吕萍
- 作品数：7 被引量：68H指数：3
- 供职机构：山东大学医学院医学遗传学研究所更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小鼠Lrp5基因启动子的克隆及功能分析被引量：3
- 2005年
- 为分析小鼠LDL受体相关蛋白 5 (Lrp5 )基因启动子的结构与功能 ,采用DNA重组技术 ,构建了 7种含小鼠Lrp5基因启动子荧光素酶报告基因表达体系 ,分别为 :pGL3 10 3(- 10 3bp～ + 132bp) ,pGL3 30 3(- 30 3bp～ + 132bp) ,pGL3 4 99(- 499bp～ + 132bp) ,pGL3 70 8(- 70 8bp～ + 132bp) ,pGL3 90 9(- 90 9bp～ + 132bp) ,pGL3 10 34(- 10 34bp～ + 132bp ) ,pGL3 12 2 9(- 12 2 9bp～ + 132bp) .以pRL TK为内参照质粒 ,瞬时转染成骨细胞株 (U2OS )及非成骨细胞株 (COS 7) ,收集细胞测定荧光素酶相对表达活性 .7种荧光素酶表达质粒在 2种细胞中表达无显著差异 ,即在所分析的小鼠Lrp5基因的 136 1bp(- 12 2 9bp～ + 132bp)范围内 ,不存在成骨细胞特异的表达元件 ;而且 7种表达质粒在 2种细胞中呈现相似的变化趋势 ,pGL3 10 3表达活性最高 ,pGL3 12 2 9表达活性显著降低 .表明小鼠Lrp5基因转录所必需的基本启动子序列在 - 10 3bp～ + 1bp范围内 ,- 10 34bp～ - 12 2 9bp之间的 195bp片段内可能含有负调控元件 .
- 吕萍龚瑶琴李江夏周海斌陈丙玺
- 关键词：小鼠启动子
- 小鼠Lrp5基因基本启动子分析被引量：1
- 2004年
- 目的:研究小鼠Lrp5基因基本启动子。方法:PCR扩增小鼠Lrp5基因基本启动子序列,构建荧光素酶报告基因表达体系,以PRL鄄TK为内参照质粒,瞬时转染COS鄄7细胞熏48h后收集细胞测定荧光素酶相对表达活性。结果:在小鼠Lrp5基因基本启动子区域,构建了三种荧光素酶报告基因表达体系pGL3鄄16(鄄16bp～+132bp)、pGL3鄄54(鄄54bp～+132bp)和pGL3鄄103(鄄103bp～+132bp)。pGL3鄄103表达载体的相对荧光素酶活性最高;pGL3鄄54的相对荧光素酶活性是pGL3鄄103表达载体的80%;而pGL3鄄16相对荧光素酶表达活性急剧下降,与阴性对照pGL3鄄basic的活性相近,无启动子活性。结论:鄄54bp～鄄16bp区域内含有小鼠Lrp5基因转录所必需的基本启动子序列,其中三个SP1保守序列是小鼠Lrp5基因基本启动子所必需的。
- 吕萍龚瑶琴李江夏周海斌陈丙玺
- 关键词：基因小鼠
- 小鼠Lrp5基因5′端调控区域的功能
- 2005年
- 为研究小鼠低密度脂蛋白(LDL)受体相关蛋白5(LRP5)基因5′端调控序列的功能,PCR扩增小鼠Lrp5基因翻译起始位点上游3041bp(-2909bp^+132bp)DNA序列.PCR产物定向克隆到pGL3-basic载体上,重组质粒命名为pGL3-2909.以pGL3-2909质粒为模板,以不同的引物扩增出不同长短的DNA片段,分别定向克隆到含小鼠Lrp5基因基本启动子并含有荧光素酶报道基因的pGL3-103载体上,构建了12种荧光素酶报告基因表达体系:pGL3-267,pGL3-513,pGL3-535,pGL3-560,pGL3-575,pGL3-623,pGL3-645,pGL3-719,pGL3-770,pGL3-1032,pGL3-1330,pGL3-1619.以pRL-TK为内参照质粒,瞬时转染COS-7细胞,48h后收集细胞测定荧光素酶相对表达活性,pGL3-575(-2909bp^-2334bp)活性是pGL3-513(-2909bp^-2396bp)的20%,pGL3-535(-2909bp^-2374bp)的活性是pGL3-513的44%,pGL3-575的活性是pGL3-560(-2909bp^-2349bp)的48%,均有显著性差异.结果表明,在-2396bp与-2374bp之间的22bp区域内以及-2349bp与-2334bp之间的15bp区域内存在负调控元件.软件分析表明,此区域含有IK2,LYF1及MZF1调控元件.
- 吕萍龚瑶琴李江夏周海斌陈丙玺
- 关键词：小鼠
- 小鼠LRP5基因负调控区分析
- 2007年
- 为研究小鼠LRP5基因-1 229 bp^-1 034 bp之间存在的负调控区,在此区域内构建了3种荧光素酶报告基因表达载体,即pGL3-1229(-1 229 bp^-914 bp),pGL3-1130(-1 130 bp^-914 bp)及pGL3-1051(-1 051 bp^-914 bp)。以PRL-TK为内参照质粒,瞬时转染COS-7,48 h后收集细胞测定荧光素酶相对表达活性。结果表明pGL3-1229质粒的相对荧光素酶活性是pGL3-1130的26%,有显著性差异。在-1 229 bp^-1 130 bp之间存在负调控元件,软件分析COUP可能是小鼠LRP5基因的负调控元件,有待进一步突变分析证实。
- 吕萍龚瑶琴李江夏周海斌陈丙玺
- 关键词：小鼠
- 三七叶苷降脂作用的实验研究被引量：52
- 2004年
- 目的研究三七叶苷对家兔血脂的影响。方法采用喂养法建立食物性高脂血症家兔模型 ,给予不同剂量的三七叶苷和非诺贝特 ,测定多项生化指标。结果三七叶苷可明显降低血清胆固醇和甘油三酯的含量 ,显著提高血清高密度脂蛋白胆固醇与胆固醇的比值。结论三七叶苷对食物性高脂血症具有一定的治疗作用 ,其降脂作用与非诺贝特相近。
- 吕萍陈海峰
- 关键词：调脂作用高密度脂蛋白
- 微RNA:一类新的基因调控因子被引量：1
- 2003年
- 微RNA是新发现的一类非编码RNA分子 ,在动植物细胞中广泛表达 ,它的基因是短的反向重复序列。一般认为微RNA参与调控mRNA的翻译 ,并与其稳定性有关。微RNA可能在细胞中起着非常重要的作用。
- 付汉江江红吕萍郑晓飞
- 关键词：微RNA非编码RNA基因表达
- 毛细管区带电泳法快速测定复方氯唑沙宗片中两组分含量被引量：12
- 2003年
- 目的：建立毛细管区带电泳快速测定复方氯唑沙宗片中2组分含量的方法。方法：采用熔融石英毛细管柱，以0．05mol·L^-1Tris(1mol·L^-1磷酸调pH7．3）为运行缓冲液，分离电压为24．0kV，检测波长220nm，柱温40℃，真空进样1s。以苯巴比妥为内标，在5min内完成复方氯唑沙宗片中氯唑沙宗和对乙酰氨基酚含量测定。结果：2组分线性范围分别为0．1－0．6mg·mL^-1(r=0.9989)和0．12－0．72mg·mL^-1(r=0.9993)，平均回收率分别为98．5％和101．5％，RSD为1．0％和1．7％。结论：该方法可用于控制复方氯唑沙宗片的质量，具有快速、准确、简便等优点。
- 陈海峰吕萍
- 关键词：毛细管区带电泳法复方氯唑沙宗片氯唑沙宗对乙酰氨基酚
