刘冬梅
- 作品数：7 被引量：29H指数：2
- 供职机构：中国农业大学农学与生物技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市财政专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学建筑科学更多>>
- 黄瓜绿斑驳花叶病毒北京和山东分离物的生物学测定及其基因组比较被引量：22
- 2009年
- 为揭示黄瓜绿斑驳花叶病毒的分子流行学特征,通过RT-PCR和cDNA克隆技术获得并分析了从北京甜瓜和山东西瓜上分离的2个黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)分离物CGMMV-Beijing和CGM-MV-Shandong的全序列。结果表明CGMMV-Beijing和CGMMV-Shandong的基因组分别由6423和6427个核苷酸组成,包括5′及3′端非编码区和4个开放性的阅读框,分别编码129kDa和186kDa复制相关蛋白、29kDa的移动蛋白及17.4kDa的外壳蛋白。寄主范围测定显示在供试的6科11种植物中CGMMV-Beijing和CGMMV-Shandong均可侵染葫芦科的葫芦、南瓜和西瓜以及茄科的本氏烟和藜科的苋色藜,不侵染供试的其它植物。CGMMV-Beijing和CGMMV-Shandong基因组的核苷酸同源性为99.5%,186kDa蛋白的核酸和氨基酸同源性分别为99.7%和99.8%,移动蛋白的核酸和氨基酸同源性分别为99.3%和98.1%,外壳蛋白的核苷酸同源性为100%。多序列比对分析结果显示,CGMMV的各分离物之间的分子差异并不明显,核苷酸同源性均在98%以上。将CGMMV-Beijing和CGMMV-Shandong与侵染葫芦科植物的烟草花叶病毒属其它成员比较,结果显示其亲缘关系较远,基因组的核苷酸同源性介于56.7%～59.6%,外壳蛋白的氨基酸同源性在44.7%～54.0%之间。综合分析显示,CGMMV分离物之间的差异并不明显,可能具有共同的侵染来源。
- 田永蕾刘冬梅张永江李明福马占鸿
- 关键词：黄瓜绿斑驳花叶病毒基因组
- 甘蔗花叶病毒VPg蛋白的原核表达及其在玉米中的免疫定位被引量：2
- 2009年
- 利用RT-PCR方法从感染甘蔗花叶病毒北京分离株(SCMV-BJ)的玉米叶片中扩增得到VPg基因,将VPg基因连接到原核表达载体pET-28a上。获得的重组子转化大肠杆菌BL21(DE3)后,用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE分析表明,VPg在大肠杆菌中获得了高效表达,产生的融合蛋白分子量为30 kD。将融合蛋白纯化后免疫兔子获得了特异性较高的抗血清。ACP-ELISA测定抗血清的效价为1/4 096。利用该抗血清对健康玉米和病毒侵染的玉米茎、叶脉和叶片进行免疫金标记,结果表明在茎和叶脉的韧皮部筛管的细胞壁处有金颗粒。
- 秦艳红刘冬梅周涛范在丰
- 关键词：甘蔗花叶病毒VPG原核表达
- 扶桑上棉花曲叶病毒的检测鉴定及生物学危害评估
- 棉花曲叶病毒(Cotton Leaf Curl Virus,CLCuV)为双生病毒科,菜豆金色花叶病毒属成员,单链环状DNA病毒,是为害棉花的主要病毒之一。在世界上主要的棉花产区均有分布,是我国重要的检疫对象。近年来,我...
- 刘梅刘冬梅田永蕾马占鸿李明福
- 马铃薯病毒疫情调查及马铃薯S病毒的检测鉴定被引量：5
- 2009年
- [目的]了解河北省张家口市马铃薯病毒病害发生情况并对马铃薯S病毒(PVS)进行鉴定。[方法]对采自河北省张家口市的46份马铃薯样品进行生物学测定和血清学及分子生物学检测。[结果]46份样品中有35份为马铃薯Y病毒(PVY)侵染,其中有6份是PVY与PVS混合侵染,其余29份为PVY单独侵染。用特异性引物扩增PVS外壳蛋白基因的部分序列,获得685 bp的目的产物,该序列与已报道的PVS核苷酸序列同源性在80%以上,编码227个氨基酸,与已报道的PVS外壳蛋白的氨基酸同源性均在90%以上。证明该样品中确实携带PVS。[结论]该研究为今后该地区马铃薯病毒病害的控制及防治提供了依据。
- 田永蕾张永江刘冬梅刘梅马占鸿李明福陈洪俊
- 关键词：马铃薯病毒
- 李痘病毒和南芥菜花叶病毒阳性参考品的制备
- 李痘病毒(Plum pox virus,PPV)和南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,ArMV)均属于我国进境检疫性有害生物,对我国的农产品安全和经济具有潜在的威胁,准确鉴定这两种病毒对于防止其传入有...
- 田永蕾刘冬梅高雅红李明福
- 关键词：李痘病毒南芥菜花叶病毒
- 甘蔗花叶病毒CI蛋白在玉米韧皮部细胞中的免疫定位
- 2009年
- 为探讨甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)CI基因的功能,对CI蛋白进行了免疫定位。利用RT-PCR方法,扩增甘蔗花叶病毒北京株系(SCMV Beijing isolate,SCMV-BJ)CI基因部分片段,将其连接到表达载体pET-28a上,重组质粒pETCIF1导入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中。SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,CI基因获得了高效表达。将融合蛋白纯化后免疫兔子获得特异性较高的抗血清,利用该抗血清,对健康玉米和受病毒侵染的玉米茎、叶脉和叶片进行免疫金标记,在茎和叶脉韧皮部筛管的细胞壁处有金颗粒。
- 秦艳红刘冬梅周涛范在丰
- 关键词：甘蔗花叶病毒原核表达
- 李痘病毒和南芥菜花叶病毒阳性参考品的制备
- 李痘病毒(Plumpox virus,PPV)和南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,ArMV)均属于我国进境检疫性有害生物,对我国的农产品安全和经济具有潜在的威胁,准确鉴定这两种病毒对于防止其传入有着...
- 田永蕾刘冬梅高雅红李明福
- 关键词：李痘病毒南芥菜花叶病毒
- 文献传递
