李美婵
- 作品数：11 被引量：12H指数：2
- 供职机构：广州医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- 大鼠肺动脉和主动脉成纤维细胞的原代培养及生物学行为研究被引量：1
- 2017年
- 目的 建立大鼠肺动脉和主动脉外膜成纤维细胞的体外分离、培养及鉴定的方法,并对其细胞形态和成纤维细胞转化成肌成纤维细胞的特征进行观察。方法 通过精分肺动脉和主动脉, 剥取外膜,用10%的胎牛血清低糖 DMEM 培养基诱导细胞爬出生长。倒置显微镜下观察成纤维细胞形态,并对细胞进行免疫荧光鉴定。通过对α-平滑肌肌动蛋白 （α-SMA）表达的观察确定传代细胞是否转化为肌成纤维细胞。结果 成纤维细胞能够迅速从剥取的外膜中爬出生长,波形蛋白细胞免疫荧光染色为阳性。主动脉成纤维细胞和肺动脉成纤维细胞形态差别大,前者为铺路石状,后者呈细长梭形。2种成纤维细胞经传代皆能转化为肌成纤维细胞,免疫荧光染色可见α-SMA 大量表达,前者包围着细胞核呈条索状非定向分布,后者平行于细胞长轴呈细丝状表达。结论 该方法所获得的成纤维细胞纯度高,可在体外稳定培养。本研究首次发现了肺动脉和主动脉成纤维细胞形态学及生物行为上的差别,为细胞水平研究主动脉和肺动脉血管重塑,胶原沉积等相同或不同的病理机制提供了充足可靠的靶细胞模型。
- 张晨婷李美婵陈豫钦江倩云昕吴雄婷卢文菊王健
- 关键词：成纤维细胞Α-平滑肌肌动蛋白波形蛋白
- 尼古丁通过上调大鼠远端肺动脉平滑肌细胞烟碱型乙酰胆碱受体α7亚基的表达增加细胞内钙离子浓度
- 目的 探讨尼古丁刺激参与PASMCs中钙稳态调节的机制,为防治呼吸疾病相关的肺动脉高压寻找有效靶点。材料和方法 建立原代肺动脉平滑肌细胞模型：(1)利用InCyte细胞内钙浓度检测系统,检测尼古丁刺激对大鼠PASMCs的...
- 陈豫钦黄君怡李美婵王健
- 关键词：尼古丁钙离子烟碱型乙酰胆碱受体
- 丹参酮ⅡA磺酸钠通过蛋白激酶G-过氧化物酶体增殖物激活受体γ信号通路抑制缺氧诱导的远端肺动脉平滑肌细胞内钙池操纵性钙内流的升高被引量：2
- 2017年
- 肺动脉高压（PAH）是一种慢性致命性疾病，其特征主要表现为肺血管阻力的升高，并最终导致右心衰竭。进展性肺血管壁的增厚及重塑是PAH血管阻力增高的病理基础。
- 江倩卢文菊杨凯Cyrus Hadadi付欣陈豫钦云昕张杰李美婵徐磊汤海洋Jason X-J Yuan王健孙德俊
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体Γ平滑肌细胞内缺氧诱导钙内流
- 低氧诱导大鼠肺动脉重塑对肺动脉平滑肌锌指蛋白转录因子5表达的影响被引量：1
- 2016年
- 目的 探讨慢性低氧性肺动脉高压（CHPH）大鼠模型肺动脉重塑与肺动脉平滑肌锌指蛋白转录因子5（KLF5）蛋白表达的关系.方法 雄性SD大鼠20只按随机数字表法分为常氧组和低氧组,每组10只,低氧组放入全自动低氧箱饲养,21 d后用右心室测压法测量右心室收缩压（RVSP）及平均右心室压（mRVP）;计算右心肥厚指数RV/（LV＋S）;取右肺组织包埋切片行HE染色测量肺小动脉血管管腔面积,计算血管中膜厚度百分比（WT％）;并取切片行免疫荧光检测KLF5的表达;荧光PCR和Western blot法分别检测远端肺动脉平滑肌组织中KLF5 mRNA、蛋白的表达.显微镜下分离大鼠（6只）远端肺动脉平滑肌组织,胶原酶消化法培养大鼠原代肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）,随后置于低氧环境（4％ O2,60 h）培养并获取细胞蛋白检测KLF5的表达.结果 低氧组大鼠RVSP和mRVP与常氧组（28.3±0.4）、（11.3±1.0） mmHg（1 mmHg =0.133 kPa）比较,分别升高至（43.9±1.3）、（26.5±2.3）mmHg（P ＜0.05）;低氧组RV/（LV ＋S）为（0.48±0.03）,明显高于常氧组（0.27±0.01,P＜0.05）;低氧组血管腔占血管区域的比值（WT％）为（46.1±6.6）％,与常氧组（68.7±3.1）％相比显著降低（P＜0.05）;而低氧组WT％（5.6±0.3）％与常氧组（3.7±0.4）％相比显著增加（P＜0.05）;低氧组大鼠肺动脉平滑肌组织KLF5蛋白表达量为常氧组的（22±7）倍,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 CHPH大鼠模型RVSP、mRVP、右心室肥厚指数均升高,同时伴有肺小动脉重塑,这可能与低氧诱导PASMCs中KLF5的表达升高有关.
- 曹敏娜陈豫钦江倩李美婵卢文菊王健
- 关键词：低氧肺性肺动脉
- 小鼠远端肺动脉平滑肌细胞的原代培养方法及其功能学特性鉴定被引量：1
- 2017年
- 目的建立小鼠远端肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）的体外分离及原代培养方法，并鉴定其功能学特性。
方法采用体视显微镜下分离纯化小鼠远端肺动脉平滑肌组织，并采用复合酶联合消化法消化后进行体外培养；倒置显微镜下观察小鼠原代远端PASMCs的生长特点；免疫荧光染色法对细胞进行鉴定；荧光显微镜下观察以Fura－2－AM荧光探针示踪的钙离子，检测细胞高钾反应及钙池操纵性钙内流反应，评价细胞活力。
结果原代小鼠远端PASMCs分离培养6 d时细胞生长融合度达80%，生长状态较好，呈典型的谷－峰状形态；细胞α－肌动蛋白（α－SMA）染色阳性率为95%以上。利用含钙高钾Krebs液（钾离子浓度为60 mmol/L）灌流原代小鼠远端PASMCs，1 min后95%以上PASMCs细胞内钙离子浓度迅速上升，细胞内钙离子浓度（Δ[Ca2＋]i）变化值〉50，证明原代小鼠远端PASMCs中电压依赖性钙通道（VDCC）具有良好的功能；利用含钙Krebs液灌流5 min、无钙环匹阿尼酸和Nif Krebs液灌流10 min、以含钙环匹阿尼酸和Nif Krebs液灌流10 min及含钙Krebs液灌流10 min检测原代小鼠远端PASMCs中基础钙及钙池操纵性钙内流（SOCE），结果显示原代小鼠远端PASMCs对灌流液反应良好，钙离子浓度出现双峰变化，表明细胞中钙池操纵性钙通道（SOCC）功能优良。
结论本实验通过复合酶消化法成功建立稳定可靠的原代小鼠肺动脉平滑肌体外培养方法，可获得纯度较高，功能良好的PASMCs，为肺血管疾病的研究提供了良好的细胞工具。
- 李美婵陈豫钦张晨婷江倩卢文菊王健
- 关键词：原代培养电压依赖性钙通道
- 大鼠肺动脉和主动脉成纤维细胞的原代培养及生物学行为研究
- 目的 建立大鼠肺动脉和主动脉外膜成纤维细胞的体外分离，培养及鉴定的方法，并对其细胞形态和成纤维细胞转化成肌成纤维细胞的特征进行观察。方法 通过精分肺动脉和主动脉，剥取外膜，用10％的胎牛血清低糖DMEM培养基诱导细胞爬出...
- 张晨婷李美婵吴雄婷卢文菊王健
- 关键词：原代培养
- 低氧性肺动脉高压动物模型肺组织中p53的表达改变及作用研究
- 背景： 肺动脉高压（pulmonary hypertension，PH）是一种以肺动脉压力进行性升高，继而引发右心室肥大、右心功能衰竭并最终导致患者死亡的临床病理生理综合征。目前国际上认可的肺动脉高压的诊断标准为：在海...
- 李美婵
- 关键词：肺动脉高压P53蛋白蛋白表达
- 小鼠肺动脉平滑肌细胞的原代培养方法及其功能学特性研究
- 目的 建立小鼠肺动脉平滑肌细胞的体外分离、原代培养及鉴定方法，并研究其功能学特性。方法 采用酶联合消化法对 PASMCs 进行体外培养。在倒置显微镜下观察 PASMCs 的生长特点;免疫荧光染色法鉴定原代细胞;激光共聚焦...
- 李美婵张晨婷陈豫钦江倩黄君怡吴雄婷卢文菊王健
- 关键词：原代培养
- 尼古丁通过上调大鼠远端肺动脉平滑肌细胞烟碱型乙酰胆碱受体α7亚基的表达增加细胞内钙离子浓度
- 目的 探讨尼古丁刺激参与PASMCs中钙稳态调节的机制，为防治呼吸疾病相关的肺动脉高压寻找有效靶点。方法 建立原代肺动脉平滑肌细胞模型：(1)利用细胞内钙浓度检测系统，检测尼古丁对大鼠PASMCs的基础[Ca2+]i和S...
- 陈豫钦李美婵黄君怡王健
- 关键词：尼古丁钙离子烟碱型乙酰胆碱受体
- 17β-雌二醇对慢性低氧性肺动脉高压雌性大鼠模型的治疗作用
- 2018年
- 目的研究腹腔注射17-β雌二醇对慢性低氧性肺动脉高压雌性大鼠模型的疗效及安全性。方法 32只SD雌性大鼠随机分为常氧组(A组)、常氧+17β-雌二醇干预组(B组)、低氧组(C组)、低氧+17β-雌二醇干预组(D组)。A组、B组置于SPF级动物房内饲养,而C组、D组置于全自动常压低氧箱中,持续低氧[氧浓度为(10.0±0.5)%]28 d。从实验第1天开始,B组、D组按照100μg/(kg·d)的剂量腹腔注射17β-雌二醇;A组、C组腹腔注射相同体积的麻油。28 d后,测定大鼠右心室收缩压(RVSP)及平均右心室压(mRVP);取心脏测右心肥厚指数;取肺组织包埋切片行HE染色观察,测定管壁厚度占外径的百分比(WT%)和管壁面积占血管总面积的百分比(WA%),观察肺小动脉血管形态组织病理学变化。结果慢性低氧明显诱导了雌性RVSP、mRVP和右心肥厚指数的升高,经过17β-雌二醇干预后,这种升高显著降低(P<0.05)。C组大鼠RVSP和mRVP分别为(33.4±2.4)mm Hg和(15.6±0.8)mm Hg,显著高于A组[(27.7±0.9)mm Hg、(11.5±0.9)mm Hg](P<0.05)。与C组相比,D组RVSP和mRVP显著降低[(27.1±4.9)mm Hg、(13.0±1.7)mm Hg](P<0.05)。A组和B组的右心肥厚指数为0.24±0.06和0.28±0.04;与A组比较,C组右心肥厚指数明显较高(0.39±0.02)(P<0.05);与C组相比,D组的右心肥厚指数(0.35±0.03)较低(P<0.05)。与A组比较,C组的WT%明显较高[(33.2±4.0)%](P<0.05);D组的WT%为(16.6±2.4)%,与C组比较差异有统计学意义(P<0.05)。C组的WA%由(17.91±2.5)%增加至(59.16±5.9)%(P<0.05);D组的WA%为(26.30±2.9)%,与C组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与A组和B组对比,C组肺小动脉管壁增生增厚,管腔变窄明显;但D组上述形态学改变较C组减轻。结论 17β-雌二醇能有效降低慢性低氧性肺动脉高压雌性大鼠模型的RVSP、改善右心室肥厚,对慢性低氧中的肺血管的重塑具有一定的改善作用,对低氧引起慢性肺动脉高压雌性大鼠模型具有较好的疗效。
- 邱逸超刘智超李露刘欣媛韦建缘尹雪冬李美婵王健陈豫钦
- 关键词：缺氧17Β-雌二醇
