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周仁

作品数：2 被引量：5H指数：1
供职机构：天津医科大学更多>>
发文基金：天津市21世纪青年科学基金卫生部科学研究基金更多>>
相关领域：生物学医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 2篇CDNA文库
  • 1篇胰岛
  • 1篇胰岛细胞瘤
  • 1篇胰岛肿瘤
  • 1篇鼠脑
  • 1篇肿瘤
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞瘤
  • 1篇克隆
  • 1篇分子
  • 1篇分子克隆
  • 1篇大鼠脑

机构

  • 2篇天津医科大学

作者

  • 2篇宋学文
  • 2篇赵崇
  • 2篇郭善一
  • 2篇周仁
  • 2篇张镜宇

传媒

  • 1篇中国糖尿病杂...
  • 1篇生物化学与生...

年份

  • 1篇1996
  • 1篇1995
共 2 条 记 录，以下是 1-2
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排序方式：
大鼠脑cDNA文库的构建被引量：4
1996年
采用简单高效的ｃＤＮＡ合成技术制备Ｗｉｓｔａｒ大鼠脑ｃＤＮＡ基因文库，以纯化的ｐｏｌｙ（Ａ）＋－ＲＮＡ为模板，含ＮｏｔＩ切点的ｏｌｉｇｏ－（ｄＴ）１５为引物，在反转录酶的作用下，合成第一股单链ｃＤＮＡ；用Ｅ。ｃｏｌｉＲＮａｓｅＨ除去模板ＲＮＡ，并以Ｅ．ｃｏｌｉＤＮＡ聚合酶Ｉ，Ｅ．ｃｏｌｉＤＮＡ连接酶和Ｔ４ＤＮＡ聚合酶催化合成ｃＤＮＡ第二条链，即成为双链ｃＤＮＡ；此双股ｃＤＮＡ除０．５μｇ用于插入ｐＳＰＯＲＴＩ载体，转入Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５α，建成ｃＤＮＡ文库外，其余保存在－２０℃，以此ｃＤＮＡ为模板，应用ＰＣＲ方法，先后克隆了谷氨酸脱羧酶（ＧＡＤ，１８００ｂＰ）、神经元特异性烯醇化酶（ＮＳＥ，１３４０ｂＰ），甲状腺激素受体（Ｔ３－ｒｅｃｅｐｔｏｒ，１２３０ｂｐ）、胆囊收缩素（ＣＣＫ，３４５ｂｐ）的全编码基因．
宋学文赵崇周仁郭善一张镜宇
关键词：CDNA文库分子克隆
人胰岛细胞瘤cDNA文库的构建被引量：1
1995年
采用一种简单高效的互补脱氧核糖核酸（ｃＤＮＡ）克隆技术制备人胰岛细胞瘤的ｃＤＮＡ文库。方法的主要过程如下：以人胰岛细胞瘤的Ｐｏｌｙ（Ａ）＋－ＲＮＡ为模板，以含ＮｏｔＩ切点的ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）１５为引物，在反转录酶作用下合成第一股单链ｃＤＮＡ；用Ｅ．ｃｏｌｉＲＮａｓｅＨ除去Ｐｏｌｙ（Ａ）＋－ＲＮＡ，并以Ｅ．Ｃｏｌｉ　ＤＮＡ　Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　Ｉ　Ｅ．Ｃｏｌｉ　ＤＮＡ　Ｌｉｇａｓｅ和Ｔ_４　ＤＮＡ　Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ催化合成第二股即成为双链ｃＤＮＡ；加接ＳａｌＩ接头并经ＮｏｔＩ酶切后，将ｃＤＮＡ通过ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－５００ＨＲ柱使大小不同的片段分离，再以质粒ｐＳＰＯＲＴ１为载体与ｃＤＮＡ退火连接并转化至Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５ａ，得到人胰岛细胞瘤的ｃＤＮＡ文库。克隆效率为１×１０６转化子／μｇｃＤＮＡ，有ｃＤＮＡ插入片段的转化子占９２％。
宋学文郭善一周仁赵崇张镜宇
关键词：胰岛细胞瘤胰岛肿瘤CDNA文库
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