舒彬
- 作品数：3 被引量：12H指数：1
- 供职机构：河北北方学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- NFAT5基因报告载体的构建及其与miR-155关系的实验研究被引量：1
- 2017年
- 目的通过生物信息软件预测出miR-155的靶基因,构建miR-155靶基因荧光素酶基因报告载体,验证其与miR-155的对应关系。方法以数据库miR Base为依据,对miR-155进行生物信息学分析,通过Target Scan、Mir Base、Pic Tar三大软件预测miR-155的靶基因;将设计合成的T淋巴细胞核因子5(NFAT5)及其突变序列NFAT5-mu序列分别克隆至荧光素酶报告质粒pMIR-REPORT^(TM) Luciferace;将第4代人胚胎肾293AD(HEK-293AD)细胞按随机数字表法分为4组:miR-155mimics+pMIR-NFAT5组、miR-155 mimics+pMIR-NFAT5-mu组、miR-155inhibitor+pMIR-NFAT5组、miR155 Negative control+pMIR-NFAT5组与对照质粒(pRL-TK)共转染24h后用双荧光素酶检测试剂盒测定相对荧光素酶活性。结果 Mirbase、TargetScan、PicTar预测交叉结果显示,NFAT5基因3′UTR与miR-155存在结合互补位点;构建pMIR-NFAT5、pMIR-NFAT5-mu重组质粒经酶切及测序鉴定正确;双荧光素酶报告基因检测系统显示:pMIR-NFAT5+miR155 mimics组较pMIR-NFAT5+miR-control组荧光素酶活性降低,差异有统计学意义(P<0.01);而其他组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论成功构建pMIR-NFAT5、pMIR-NFAT5-mu荧光素酶报告基因重组质粒;证实miR-155对NFAT5基因mRNA 3′-UTR具有靶向调控作用,为下一步研究miR-155在吸入性肺损伤机制中的作用提供前期实验室数据和方法。
- 舒彬李文婷刘真张亚洁尹斌赵盼张同威贾赤宇
- 关键词：MIR-155
- 微小RNA-155对脂多糖所致小鼠急性肺损伤的干预作用被引量：11
- 2015年
- 目的 探讨微小RNA （miR）-155对脂多糖（LPS）所致小鼠急性肺损伤的干预作用.方法 将30只小鼠按照随机数字表法分为LPS致伤组、miR-155抑制组、miR对照组、miR-155增强组、空白对照组5组各6只.LPS致伤组和其他3个处理组麻醉后行气管穿刺给予5μl LPS（浓度为20 μg/μl,4 mg/kg）建立小鼠急性肺损伤模型,致伤后30 min起,LPS致伤组气管给予生理盐水;miR-155抑制组、miR对照组、miR-155增强组分别气管给予miR-155抑制剂,miR对照剂,miR-155增强剂,空白对照组不做任何处理.24 h后收集各组肺组织：HE染色观察组织形态,绿色荧光染色法检测各组肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,白细胞介素-1β （IL-1β）的mRNA表达水平,Taqman法检测miR-155抑制组、miR对照组、miR-155增强组中miR-155的表达含量,Western印迹法检测各组环氧合酶-2（COX-2）蛋白的表达,并对数据进行统计学分析.结果 LPS致伤组、miR-155抑制组、miR对照组、miR-155增强组、空白对照组的TNF-α mRNA相对表达量分别为24.49±3.64、38.92±3.40、36.00±3.86、12.56±2.06、1.04 ±0.41;IL-1β mRNA相对表达量分别为55.96±4.87、62.90±6.41、59.99±6.48、25.33±3.50、1.11±0.44,miR-155增强组与LPS致伤组、miR-155抑制组、miR对照组差异均有统计学意义（均P＜ 0.05）,而LPS致伤组、miR-155抑制组、miR对照组间差异均无统计学意义;上述5组COX-2蛋白相对表达量的灰度值分别为0.94±0.06、0.96±0.09、0.91 ±0.03、0.79±0.04、0.63±0.07,空白对照组均显著低于其他各组（均P＜0.05）.结论 miR-155可有效减弱LPS所致小鼠急性肺损伤炎症反应.
- 李文婷舒彬刘真陈领张园园尹斌冯胜娟吕晓武贾赤宇
- 关键词：微RNAS脂多糖类急性肺损伤小鼠
- 活化性T淋巴细胞核因子5在烟雾吸入性急性肺损伤中的作用研究
- 据统计，约5％～10％烧伤患者并发吸入性肺损伤，重度死亡率可达80％以上，是早期烧伤患者主要的死因之一。虽然针对吸入性损伤的研究一直是国内外研究的热点，但其关键因素始终未能得到突破性进展，从而导致其死亡率居高不下。因此，...
- 舒彬
- 关键词：急性肺损伤发病机制
- 文献传递
