赵盼
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
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- NFAT5基因报告载体的构建及其与miR-155关系的实验研究被引量：1
- 2017年
- 目的通过生物信息软件预测出miR-155的靶基因,构建miR-155靶基因荧光素酶基因报告载体,验证其与miR-155的对应关系。方法以数据库miR Base为依据,对miR-155进行生物信息学分析,通过Target Scan、Mir Base、Pic Tar三大软件预测miR-155的靶基因;将设计合成的T淋巴细胞核因子5(NFAT5)及其突变序列NFAT5-mu序列分别克隆至荧光素酶报告质粒pMIR-REPORT^(TM) Luciferace;将第4代人胚胎肾293AD(HEK-293AD)细胞按随机数字表法分为4组:miR-155mimics+pMIR-NFAT5组、miR-155 mimics+pMIR-NFAT5-mu组、miR-155inhibitor+pMIR-NFAT5组、miR155 Negative control+pMIR-NFAT5组与对照质粒(pRL-TK)共转染24h后用双荧光素酶检测试剂盒测定相对荧光素酶活性。结果 Mirbase、TargetScan、PicTar预测交叉结果显示,NFAT5基因3′UTR与miR-155存在结合互补位点;构建pMIR-NFAT5、pMIR-NFAT5-mu重组质粒经酶切及测序鉴定正确;双荧光素酶报告基因检测系统显示:pMIR-NFAT5+miR155 mimics组较pMIR-NFAT5+miR-control组荧光素酶活性降低,差异有统计学意义(P<0.01);而其他组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论成功构建pMIR-NFAT5、pMIR-NFAT5-mu荧光素酶报告基因重组质粒;证实miR-155对NFAT5基因mRNA 3′-UTR具有靶向调控作用,为下一步研究miR-155在吸入性肺损伤机制中的作用提供前期实验室数据和方法。
- 舒彬李文婷刘真张亚洁尹斌赵盼张同威贾赤宇
- 关键词：MIR-155
- MicroRNA-155对胃癌细胞hTERT的调控作用研究
- 胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，成为危害居民健康的主要疾病。目前，医学界对于胃癌缺乏理想的根治方法，因此，对胃癌发病机制的研究有着深远的理论价值和临床意义。体细胞端粒酶的激活是肿瘤发生发展的重要因素之一，85％～90％肿...
- 赵盼
- 关键词：胃癌端粒酶逆转录酶基因调控
- 文献传递
- 肠道微生物与结直肠癌发生发展关系的研究进展被引量：2
- 2016年
- 近些年来,人们越来越关注肠道微生物在结直肠癌中的作用。大量研究已经表明肠道微生物在结直肠癌发生发展过程中发挥着重要的功能。通过益生菌或益生元调节肠道微生态平衡可以达到预防和治疗结直肠癌的目的。本综述围绕肠道微生物与结直肠癌发生发展的关系以及益生菌参与抑制结直肠癌的机制进行论述,为研究该疾病发生发展机制及预防治疗等提供一些思路。
- 袁龙赵盼管静芝
- 关键词：结直肠癌肠道微生物益生菌
- 端粒、端粒酶及人端粒酶反转录酶在肿瘤中的研究进展被引量：4
- 2016年
- 端粒和端粒酶共同维持染色体的结构和功能稳定，研究发现它们与人类肿瘤的发生、发展密切相关。端粒是真核生物染色体末端的脱氧核糖核酸，维持染色体的完整；端粒酶是一种特异的核蛋白结构，可延长端粒并维持端粒稳定，与细胞的无限增殖和癌变直接相关；人端粒酶反转录酶（hTERT）既是端粒酶的重要组成部分，又是端粒酶的限速亚单位，直接决定端粒酶的活性。进一步研究端粒、端粒酶及hTERT的结构、功能及相互作用，有助于了解肿瘤的发生、发展机制，对肿瘤的诊断和治疗意义重大，并且可以为肿瘤治疗提供新靶点。
- 赵盼刘真管静芝
- 关键词：肿瘤端粒端粒酶人端粒酶反转录酶
- miR-155靶向调控SP1、E2F2mRNA转录水平的功能验证
- 2016年
- 目的观察微小RNA155(miR-155)对端粒酶逆转录酶(h TERT)调控相关蛋白特异性蛋白1(SP1)及转录因子E2F2重组质粒表达的影响,为进一步研究miR-155调控肿瘤细胞h TERT表达的机制提供实验基础。方法采用生物信息学预测软件Target Scan和Miranda预测SP1和E2F2 mRNA 3'-UTR是否是人miR-155的作用靶点。针对SP1和E2F2 mRNA 3'-UTR设计互补的两条寡核苷酸,包括目标序列(即SP1、E2F2野生型序列)及突变序列(SP1-mu、E2F2-mu),构建SP1和E2F2 mRNA 3'-UTR报告基因载体p MIR-SP1、p MIR-E2F2、p MIR-SP1-mu和p MIRE2F2-mu。培养HEK-293细胞,采用脂质体法将SP1和E2F2的野生型和突变型p MIR-Luc质粒共转染HEK-293细胞24 h。将细胞分为SP1空白对照组、SP1目标序列组、SP1突变序列组、E2F2空白对照组、E2F2目标序列组、E2F2突变序列组,均加入0.2μg重组质粒、0.01μg对照质粒和0.375μL寡核苷酸,培养24 h。采用双荧光素酶报告基因系统检测双荧光素酶活性,以萤火虫荧光素酶活性值(F)/海肾荧光素酶活性值(R)比值评价miR-155与SP1及E2F2 mRNA 3'-UTR结合效果。结果在线预测结果示,SP1 mRNA 3'-UTR和E2F2 mRNA 3'-UTR均有与miR-155完全互补配对的序列,确定二者均为miR-155的靶基因。经鉴定,SP1和E2F2报告基因重组质粒构建成功。SP1目标序列组F/R低于SP1空白对照组及SP1突变序列组(P均<0.05),E2F2目标序列组F/R低于E2F2空白对照组及E2F2突变序列组(P均<0.05)。结论成功构建了SP1和E2F2报告基因重组质粒,证实miR-155能够靶向结合SP1和E2F2 mRNA 3'-UTR,在转录后水平抑制SP1和E2F2的表达。
- 赵盼刘真管静芝袁龙舒彬尹斌
- 关键词：荧光素酶报告基因人端粒酶逆转录酶
- 肿瘤脂质代谢关键酶的研究进展被引量：4
- 2016年
- 脂质代谢对肿瘤细胞的发生、发展有着重要的影响。正常细胞通过循环系统中的脂质来提供能量，而肿瘤通过自身的从头合成来提供能量，这种异常的脂质代谢不仅为其快速增殖提供能量，而且相关的脂质是参与肿瘤信号通路的重要分子。越来越多的研究发现脂质代谢与肿瘤细胞的发生、发展关系密切，其中脂质代谢过程中的一些关键酶如脂肪合成酶（FASN）、硬脂酰辅酶A脱氢酶1（SCD1）成为研究热点。这些关键酶在肿瘤组织中的表达较正常组织升高，有望作为肿瘤诊断及治疗的新靶点。文章将对脂质代谢与肿瘤发生、发展的关系进行综述。
- 袁龙赵盼朱文华管静芝
- 关键词：脂质代谢脂肪合成酶
