刘秀芬
- 作品数：11 被引量：35H指数：2
- 供职机构：湖北科技学院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 浅谈我国实验动物福利存在的问题
- 动物实验在医学研究上越来越受到重视，是医学发展的主要途径和最有效的手段，对人类健康有着十分重要的意义。一方面在多数医学实验研究上实验动物不可避免的承受着实验带来的惊吓、痛苦、疼痛，甚至死亡，这与生命伦理的平等、尊重的基本...
- 刘秀芬吴宁华
- 关键词：实验动物福利
- 雷公藤红素改善2型糖尿病大鼠肝纤维化的机制探讨
- 2024年
- 目的:探讨雷公藤红素(CEL)对2型糖尿病(T2DM)所致的肝纤维化的改善作用及其内在机制。方法:建立T2DM大鼠模型,将24只雄性SD大鼠分成4组,即空白对照(Con)组、对照给药(CEL)组、模型(T2DM)组和模型给药(T2DM+CEL)组。每周监测各组大鼠体质量和空腹血糖(FBG),T2DM造模成功2周后给予CEL 3 mg/(kg·d)灌胃,1次/天持续12周,检测血清空腹胰岛素(FINS)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)及肝组织羟脯氨酸(Hyp)水平。肝组织切片行Masson染色和天狼猩红染色,观察肝组织纤维化程度和胶原蛋白沉积。Western blot检测肝组织α-SMA、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、沉默信息调节因子1(SIRT1)、TGF-β1和Smad3的蛋白表达变化。结果:与Con组比较,T2DM组大鼠24 h尿量、FBG、FINS、AST、ALT、Hyp水平均升高(P<0.001);胶原容积分数(CVF)升高(P<0.001);肝组织α-SMA、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、TGF-β1、Smad3蛋白表达量均升高(P<0.05),SIRT1蛋白表达量降低(P<0.01)。与T2DM组相比,给予CEL后大鼠24 h尿量、FBG、FINS、AST、ALT、Hyp水平均降低(P<0.05);肝组织胶原沉积减少,纤维化状况改善;肝组织SIRT1表达升高(P<0.05),纤维化相关蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论:CEL可减轻T2DM大鼠肝脏组织的纤维化,其机制可能与调控SIRT1、抑制TGF-β/Smad信号通路有关。
- 周巧逢雷敏郭西英何昂刘秀芬李敏才
- 关键词：雷公藤红素2型糖尿病肝纤维化TGF-Β/SMAD
- 赖氨酸甲基化酶SET7对细胞葡萄糖摄取能力的影响
- 2020年
- [目的]探讨SET甲基转移酶7(SET domain containing lysine methyltransferase 7,SET7)对葡萄糖转运载体4(glucose transporter 4,GLUT4)甲基化水平及细胞葡萄糖摄取能力的影响。[方法]通过蛋白甲基化及短肽甲基化实验,明确SET7对GLUT4的甲基化位点;在人胚肾上皮细胞293T中通过siRNA手段沉默SET7蛋白的表达水平,并分别通过蛋白免疫印迹和2-脱氧-^3H-D-葡萄糖掺入实验检测GLUT4蛋白在细胞内的亚定位及其对细胞葡萄糖摄取能力的影响。[结果]蛋白甲基化实验表明SET7能够促使GLUT4(1~100aa)这一片段发生甲基化,进一步的短肽甲基化实验证实SET7能够促使GLUT4-K50位点发生单甲基化(K50me);沉默SET7后可限制细胞浆中的GLUT4转移至细胞膜;与对照组相比,SET7沉默组细胞葡萄糖摄取效率降低了76%,经t检验分析,这种差异有统计学意义(P<0.001)。[结论]SET7可促进GLUT4-K50位点发生单甲基化,沉默SET7后可限制细胞浆中的GLUT4转移至细胞膜,并降低细胞对葡萄糖的摄取。
- 田晓玲朱栋良刘秀芬陈莉刘满华王雅洁汪甜何瑶
- 关键词：甲基化修饰
- 一种融合基因、表达载体及抗糖尿病药物筛选方法
- 本发明公开了一种融合基因、表达载体及抗糖尿病药物筛选方法，该方法以真核表达载体pCDNA3.1为基础，插入人工合成的EBFP2‑T2A‑SGLT2融合基因而获得新的表达载体pBTS，转染HEK293细胞而获得同时表达蓝色...
- 刘超杨晓松刘秀芬张飞雪
- TGF-β/Smads信号通路在姜黄素改善糖尿病大鼠心肌纤维化中的作用被引量：27
- 2018年
- 目的探讨TGF-β/Smads信号通路在姜黄素改善糖尿病心肌纤维化中的作用。方法高糖高脂饮食联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)35 mg·kg^(-1)建立2型糖尿病大鼠模型,自由饮用300 mg·kg·d^(-1)姜黄素进行干预;天狼猩红染色检测各组大鼠心肌内胶原表达情况;免疫荧光检测各组大鼠心肌内CollagenⅠ和CollagenⅢ的表达情况;葡萄糖(5.5、20、25、30、35、50 mmol·L^(-1))刺激大鼠乳鼠心肌成纤维细胞(CFs)24 h确定最佳高糖造模浓度;30 mmol·L^(-1)高糖加姜黄素(10、25、50、100、200μmol·L^(-1))刺激CFs 24h确定最佳姜黄素给药浓度;Western blot法检测细胞内CollagenⅠ、CollagenⅢ、TGF-β1、p-Smad2、Smad2、p-Smad3、Smad3、TβR-Ⅲ的蛋白表达水平。结果相比于正常组,糖尿病组大鼠心肌组织胶原出现明显沉积,CollagenⅠ和CollagenⅢ表达明显增多,给予姜黄素治疗后,糖尿病大鼠心肌组织胶原沉积明显减少,CollagenⅠ和CollagenⅢ表达明显减少;30 mmol·L^(-1)高糖刺激CFs 24 h可以明显促进细胞增殖(P<0.05);而10μmol·L^(-1)姜黄素可以明显抑制高糖诱导的CFs增殖(P<0.05);30 mmol·L^(-1)高糖诱导CFs24 h以后,CollagenⅠ、CollagenⅢ、TGF-β1、p-Smad2、pSmad3、TβR-Ⅲ的蛋白表达明显增多(P<0.05),给予25μmol·L^(-1)姜黄素以后,上述各蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。结论姜黄素可通过TGF-β/Smads信号通路改善糖尿病大鼠心肌纤维化,对糖尿病大鼠心肌具有保护作用。
- 沈豪郭霜刘秀芬鲍翠玉徐魁
- 关键词：姜黄素心肌纤维化高糖心肌成纤维细胞
- AMPKα2基因敲除鼠饲养繁殖及基因鉴定被引量：2
- 2020年
- 目的探讨AMPKα2基因敲除小鼠的饲养繁殖以及子代的鉴定方法,为进一步研究AMPKα2基因在糖尿病心肌病中的作用提供动物模型。方法引进的AMPKα2基因敲除小鼠均为杂合子基因型,2雌1雄同窝进行饲养繁殖,从仔鼠的尾尖提取DNA,用PCR的方法扩增目的基因片段,然后进行核酸电泳判断基因型。结果子代小鼠繁殖成功并获得野生型、敲除杂合子及敲除纯合子3种基因型。然后选用雌雄均为纯合子,按照2∶1合笼进行大量繁殖,获得了一批AMPKα2敲除纯合子基因型小鼠。结论依据正确的饲养繁殖及可靠的基因型鉴定方法,可利用AMPKα2基因杂合子小鼠繁殖出所需数量的纯合子小鼠。
- 张飞雪吴宁华汪佳佳许丹丹刘秀芬
- 关键词：小鼠饲养繁殖基因鉴定
- 姜黄素缓解糖尿病小鼠脑组织氧化损伤的机制研究
- 2024年
- 目的探讨姜黄素(Cur)对糖尿病(DM)小鼠脑组织氧化损伤的改善情况。方法高脂喂养联合STZ腹腔注射构建小鼠DM模型,治疗组小鼠灌胃给予姜黄素。试剂盒检测小鼠脑组织中SOD活力和MDA含量;Western blot法检测小鼠脑组织中p-AKT/AKT、p-AMPK/AMPK、p-GSK3β/GSK3β、p-TAU/TAU蛋白的表达。结果与DM组相比,Cur治疗组小鼠脑组织中SOD显著上调(P<0.01),MDA含量显著下调。AKT、AMPK、GSK-3β蛋白表达水平没有显著变化,p-AKT、p-AMPK、p-GSK3β蛋白表达水平均上调,显示AKT/AMPK/GSK3β通路被激活。Cur治疗后,p-TAU蛋白表达降低。结论Cur可能通过AKT/AMPK/GSK3β通路缓解DM小鼠脑组织的氧化损伤,降低TAU蛋白磷酸化水平。
- 姚月郭霜郭西英刘秀芬舒婷雷敏
- 关键词：姜黄素糖尿病
- 姜黄素改善糖尿病小鼠脑部Aβ沉积机制研究
- 2024年
- 目的 结合网络药理学、分子对接及实验验证姜黄素(Cur)缓解糖尿病小鼠脑部β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积的分子机制。方法 应用网络药理学筛选Cur与糖尿病小鼠认知功能障碍(DCD)的共同靶点;Autodock软件进行分子对接;Western blot、q-PCR检测相关蛋白及mRNA表达水平。结果 Cur与DCD的共同靶点主要富集于PI3K/AKT信号通路;分子对接显示Cur与AKT1、NF-κB和TNF-α结合;Western blot显示,DM小鼠p-PI3K、p-AKT、p-GSK-3β、BACE1蛋白表达减少,APP蛋白表达增加,Cur给药逆转了相关蛋白的表达;DM小鼠TNF-α、IL-6、IL-1β炎性因子的mRNA水平显著增加,Cur给药逆转了相关基因的表达。结论 Cur可能通过PI3K/AKT/GSK-3β通路抑制炎症改善糖尿病小鼠脑部Aβ的沉积。
- 张雨晴何昂郭霜雷敏刘秀芬郭西英
- 关键词：网络药理学糖尿病姜黄素AΒ
- 葛花中总黄酮含量测定及提取工艺优化被引量：3
- 2019年
- 目的葛花中总黄酮含量的测定及提取工艺的优化。方法以总黄酮提取率为考察指标,采用冷凝回流、分光光度检测的方法,考察了单因素乙醇体积分数、物料比、提取时间对提取率的影响,采用3因素4水平[L16(43)]的正交实验,优化了提取工艺。结果最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数为80%,物料比为1∶25(g∶m L),提取时间为1. 5h,提取4次,提取率为40. 54%。结论优化后的葛花总黄酮提取工艺合理可行,能为实际生产提供参考。
- 张鹏杰张飞雪刘秀芬杨晓松
- 关键词：葛花总黄酮分光光度法
- 低分子柑桔果胶粉对哮喘小鼠Th1/Th2平衡及核因子NF-κB表达的影响被引量：2
- 2016年
- 目的探讨核因子-κB(NF-κB)和Th1/Th2免疫失衡在哮喘小鼠模型中的作用及低分子柑桔果胶粉防治的机制。方法用卵清白蛋白(OVA)建立哮喘模型。BALB/c小鼠随机分为四组:正常对照组、哮喘组、低分子柑桔果胶治疗组、地塞米松治疗组,每组10只。留取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞总数计数和分类计数;应用ELISA法检测BALF中IL-4、IFN-γ浓度,采用免疫组化检测NF-κB的表达。结果低分子柑桔果胶粉治疗组血和BALF中IL-4的含量明显低于哮喘组(P<0.05);低分子柑桔果胶粉治疗组哮喘小鼠肺组织中NF-κB阳性细胞百分比显著低于哮喘组(P<0.05);哮喘小鼠肺组织中NF-κB表达与BLAF中的IL-4浓度成显著正相关(P<0.05),而与BLAF中的IFN-γ浓度成显著负相关(P<0.01)。结论低分子柑桔果胶粉能降低支气管哮喘小鼠血清及BALF中炎症因子IL-4的浓度,减轻支气管哮喘模型小鼠肺组织病理损害,可能的机制是调节Th1/Th2平衡及抑制NF-κB激活,减少气道上皮的NF-κB表达,从而阻止哮喘的发生发展。
- 黄娟刘秀芬余红蕾王立琼程首超程学文赵红玲
- 关键词：哮喘NF-ΚBIL-4TH1/TH2平衡
