曹智刚
- 作品数：9 被引量：7H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院特产研究所更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 应用宏基因组测序开展银黑狐真菌皮肤病分子流行病调查被引量：1
- 2016年
- 毛皮动物的皮肤真菌病也称癣病,是由于真菌感染皮肤、被毛后所致的疾病。主要症状是患部断毛、掉毛或出现圆形脱毛区,皮屑较多。该病是一种接触性人兽共患病。本研究以银黑狐真菌病患病皮肤样本为基础,以真菌内转录间隔区(Internal Transcribed Spacer,ITS)为靶标序列,应用宏基因组测序方式,对样本中所有真菌样本的ITS进行序列测定和生物学统计。结果显示,检测出致病真菌苯黑末节皮真菌(Arthroderma benhamiae),并且为优势菌株;基于ITS基因的系统发育树分析显示,样本内的真菌呈现出多样性特征,且苯黑末节皮真菌与发菌科(Trichocomaceae)在拓扑分类学上近似。
- 易立曹智刚仝明薇程悦宁程世鹏
- 关键词：银黑狐皮肤真菌内转录间隔区
- 水貂细小病毒性肠炎病原体抗原胶体金检测试纸条及其制备方法
- 水貂细小病毒性肠炎病原体抗原胶体金检测试纸条及其制备方法，涉及毛皮动物病毒性传染病病原的检测技术领域。本发明的胶体金检测试纸条包括：样品垫、金标垫、NC膜和吸收垫，所述NC膜的检测线上喷涂VP2蛋白，所述NC膜的质控线上...
- 王建科程悦宁张淼程世鹏林鹏赵航易立仝明薇曹智刚孙亚茹闫喜军陈立志
- 文献传递
- 抗犬瘟热病毒核蛋白单克隆抗体的制备及其线性抗原表位鉴定被引量：4
- 2017年
- 为制备犬瘟热病毒(CDV)单克隆抗体(MAb),本研究用腺病毒表达的CDV截短N蛋白(aa401~aa523)免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合并筛选到2株能够稳定分泌抗CDV N蛋白的MAb,命名为N1-C8和N1-C41。经间接ELISA测定N1-C8和N1-C41培养上清液及小鼠腹水效价分别为1∶1 024、1∶106和1∶512、1∶105。通过肽扫描的方法筛选出N1-C8的抗原表位为线性表位^(440)ENQGGDKYPIHFNDE454,但并未能够筛选出N1-C41的抗原表位,推测可能是因为其抗原表位为空间构象型。Western blot结果显示N1-C8和N1-C41两株MAb在识别CDV的不同毒力病毒株上有差异,可能与CDV强弱病毒株在N蛋白的差异变化有关。本研究两株MAb的制备为CDV不同毒力株的鉴别诊断提供了可能。
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- 关键词：犬瘟热病毒单克隆抗体免疫荧光
- 犬瘟热病毒胶体金免疫层析检测试纸条及其制备方法
- 本发明提供了犬瘟热病毒胶体金免疫层析检测试纸条及其制备方法，涉及胶体金检测试纸条技术领域，解决了现有的CDV检测技术存在的检测步骤繁琐、耗时，需要专业人员进行操作且检测主要依赖实验室的问题。该试纸条包括PVC底板，依次粘...
- 易立曹智刚程悦宁仝明薇王建科林鹏程世鹏闫喜军
- 文献传递
- 水貂细小病毒性肠炎病原体抗原胶体金检测试纸条及其制备方法
- 水貂细小病毒性肠炎病原体抗原胶体金检测试纸条及其制备方法，涉及毛皮动物病毒性传染病病原的检测技术领域。本发明的胶体金检测试纸条包括：样品垫、金标垫、NC膜和吸收垫，所述NC膜的检测线上喷涂VP2蛋白，所述NC膜的质控线上...
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- 文献传递
- 犬瘟热病毒截短P蛋白的表达及纯化被引量：1
- 2019年
- 为获得犬瘟热病毒(CDV)野毒株截短磷蛋白(aa232~507),以Asia 1型CDV-PS为基础,经PCR扩增得到P(aa232~507)基因,插入原核表达载体pEASY^R-Blunt E1中,构建重组原核表达载体pEASY^R-Blunt E1-CDV-P;将重组质粒转化到BL21感受态细胞中进行原核表达并对诱导条件进行优化;超声破碎最佳条件下的诱导产物经离心后对重组蛋白进行可溶性分析,随后用镍柱对重组截短P蛋白进行纯化并用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果显示:重组P蛋白大小约37 kDa,在IPTG终浓度0.1 mmol/L,诱导时间为8 h时,表达量最高;重组P蛋白以包涵体形式存在,经SDS-PAGE和Western blot鉴定,成功纯化出重组截短P蛋白;重组P蛋白具有良好的免疫反应性。本研究成功制备出CDV-PS截短P蛋白,为进一步P蛋白抗原表位的研究和CDV抗体诊断方法的研发奠定基础。
- 李爽易立程悦宁曹智刚林鹏程世鹏
- 关键词：犬瘟热病毒原核表达蛋白纯化
- 乌苏里貉TLR8基因的分子克隆、序列分析及组织表达分析
- 2016年
- 为了解乌苏里貉TLR8基因特点及其在不同组织中的表达水平,本研究利用RT-PCR和RACE技术克隆其c DNA全长序列,应用生物学软件分析该基因及预测其编码蛋白的特征,并对该基因在乌苏里貉不同组织中的表达水平进行检测。结果显示该基因全长3 191 bp,ORF全长3 117 bp,编码1 038 aa,含有Toll-like受体家族典型的结构域特征。同源性分析显示乌苏里貉TLR8基因核苷酸序列与犬同源性最高,达99.3%,与其他食肉目哺乳动物也具有较高的同源性,在89.2%-92.9%。组织表达分析显示TLR8基因在乌苏里貉各组织中广泛表达但表达量存在差异。本研究结果为进一步研究乌苏里貉抗病毒免疫及育种相关研究奠定了基础。
- 仝明薇易立程悦宁曹智刚王建科赵航林鹏程世鹏
- 关键词：乌苏里貉
- 规模化水貂场中多种病毒和细菌感染状况的PCR调查研究被引量：1
- 2016年
- 当前水貂场存在多种病毒、细菌感染的情况，导致众多病原体混合感染、潜伏感染，临床上往往呈现慢性经过，并不表现出典型症状，给水貂养殖产业带来巨大经济损失。为了了解目前规模化水貂养殖场疫病感染情况，研究人员从2015年6月一2015年9月，对内蒙古的某个规模化貂场的所有仔貂进行了随机采样，通过PCR方法，分别对诺如病毒（Norovims）、轮状病毒（Rotavirus）、腺病毒（Adenovirus）、细小病毒（尸nn切拥cs）、沙门氏菌属（Salmonella）、志贺氏菌属（Shigetla）、小肠耶尔森氏菌（Yersiniaenterocolitica）、气单胞菌属（Aeromonas）、铜绿假单胞菌（Pseudomonasae aeruginosa）和产气荚膜梭菌（Clostridiumpe（ringens）进行检测。结果显示，在192个粪便样品DNA中，气单胞菌属阳性样本16个（8．30％）、产气荚膜梭菌阳性样本11个（5．73％）、沙门氏菌属阳性样本38个（19．79％）、志贺氏菌属阳性样本6个（3．13％）、铜绿假单胞阳性样本1个（0．52％）、轮状病毒阳性样本2个（1．04％）。对疫病防控意义较大的铜绿假单胞菌PCR产物进行了序列测定和系统发育树分析，结果显示，该菌株与GenBank其他铜绿假单胞菌距离较远，显示以水貂为宿主的铜绿假单胞菌有着独特的拓扑分类地位。
- 易立曹智刚仝明薇程悦宁王建科赵航林鹏程世鹏
- 关键词：水貂病原体
- 狐狸浅表致病性真菌感染ITS宏基因组测序分析
- 引言毛皮动物的皮肤真菌病也称癣病,是由于真菌感染皮肤、被毛和四肢后所致的疾病。主要症状是患部断毛、掉毛或出现圆形脱毛区,皮屑较多,该病是一种接触性人兽共患病。目前,已有多起人感染毛皮兽真菌引起皮肤病的报道,但是至今为止,...
- 易立曹智刚仝明薇程悦宁程世鹏
