邹丽云
- 作品数：93 被引量：281H指数：9
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学理学更多>>
- 小鼠肥大细胞瘤P815模型的建立与初步应用被引量：5
- 2000年
- 目的建立小鼠肥大细胞瘤 P815种植瘤模型 ,并对其体内诱发特异性 CTL应答机理进行初步的研究。方法经有限稀释法筛选 P815单克隆瘤系 ,用 RT- PCR及产物 DNA测序鉴定肿瘤抗原 P1A基因的表达 ;在此基础上 ,用活瘤苗免疫同系小鼠 ,经标准 5 1 Cr释放试验检测在体特异性 CTL的活性。结果筛选出了一个 P815单克隆成瘤系 P815 - F3,并鉴定该瘤存在 P1A基因的表达 ;用活瘤疫苗免疫 6只小鼠 ,在 3只体内诱发出了特异性 CTL 应答。结论本研究成功地建立了 P815肿瘤模型 ,对体内特异性抗瘤 CTL效应的诱发和检测做了初步的研究 。
- 邹丽云吴玉章贾正才万瑛赵建平
- 关键词：肿瘤免疫免疫应答CTL
- 慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群CD27和CD28的表达被引量：5
- 2006年
- 目的分析慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群CD27和CD28的表达,初步探讨其分化表型。方法采集分离健康人和慢性乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC),利用多种荧光标记抗体标记细胞表面分子,再用流式细胞仪检测CD8+和CD4+T淋巴细胞表面CD27和CD28分子的表达。结果31例慢性乙型病毒性肝炎患者CD8+CD27+CD28+T细胞占CD8+T细胞(41.13±24.89)%,低于28例健康对照组的(71.93±14.47)%(P<0.05)。而CD8+CD27-CD28-T细胞占CD8+T细胞(42.16±10.98)%,显著高于健康对照组的(9.16±5.24)%(P<0.01)。慢性乙型病毒性肝炎患者CD4+CD27+CD28+T细胞(80.89±7.93)%和健康对照组(83.17±8.31)%比较,差异无统计学意义。结论健康人外周血T淋巴细胞以CD27+CD28+早期分化表型为主。而慢性乙型病毒性肝炎患者外周血中不同的亚群分化特征又有所不同,CD4+T淋巴细胞的分化表型仍然以CD27+CD28+早期分化表型为主,而CD8+T淋巴细胞中早期分化表型明显减少,晚期分化表型(CD27-CD28-)显著增加。
- 赵婷婷杨智清郭波邹丽云韩俊峰吴玉章
- 关键词：慢性乙型病毒性肝炎T淋巴细胞CD27CD28
- 导读式教学在蛋白质组教学中的运用
- 2015年
- 随着蛋白质组相关研究的迅速发展,新观念和新技术的不断出现和更新,传统的教学模式已经远远不能满足蛋白质组学的教学要求。开展文献导读式教学,能让学生更好地了解蛋白质组的进展和相关技术,激发学生学习兴趣,降低学习难度及提高教学效果。
- 郭波邹丽云吴玉章
- 关键词：医科蛋白质组学教学方法
- 利用分子模拟技术筛选HLA-A2限制性CTL表位肽被引量：4
- 2003年
- 以肿瘤抗原MAGE-2为例,运用分子模拟方法对其4个优势候选HLA-A2限制性CTL表位进行初步鉴定,再通过多肽结合实验对鉴定结果进行验证.结果表明,4个候选肽中有3个与HLA-A2分子有较好的亲和力,进一步进行体外诱导CTL效应实验显示,3个高亲和力的表位肽可在体外有效诱导特异性CTL效应.利用计算机辅助鉴定CTL表位,克服了以往筛选肽要将肽逐一洗脱下来的繁琐实验过程,并且可直接观测到多肽复合物的结合模式,该技术在筛选大量优势CTL表位中具有较大的应用价值.
- 耿淼吴玉章林治华贾正才周伟邹丽云
- 关键词：分子模拟免疫抗原递呈
- β2M-绿色荧光蛋白在MHC-Ⅰ肽亲和力实验中的应用被引量：2
- 2009年
- 目的构建并表达β2微球蛋白-绿色荧光蛋白融合蛋白,并应用该蛋白建立一种全新的MHC-Ⅰ肽亲和力实验方法。方法构建β2M-ZsGreen-6×His标签的融合蛋白真核表达质粒,转染293FT细胞表达,并以镍亲和层析法纯化,将该融合蛋白与表位肽共同与T2细胞反应,通过流式细胞术检测T2细胞标记绿色荧光的情况鉴定表位。结果构建了β2微球蛋白-绿色荧光蛋白真核表达质粒并表达、纯化得到融合蛋白,该蛋白可应用于亲和力实验,进行表位鉴定。结论β2微球蛋白-绿色荧光融合蛋白应用于亲和力实验鉴定CTL表位方法可行,步骤简便,适用于大通量表位鉴定。
- 熊锐华王昊亮邹丽云李景怡张晋宇张荣华万瑛
- 关键词：绿色荧光蛋白融合蛋白T细胞表位
- Rab4蛋白参与DC细胞内源性抗原递呈被引量：4
- 2007年
- 目的建立稳定表达卵白蛋白的DC细胞株DC-OVA,研究Rab蛋白对DC内源抗原递呈的影响。方法首先构建含OVA蛋白基因慢病毒表达质粒pLentimycOVA;以DNA-磷酸钙共沉淀法转染293FT细胞制备慢病毒,用病毒感染DC2.4细胞及杀稻瘟毒素(Blasticidin)筛选方法建立稳定表达OVA的细胞株,Western blot鉴定DC-OVA细胞中OVA蛋白表达;然后用识别MHC I类分子-OVA肽复合物的T细胞杂交瘤B3Z细胞以及针对该复合物的单抗25D1.16检测DC-OVA细胞表面MHC-OVA肽复合物的形成情况,建立内源性抗原呈递的检测方法;最后采用脂质体法转染化学合成的Rab4、Rab5A、Rab7、Rab11的siRNA于DC-OVA中,B3Z检测DC内源抗原递呈的变化。结果酶切和测序分析证实转移质粒克隆成功,Western blot可在DC-OVA细胞中检测到OVA蛋白,B3Z细胞和25D1.16单抗可检测到DC-OVA细胞表面存在MHC I类分子-OVA表位多肽复合物,表明内源性抗原呈递系统成功建立。在此基础上,发现下调DC细胞中Rab4蛋白的表达,DC-OVA细胞刺激B3Z生成IL-2(白细胞介素2)的量明显下降。结论成功构建了OVA蛋白的慢病毒表达载体,获得了表达内源OVA蛋白的DC细胞株,建立了内源性抗原呈递系统,初步证实下调Rab4蛋白可抑制DC细胞的内源性抗原递呈,为病毒感染和肿瘤等疾病的治疗奠定了基础。
- 柴琳琳万瑛邹丽云张晋宇李娜刘婷李景怡吴玉章
- 关键词：OVA内源抗原递呈
- 小鼠肥大细胞瘤P815特异抗原P1A的克隆与表达被引量：5
- 2000年
- 目的 克隆小鼠肥大细胞瘤P815细胞株的P1A基因以制备肿瘤DNA疫苗。方法 用RT PCR方法制备P1A基因 ,以哺乳细胞高效表达质粒pCI neo为载体 ,构建重组DNA疫苗。重组体用克隆位点上游和下游的T7和T3启动子序列为测序引物 ,用自动测序仪测序鉴定克隆的正确性。再将鉴定过的重组质粒用磷酸钙法转化 2 93细胞 ,用RT PCR法鉴定转化细胞中P1A基因的表达。结果 正确构建了P1A/pCI neo重组质粒 ,并且在转化此质粒的 2 93细胞中检测出了P1A的表达。结论 成功地构建了重组P1A/pCI neo肿瘤疫苗 。
- 倪兵吴玉章唐艳邹丽云万瑛赵建平
- 关键词：RT-PCR肥大细胞瘤克隆DNA疫苗
- 含CpG寡聚脱氧核苷酸对肿瘤抗原肽P815AB的免疫佐剂效应研究被引量：11
- 2000年
- 目的 以肿瘤抗原P815AB抗原肽为模式抗原 ,研究CpG寡聚脱氧核苷酸 (CpGODN)对该肿瘤抗原表位肽的免疫佐剂效应。方法 用 [3H ] TdR掺入法研究CpGODN体外刺激小鼠脾细胞增殖效应 ,用ELISPOT和 [3H] TdR释放法检测不同构成形式的疫苗在体诱发特异性CTL应答的效应。结果 ODN182 6在体外可刺激小鼠脾细胞显著增殖。经 4次免疫 ,在“肽 +ODN182 6 +IFA”组中 ,4/6的小鼠体内出现了特异性CTL应答 ;在“肽 +ODN182 6 +PBS”组 ,有 3只小鼠在完成 4次免疫前先后死亡 ,余 3只中有 1只体内也可检测到相应CTL反应 ;而对照“肽 +IFA”组 ,6只小鼠体内均未诱发出特异性CTL应答。结论 CpGODN对P815AB表位肽有较为理想的免疫佐剂效应 ,但疫苗构成形式对其免疫效果有着决定性的作用 ,“肽 +ODN182 6 +IFA”是本研究中最有效的疫苗形式 。
- 赵建平吴玉章万瑛贾正才周伟邹丽云刘月明
- 关键词：CPG寡聚脱氧核苷酸肿瘤抗原肽
- 一种新Pre-S_(2)合成肽CTL表位糖基化方法
- 2000年
- 目的 为研究HBVPre S( 2 ) 上糖基化 (Glycosylation)结构差异 (包括位置、种类、数量和糖链长度差异 )与其生物学活性关系 ,建立一种N 或O 连接糖基化以外的合成肽α 和ε 氨基糖基化方法。方法 用化学方法将单、双和聚糖共价连接在Pre S( 2 ) 合成肽上的含α 和ε 氨基的氨基酸残基上 ,即具体连接在肽N端M1的α 氨基和K16的ε 氨基上。此二氨基酸残基位于或接近Pre S( 2 ) 上公认的一个CTL表位 ,氨基酸残基 1～ 15。结果 Pre S( 2 ) 合成肽聚糖 (Mannan)、单糖 (GalNAc)和双糖 (Glc Gal)糖基化的收益率分别为2 4.0 %、2 4.5 %和 2 1.0 %。经还原处理后 ,稳定性显著增加。HPLC图谱显示一包容峰。结论 结果显示此方法具较高的糖基化效率 ,为研究Pre S2 糖肽免疫学活性提供了一种新手段。但存在糖基化的均一性欠佳 。
- 周吉军王祥智吴玉章邹丽云周伟
- 关键词：糖基化多肽合成CTL表位乙型肝炎
- γ干扰素对宫颈癌治疗性脂肽疫苗抗肿瘤作用的研究被引量：2
- 2004年
- 目的 :研究γ干扰素对宫颈癌治疗性脂肽疫苗的抗肿瘤作用的影响 ,并对其作用机制进行探讨。方法 :采用细胞毒性试验观察不同剂量γ干扰素对宫颈癌治疗性脂肽疫苗的抗肿瘤作用的影响 ,采用流式细胞术检测宫颈癌细胞HLA -A2分子和CD54的表达。结果 :γ干扰素可剂量依赖性地增强宫颈癌治疗性脂肽疫苗的抗肿瘤作用 ;同时也增加了宫颈癌细胞HLA -A2及CD54分子的表达。结论 :γ干扰素可增强宫颈癌治疗性脂肽疫苗的抗肿瘤作用 ,其作用机制与其上调宫颈癌细胞表面HLA -A2分子和CD54分子表达有关。
- 徐道华夏永鹏邱宗荫吴玉章贾正才邹丽云周伟
- 关键词：Γ干扰素宫颈癌药物治疗
