孟淑芳
- 作品数:80 被引量:221H指数:9
- 供职机构:中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 小鼠短串联重复序列的复合扩增体系及检测试剂盒
- 本发明涉及小鼠短串联重复序列的复合扩增体系及检测试剂盒,属于生物检测技术领域。本发明选择了9个具有高度灵敏性及扩增特异性的小鼠STR位点,一次性扩增,其扩增的位点是一些可以用来鉴定小鼠细胞系的STR位点,在鉴定小鼠细胞系...
- 孟淑芳樊金萍徐苗吴雪伶吕悦心陈初光赵翔冯建平
- 文献传递
- 噬菌体随机肽库分析HIV-1 p24抗原表位被引量:1
- 2003年
- 目的 利用噬菌体随机肽库分析抗HIV 1核心区抗原p2 4单抗在抗原上的识别位点。方法 用抗HIV 1p2 4单抗 2C7和 3H10作为筛选分子 ,对噬菌体肽库进行生物淘洗 (biopanning) ,并通过DNA测序、ELISA效价测定等对所获得的噬菌体克隆进行鉴定 ,最后对合成的 7肽位点通过间接ELISA及竞争抑制试验进行血清学分析。结果 序列分析结果表明 ,单抗 2C7和 3H10在HIV 1p2 4上的抗原识别表位的保守序列分别为DHPXPXX和XXXXKAF。分别合成这 2个 7肽氨基酸序列P C1(DHPSPWG)和P H3(SPWLKAFGGGS) ,并分析其免疫学结合特性 ,结果表明与P H3相比 ,单抗 2C7的抗原识别表位P C1的固相结合特性较好 ,固相P C1检测血样 ,13份抗HIV阳性样本中 ,12份为阳性(检出率为 92 .3% ) ,19份抗HIV阴性样本中 ,仅 1份为假阳性结果 (特异性为 94.7% )。与P C1相比 ,单抗 3H10的抗原表位P H3的固相结合能力极差 ,但液相结合活性较好 ,血样与P H3的抑制试验表明 ,13份抗HIV阳性样本中 12份样本对P H3的抑制率大于 6 0 % (12 13) ,而 9份抗HIV阴性样本中仅 1份对P H3的抑制率大于 5 0 %。结论 用抗HIV 1p2 4单抗筛选噬菌体随机肽库 ,获得单抗在p2 4抗原上的识别表位的氨基酸序列 ,血清学结果表明这 2个抗原表位存在于p2 4自然抗原上 。
- 孟淑芳李秀华尹红章宋爱京李德富
- 关键词:HIV-1噬菌体随机肽库单克隆抗体艾滋病毒
- 生物制品病毒安全性控制的核心理念探讨被引量:4
- 2020年
- 生物制品的一个共同特点就是存在病毒污染的风险性。近年来,我国生物药物产业发展迅猛,随着新技术的发展以及越来越多的生物制品被批准,使用人群不断扩大,对生物制品的安全性问题提出了更高要求。与此同时,国内外关于生物制品病毒安全性控制,已经出台了一系列技术要求和指导原则。本文分析了国内外生物制品病毒安全性控制的法规,归纳提炼了可能的生物制品病毒安全性控制核心理念,可为技术法规的建立和生物制品质量控制提供参考。生物制品病毒污染的安全性只有通过贯彻病毒安全性控制理念,采取综合措施,才能得到确切的保障。
- 郭怀祖杨美花杨汇川公雪杰侯盛张华捷李长清董关木李敏孟淑芳侯继锋郭中平
- 关键词:生物制品病毒安全性病毒污染
- 重组鼠源性细胞鼠细小病毒(MMV)检测方法的建立及应用
- 目的:建立重组细胞中鼠细小病毒检测的NB324K感染试验及实时荧光定量PCR检测方法,并分别进行了方法学分析。方法:将不同稀释度的MMV悬液分别感染NB324K细胞,通过观察细胞病变和结晶紫染色结果检测NB324K感染法...
- 吴雪伶樊金萍林林冯建平孟淑芳李德富
- 关键词:细小病毒荧光定量PCR重组细胞
- 文献传递
- 鼠抗丙型肝炎病毒(HCV)NS3区单克隆抗体的研制及特性分析被引量:1
- 1995年
- 用淋巴细胞杂交瘤技术,制备出5株抗HCV-NS3区单克隆抗体(McAb),分别命名为C7-1,3,6,8,9。单抗特性测定结果显示5株单抗均为HCV-NS3区特异性,与HCV其它区域的抗原及宿主茵成份均无交叉反应;此5株单抗识别NS3区上两个不完全相关的抗原位点,其中C7-1,3,6株识别同一抗原决定簇;C7-9的识别位点与此3株有一定的相关;C7-8则识别与此4株不完全相关的位点。HCV-NS3抗体阳性病人血清对3株单抗显示不同程度的竞争抑制作用,揭示自然抗原上存在这两个不完全相关的抗原位点,并为单抗进一步分析HCV自然抗原及感染提供了理论基础。
- 孟淑芳李秀华张宁尹红章李德富
- 关键词:单克隆抗体丙型肝炎病毒
- 人乳头瘤病毒(HPV)L2肽免疫小鼠诱导的抗体水平与保护作用的关系研究被引量:2
- 2010年
- 目的 检测HPV-58 L2 11~200 AA肽在动物体内对HPV的保护效果,并分析疫苗诱导的抗体滴度或中和抗体滴度与疫苗保护作用之间的对应关系.方法 利用大肠杆菌表达HPV-58L2 11~200 AA肽,纯化目的 蛋白并与铝佐剂吸附后免疫小鼠,利用小鼠HPV-58假病毒感染模型检测不同剂量的免疫原对小鼠的保护作用.通过ELISA和假病毒中和抗体检测方法 检测免疫血清中的总抗体水平和中和抗体水平,分析具有保护作用的抗体或中和抗体滴度.结果 当蛋白免疫剂量为8μg时,能够完全保护小鼠不受HPV假病毒的感染.小鼠免疫血清中的中和抗体水平较低,利用已建立的假病毒中和试验方法 检测不到血清中的中和抗体.而利用ELISA检测血清中的总抗体水平结果 显示,免疫血清中的总抗体水平与疫苗的保护效果之间存在对应关系,当抗体滴度大于等于1:25 000时,小鼠体内检测不到荧光信号,能够保护机体不受假病毒的感染.结论 HPV-58 L2 11~200 AA肽能够保护小鼠不受假病毒的感染,L2 11~200 AA肽具有较好的疫苗发展前景,其引发的总抗体水平可以作为评价保护效果的间接指标.
- 吴雪伶崔俊生孟淑芳李保卫张春涛樊金萍邵荣光王佑春
- 关键词:人乳头瘤病毒假病毒中和抗体
- 抗百日咳丝状血凝素单克隆抗体的制备、鉴定与应用研究
- 目的:制备抗百日咳丝状血凝素(FHA)的单克隆抗体(McAbs),并建立特异、准确的FHA定量检测方法。 方法:采用杂交瘤技术制备McAb,以问接ELISA法筛选获得稳定分泌抗FHA-McAbs的杂交瘤细胞株,并进行了系...
- 徐颖华孟淑芳张庶民侯启明雷殿良
- 关键词:无细胞百日咳疫苗丝状血凝素单克隆抗体ELISA生物制品
- 文献传递网络资源链接
- 流感疫苗生产用新型细胞基质 MDCK细胞的质量控制研究被引量:6
- 2013年
- 目的:对流感疫苗生产用新型细胞基质MDCK细胞进行全面地质量控制检测,并对检测项目及结果进行汇总和分析。方法根据《中国药典》三部,对待检MDCK细胞进行细胞鉴别、内、外源因子和致瘤性检测,同时根据国际新要求对MDCK细胞的裂解物及细胞DNA的致癌性进行检测。结果待检MDCK细胞为贴壁、上皮样细胞形态,犬细胞来源,平均染色体数为80±1;未发现细菌、真菌、支原体污染,内、外源病毒的污染检测结果显示,待检细胞中未发现有致细胞病变、产生血吸附、血凝或致动物死亡的非特异性病毒,逆转录病毒、牛源性病毒和犬特异性病毒检测均为阴性;取107个活细胞接种每只裸鼠,观察12周后,接种部位未发现结节,大体解剖显示主要脏器亦未出现结节,病理检查显示与对照组无明显差异,细胞未显示具有致瘤性。以等量细胞的裂解物和细胞DNA接种裸鼠,均未致裸鼠产生结节,病理检查结果与对照组无明显差异,提示细胞未显示致癌性。结论待检MDCK细胞具有生产流感疫苗的潜在可能性。
- 吴雪伶冯建平樊金萍李秀华付瑞孟淑芳
- 关键词:MDCK细胞鉴别
- STR图谱分析方法扩大用于人源细胞的鉴别研究被引量:5
- 2010年
- 目的采用短串联重复序列(STR)图谱分析的方法,建立本所细胞库中所有人源细胞的鉴别图谱,并进行细胞交叉污染及细胞误判现状分析的研究。方法采用16个位点的STR图谱分析方法,检测本所细胞库中所有收集保存的及其他单位来源的共计61株人源细胞,并将STR图谱检测结果与目前国际细胞库公布的数据进行比对,分析细胞的正确性及交叉污染情况。对未检出信号的细胞株,采用同工酶法对细胞的种属进行鉴别。结果被检测的61株细胞中,41株细胞呈现特征性STR图谱,不存在与其他细胞的交叉污染现象,其中36株细胞与ATCC或JCRB保存的同一名称细胞在相应的9个STR位点的数据完全一致,5株细胞均仅在vWA位点与ATCC数据不完全相同,可判定为正确细胞;7株细胞尚无国际可比对数据,但STR图谱特异,可认定为新建细胞。11株细胞(占18.0%)被鉴定为错误的细胞,其中舌癌细胞Tca8113及肝癌细胞HHCC(现更名为FHCC98)的STR图谱数据分别与HeLa及HeLa S3细胞的数据完全一致;2株HuT-102的数据与ATCC的数据完全不同;4株细胞未检测到信号,同工酶结果显示均为鼠源细胞;同时还发现2株细胞为交叉污染细胞。结论细胞误判及细胞交叉污染现象较为严重,正确鉴别细胞,特别是对国内自建细胞重新鉴定,对保证科学研究的可信性及可重复性极为重要。
- 吴雪伶冯建平吴瑜樊金萍孟淑芳李德富
- 关键词:细胞鉴别交叉污染
- 抗丙型肝炎病毒非结构区4抗原的单克隆抗体细胞株及其单克隆抗体
- 本发明建立了能分泌分别与非甲非乙型肝炎病毒的核心区、膜区、NS3、NS4及NS5区抗原具特异性的单克隆抗体的5个杂交瘤细胞株,并且得到了由这些杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体。用这些抗HCV的特异性单克隆抗体可以构建高敏感特...
- 李德富尹红章李秀华孟淑芳刘荧张宁
- 文献传递