虎刘芳
- 关键词：恶性腹水良性腹水肿瘤标志物
- 多层螺旋CT容积再现技术显示正常内耳及内耳病变的价值被引量：9
- 2006年
- 目的评价容积再现技术(VRT)对正常内耳及内耳病变的显示能力。方法对20例(40耳)正常内耳及42例(61耳)内耳病变患者行多层螺旋CT横断面扫描,扫描参数为120kV,100mAs,0.75mm准直器宽度,螺距为1,高分辨骨算法重建。对感兴趣耳进行VRT重建。结果VRT图像清晰显示了正常内耳的空间立体结构。40耳先天性内耳发育畸形VRT图像均立体、直观、清晰地显示了畸形的形态和部位。VRT表现为:(1)Michel畸形1耳:内耳完全缺如;(2)共同腔畸形3耳:耳蜗与前庭不能相互区分,呈一囊状结构;(3)不完全分隔Ⅰ型3耳:耳蜗呈囊状,前庭扩大呈囊状,二者可相互区分;(4)不完全分隔Ⅱ型(即Mondini型)5耳:耳蜗仅1.5圈,中圈和顶圈融合,前庭扩大;(5)前庭与半规管畸形14耳:耳蜗正常,前庭扩大,半规管短小、缺如或扩大;(6)前庭导水管扩大14耳:前庭导水管开口扩大呈喇叭口状,与总脚相通。骨化性迷路炎患者7例(7耳),4耳重组时不能完整地显示内耳的立体结构,3耳表现为耳蜗变细或半规管显示不完整。14例(14耳)迷路瘘管患者中,耳蜗破坏1耳,耳蜗、前庭、水平半规管、上半规管均破坏3耳,仅水平半规管破坏10耳。VRT图像表现为半规管或耳蜗与团状高密度结构相连,重组时不能相互分开。结论VRT可清晰显示正常内耳及部分内耳病变,对内耳病变的诊断有重要帮助。
- 马辉韩萍梁波雷子乔刘芳田志梁
- 关键词：迷路耳蜗疾病
- 积雪草酸对慢性髓细胞白血病急变株K562细胞增殖的影响及其机制被引量：6
- 2010年
- 目的:探讨积雪草酸对慢性髓系白血病细胞急变株K562增殖抑制,诱导凋亡的作用及其机制。方法:四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖活性,Annexin-V/PI双标流式细胞术检测细胞的凋亡率,Hoechesst33258染色法检测细胞的形态学变化,RT-PCR检测积雪草酸对survivin和bcl-2mRNA表达的影响。结果:积雪草酸对K562细胞有明显的增殖抑制作用,尤其在30μmol.L-1以上增殖抑制效应更加显著。24,48h的IC50值分别为(36.2±4.7)μmol.L-1、(27.4±3.7)μmol.L-1。积雪草酸能诱导细胞发生凋亡,可见典型的凋亡形态,呈剂量依赖性。积雪草酸可使survivin、bcl-2mRNA的表达呈剂量依赖性降低。结论:积雪草酸能抑制K562细胞的增殖及诱导凋亡,呈剂量依赖性。积雪草酸的促凋亡机制可能与下调survivin和bcl-2的转录水平有关。
- 吕婷婷陈燕姜旭东刘芳
- 关键词：积雪草酸K562凋亡SURVIVINBCL-2
- 螺旋CT结合呼吸门控对接尘工人肺部形态与功能关系的研究
- 2002年
- 目的 探讨呼吸门控下定量CT对接尘工人早期病变的诊断价值。方法 接尘工人 6 2例 (接尘 3～ 2 8年 )及对照组 5 4例 ,在 5 0 %肺活量 (5 0 %VC)状态下行全肺螺旋CT扫描 ,在 10 %VC、90 %VC呼吸水平下于隆突层和隆突上、下各 5cm处行高分辨CT(HRCT)扫描。用定量指标分析结果 ,并与临床肺功能检测进行对照。结果 6 2例接尘工人中有 9例在CT上可见肺气肿的表现。接尘工人的 10 %VC、90 %VC时的定量指标与对照组的差异均有显著性 (P <0 .0 5 ) ,并且随着接尘工龄的增加 ,其定量指标与对照组的差异呈梯度增加。结论 呼吸门控定量CT是接尘工人早期病变的灵敏、准确、客观的检查方法 ,其对小气道病变的诊断优于临床肺功能检测。
- 韩萍张帆刘芳冯敢生史河水郑金龙刘永华李友林
- 关键词：螺旋CT呼吸门控接尘工人矽尘肺密度
- 凋亡抑制蛋白survivin在白血病细胞中的表达及其意义被引量：8
- 2005年
- 目的探讨白血病原代细胞中凋亡抑制蛋白survivin基因的表达情况,及其与疗效的关系。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测45例白血病患者和10例健康人骨髓中survivin的表达水平,并给与合适的方式化疗,评判疗效。结果白血病细胞中survivin mRNA阳性率为68.9%(31/45)。急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞中survivin mRNA表达阳性率为73.3%,较急性髓系白血病(AML)的63.6%稍高;慢性粒细胞白血病(CML)患者中survivin mRNA表达率很高,可达80.0%,慢性淋巴细胞白血病(CLL)中则为66.7%,但均高于正常对照组的20.0%(P<0.05)。在22例AML患者中,survivin mRNA表达阴性者接受2个疗程化疗后缓解率(CR)87.5%,明显高于表达阳性患者的64.3%。在15例ALL患者中也有类似的结果,CR分别为100%和81.8%。CML患者中,survivin mRNA阳性的4例中有2例两年内发生急变;CLL患者病情均较稳定。结论survivin基因在白血病细胞中有较高的表达,并与疗效及预后有密切的关系。
- 吴耀辉邹萍刘芳沈汉斌
- 关键词：聚合酶链反应白血病
- 定量CT肺密度测定的影响因素被引量：6
- 2001年
- 为探讨定量 CT肺密度测定的影响因素 ,对 5 4例正常人在 5 0 %肺活量 (VC)时螺旋 CT扫描全肺 ,其中 40例在 10 % VC、 90 % VC,2 3例在 5 0 % VC呼吸水平于隆突层、隆突上下各 5 cm处行高分辨 CT (HRCT)扫描 ,用 Pulmo软件自动评估平均肺密度 (ME)和像素指数 (PI)。发现呼吸幅度对 ME、 PI影响很大 ,吸呼气末 ME差值达 12 5 .91Hu。ME和 PI还受层厚、年龄、性别的影响。结果表明 :精确控制呼吸水平对定量 CT肺密度测定极其重要 ,扫描时要保证技术条件一致 ,有必要建立正常国人不同性别。
- 刘芳韩萍冯敢生
- 关键词：肺密度CT肺疫病
- 氯氧甲苯咪唑诱导白血病细胞凋亡的实验研究被引量：1
- 2005年
- 为了研究氯氧甲苯咪唑(econazole)诱导鼠粒单核白血病细胞WEHI3凋亡的机制,利用AnnexinⅤ/PI双染实验测定细胞凋亡,Fura2荧光负荷技术检测细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i),并抽取WEHI3细胞内质网部分蛋白,利用Westernblot测定caspase7、caspase12的蛋白表达。结果显示:econazole作用后WEHI3出现典型的凋亡改变,细胞内游离[Ca2+]i较对照明显升高,caspase12和caspase7表达随着细胞内钙离子浓度的提高而逐渐增加。结论:econazole能诱导WEHI3细胞凋亡,caspase12在此过程中起重要作用。
- 刘芳邹萍张敏吴耀辉肖娟
- 关键词：细胞凋亡CASPASE-12
- 体验式学习在门诊首次注射胰岛素患者中的应用
- 目的 探讨体验式教育在门诊初次注射胰岛素患者的应用效果，方法 选择在我院门诊就诊初次注射胰岛素的糖尿病患者120例。由糖尿病专科护士对患者进行示范讲解，患者在专科护士的辅导下自行完成首次胰岛素注射。结果 体验式学习有效缓...
- 刘芳
